免疫组织化学法与酶联免疫法对胰岛细胞抗体检测的比较

目的 比较免疫组织化学法与酶联免疫吸附法 (ELISA)测定胰岛细胞抗体 (ICA)的阳性率。 方法 对同一批 2 0 0份血清标本 ,在北京、上海两地三个三甲医院内分泌实验室分别采用免疫组织化学技术POPA法、ABC法及ELISA法检测ICA。 结果 免疫组织化学POPA法与ABC法检测ICA的阳性率和阴性率基本一致 ,而用ELISA法检测的阳性率低 ,假阳性率、假阴性率高。 结论 与ELISA法相比 ,用免疫组织化学法测定ICA的准确性高 ,重复性好 ,宜推广应用于临床。

酶联免疫法测定甘精胰岛素中单链前体残留研究

目的 建立酶联免疫法检测甘精胰岛素中单链前体残留,为甘精胰岛素药物质量控制和安全性评价提供新方法。方法采用双抗夹心酶联免疫法,以甘精胰岛素原为标准品,建立单链前体残留检测方法,验证方法的重复性、准确度、范围和精密度,并应用该方法检测9批甘精胰岛素原料药。结果在0.156~10.00 ng·mL^(-1)浓度范围内,对甘精胰岛素原标准品进行四参数曲线拟合,曲线相关系数R~2大于0.99,方法准确度较高、重复性良好。重复检测3批甘精胰岛素原料药,平均加标回收率在104%~113%范围内,RSD%小于10%,方法精密度良好。9批样品中单链前体残留量均小于1 ng·mg^(-1)。结论建立的酶联免疫法可用于甘精胰岛素及其他重组人胰岛素类似物中单链前体残留量的质量控制和安全性评价。

特异性T细胞体外释放酶联免疫法检测结核病的临床应用

目的:探究特异性T细胞体外释放酶联免疫法检测结核病的临床应用价值。方法:选取疑似发生结核病患者128例进行临床研究,患者均在医护人员辅助下完成结核菌素皮肤试验、特异性T细胞体外释放酶联免疫法、结核分枝杆菌分离培养检验,以结核分枝杆菌分离培养结果为金标准,统计前两种方法的诊断结果与诊断效能。结果:结核分枝杆菌分离培养结果如下,阳性、阴性检出率分别是62.50%与37.50%。结核菌素皮肤试验、特异性T细胞体外释放酶联免疫法的阳性率、阴性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。特异性T细胞体外释放酶联免疫法的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值、阴性预测值大于结核菌素皮肤试验(P<0.05)。结论:结核病临床诊断中应用特异性T细胞体外释放酶联免疫法,诊断效能较好,值得临床推广。

酶联免疫法测定人碱性成纤维细胞生长因子脂质体的包封率

建立了一种灵敏的定量检测人碱性成纤维细胞生长因子（hbFGF）脂质体中hbFGF含量的酶联免疫（ELISA）方法,应用于测定hbFGF脂质体的包封率。通过用hbFGF标准品溶液包被酶标板,加入特异性的鼠抗人hbFGF抗体（一抗）和山羊抗鼠IgG（二抗）,采用多因素棋盘滴定方法确定最佳实验条件为：一抗浓度200μg/L,二抗浓度50μg/L。本方法的检出限为0.86μg/L,工作浓度范围1.0~10μg/L,批内RSD为3.95%~4.27%,批间RSD为4.19%~7.21%,不同操作者批内和批间的RSD分别为6.21%和9.12%,可重复性良好。本方法测定hbFGF脂质体超滤液和氯仿提取液中hbFGF含量分别为（3.325±0.193）μg/L和（18.454±1.063）μg/L,组内RSD分别为4.69%和4.52%。hbFGF脂质体包封率为82.06%。本方法特异性高、重复性好、快速、简便,可用于hbFGF脂质体包封率及其它含hbFGF制剂的含量测定。

异戊烯基腺苷组细胞分裂素的快速酶联免疫吸附测定法的建立

从样品制备，ＥＬＩＳＡ类型及免疫反应时间三方面着手建立了异戊烯基腺苷（ｉＰＡ）组细胞分裂素的快速酶联免疫吸附测定法。用ＮａＩＯ４氧化合成免疫原ｉＰＡ－Ｎ９－ＢＳＡ（ＢＳＡ：牛血清白蛋白）。由此获得的免抗血清效价达１：３４５００。交叉反应试验表明该抗血清只识别ｉＰＡ组细胞分裂素。因此本研究中采用直接型（即固相抗体型）ＥＬＩＳＡ，并将最佳免疫反应平衡时间缩短至３０ｍｉｎ（４℃）。所建立的ｉＰＡ组ＥＬＩＳＡ检测极限为４．７ｆｍｏｌｉＰＡ／孔，线性检测范围０．０１～５０ｐｍｏｌｉＰＡ／孔，板内、板间的变异系数分别为３．７％和５．３％。样品的稀释曲线与标准曲线平行，回收率为８７．１％，表明本研究中采用的８０％甲醇提取、Ｓｅｐ－ｐａｋＣ１８柱初纯化的快速制样程序适合于该ＥＬＩＳＡ。对大豆植株不同部位ｉＰＡｓ含量测定结果表明，根瘤与根尖内ｉＰＡｓ含量显著高于幼叶与顶芽内的ｉＰＡｓ含量。

放射性同位素示踪法和酶联免疫法研究重组人碱性成纤维细胞生长因子在家兔体内的药代动力学

目的比较用放射性同位素示踪法和酶联免疫法两种方法研究重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)在家兔体内的药代动力学结果的异同。方法用放射性同位素125I标记示踪法和酶联免疫法(ELISA)两种方法测定rhbFGF在家兔血清中的经时浓度。结果家兔耳缘静脉注射4,2,1μg/kgrhbFGF后,用放射性同位素125I标记示踪法测得的t1/2分别为9884,7515,7157min,Cltot约5min;酶联免疫法测得的t1/2分别为1718,1624,2392min,Cltot约10min;剂量与AUC皆有良好的线性关系(r同位素=09999;rElisa=09982)。两种方法所得的结果有相关性,同时也存在较大差异,rhbFGF在家兔体内的消除比125IrhbFGF快。结论放射性标记的药物在动物体内的处置不等同于非标记药物。

酶联免疫斑点法检测鼻咽癌病人特异性细胞毒细胞

目的 了解鼻咽癌病人细胞免疫状况 ,为鼻咽癌的细胞免疫治疗提供实验依据。方法 用酶联免疫斑点法 (Enzyme linkedimmunospotassay ,Elispot)检测 19例鼻咽癌病人及 11例正常人EB病毒LMP2 (EBV LMP2 )特异性细胞毒细胞 (CTL)。结果 鼻咽癌病人组仅部份肽特异CTL阳性 4例 ,全部肽特异CTL无一例阳性 ,阳性率 2 1%。正常人组全部肽特异CTL阳性 8例 ,部份肽特异CTL阳性 3例 ,阳性率 10 0 %。两组比较 χ2 =17.37,P <0 0 1。结论 鼻咽癌病人对EB病毒特异性细胞免疫功能低下 。

细胞培养和酶联免疫法检测沙眼衣原体的比较研究

目的比较细胞培养和酶联免疫法(EIA)检测沙眼衣原体的效果。方法收集性病门诊患者标本1 350例分别进行细胞培养和EIA法检测,另将两法检测结果不相符的标本采用荧光PCR复检,比较分析细胞培养,EIA法与综合结果的相符性。结果分析表明细胞培养与EIA法检测沙眼衣原体的敏感性分别为65.77%和93.96%,特异性分别为100%和99.0%。结论EIA法检测沙眼衣原体有较高的敏感性而且方法简便、快速,可以用于大规模标本的检测,是世界目前实验室最普遍的衣原体筛查方法。

酶联免疫法检测间甲肾上腺素类物质在嗜铬细胞瘤诊断中的应用

目的：探讨间甲肾上腺素类物质（MNs）用酶联免疫法（ELISA）检测在嗜铬细胞瘤诊断中的价值。方法检测疑似嗜铬细胞瘤患者63例及健康人30例（作对照）血MNs，包括甲氧基肾上腺素（NMN）、甲氧基去甲肾上腺素（MN）水平，嗜铬细胞瘤以术后病理诊断为标准。结果63例临床上疑为嗜铬细胞瘤患者中32例经组织学诊断为嗜铬细胞瘤，其中ELISA检测NMN的特异性95%、敏感性91%，MN特异性92%、敏感性72%，NMN和MN二者合并检测特异性97%、敏感性93%。结论血浆游离MNs是诊断嗜铬细胞瘤的有效生化指标，ELISA法作为一种便捷可靠的检测方法，在诊断嗜铬细胞瘤中有着较高的特异性和敏感性。

反相酶联免疫斑点法检测脐血免疫球蛋白释放细胞的数量

反相酶联免疫斑点法检测脐血免疫球蛋白释放细胞的数量＊李庆生１吴圣楣１应大明１林梓１传统的血清学方法无法区别新生儿血浆中自身分泌的ＩｇＧ与穿越胎盘来自母体的ＩｇＧ。新生儿出生时血清中ＩｇＭ的含量也较低，且几乎检测不出ＩｇＡ。另外，血管内成分可能不是整个...

T细胞酶联免疫斑点法对风湿病患者感染结核分支杆菌的诊断价值

目的探讨T细胞酶联免疫斑点法（T—SPOT-TB）对风湿病患者感染结核分支杆菌的诊断价值及分析风湿病患者潜伏性结核感染的状况。方法选取我院2013年4月至2014年12月收治的30例风湿病合并结核感染患者为实验组．并随机抽取未有结核感染的风湿病患者30例作为对照组。两组均采用T—SPOT．TB和结核菌素皮肤试验（TST）分别进行检测．比较两种方法的敏感度和特异度。进一步对本院收治的371例风湿病患者和371例体检健康的志愿者行T—SPOT．TB和TST检测，分析风湿病患者潜伏性结核感染的状况。结果实验组T—SPOT．TB检测阳性率为80．0％，显著高于对照组的10．0％（X2=29．70．P〈0．01）。T—sPOT．rib诊断的敏感度和特异度分别为80．O％和90．O％，明显高于乃T的46．7％和53．3％（P〈0．05）。T—SPOT．TB的阳性预测值、阴性预测值、约登指数、阳性似然比均明显高于TST（均P〈0．05）。另外，371例风湿病患者T—SPOT．TB检测的阳性率为18．9％，显著高于健康体检志愿者的6．2％（x2=27．16，P〈0．01）。结论T—SPOT．TB对风湿病患者感染结核分支杆菌具有较高的诊断价值．风湿病患者潜伏性结核感染的状况不容乐观。

实时荧光定量-PCR和酶联免疫吸附法检测巨细胞病毒-IgM抗体的比较

目的:比较实时荧光定量-PCR和酶联免疫吸附法检测巨细胞病毒-IgM抗体水平的敏感性及准确率。方法:收集108例孕前筛查妇女,同时采用实时荧光定量-PCR和酶联免疫吸附法检测外周血巨细胞病毒-IgM抗体水平,并对这两种检测方法的阳性率进行比较。结果:实时荧光定量-PCR法阳性率为74%,酶联免疫吸附法为57%,两者差异有统计学意义(P<0.05);18例荧光定量-PCR法阳性的妇女血清巨细胞病毒-IgM拷贝数低于10-4/ml。结论:实时荧光定量-PCR与酶联免疫吸附法相比,对巨细胞病毒-IgM抗体检测具有较高的敏感性和准确率,值得临床推广使用。

不同标本对快速酶联免疫吸附法测定B淋巴细胞活化因子结果的影响

目的 探讨应用快速酶联免疫吸附(InstantELISA)法测定B淋巴细胞活化因子(BAFF)时不同临床标本对其结果的影响,为临床标本的采集及处理提供依据。方法 按要求采集有代表性的外源性干扰临床标本,用奥地利BenderMedSystems公司产品检测。结果 较低程度溶血、高血脂及高浓度黄疸标本对测定结果无显著影响(P >0 .0 5 )。结论 InstantELISA法BAFF检测试剂盒具有受临床常见干扰型标本影响小的特点,是一种准确性、灵敏度、特异性较高的检测体内BAFF的试剂盒。

酶联免疫斑点法检测甲型H1N1流感患者Th1／Th2细胞的变化

目的通过酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测，探讨甲型H1N1流感患者TH1／Th2细胞的变化及其临床意义。方法对40例H1N1患者、42例流感样患者及45例健康体检者采用ELISPOT技术检测TH1／Th2细胞，同时进行外周血中的白细胞、淋巴细胞及其亚群计数。结果H1N1患者的白细胞、淋巴细胞、T细胞计数（包括T4、T8）与流感样患者及健康体检者比较明显偏低（P〈0．05）；B细胞计数与健康体检者比较明显偏低（P〈0．05）；而H1N1患者NK细胞与流感样患者、健康体检者比较．差异均无统计学意义（均P〉0．05）。H1N1组、流感样组和健康对照组中IFN-y特异的ELISPOT检测SFC数量M值分别为23、365、43，H1N1组与流感样组、健康对照组比较，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。H1N1组、流感样组和健康组中IL-4特异的ELtSPOT检测SFC数量M值分别为365、27、23，H1N1组与健康对照组比较，差异有统计学意义（Jp〈0．05）；但与流感样组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论H1N1感染可引起机体淋巴细胞及其亚群的数量发生异常改变，引起患者机体免疫系统的紊乱。通过ELISPOT技术可从单细胞水平明确CD4^＋叮淋巴细胞亚群中的Th1和Th2细胞的异常改变。

酶联免疫吸附试验检测血清抗中性粒细胞胞质抗体方法的建立与临床应用

目的建立总抗原酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)的方法,初步探讨其在ANCA相关血管炎中的表达及临床应用价值。方法从人的中性粒细胞中提取总抗原,用棋盘滴定法选择ELISA测定的最佳条件,确定临界值。测定系统性红斑狼疮(SLE)、肾病、血管炎、类风湿关节炎(RA)等患者血清总ANCA,并与间接免疫荧光(IIF)法、特异性髓过氧化物酶(MPO)-ANCA及蛋白酶3(PR3)-ANCA进行分析比较。结果总抗原ELISA与IIF法检测肾病、SLE、血管炎及RA患者血清ANCA阳性率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。抗原特异性ELISA、IIF法检测肾病、血管炎、RA患者血清ANCA阳性率比较差异均无统计学意义(P>0.05),而SLE差异有统计学意义(P<0.05)。结论ELISA检测ANCA可行且具有广泛的推广应用前景。

用酶联免疫吸附法检测细胞培养物中兔出血症病毒

用本实验室提纯的兔出血症病毒抗体(IgG),采用改良过碘酸钠(NaIO4)交联法,将辣根过氧化物酶(HRP)标记在抗体上,以4×10聚苯乙烯微量酶标板作为载体,用酶联免疫吸附法双抗体夹心法检测了兔肾上皮细胞(RK)培养的RHDV16代、18代细胞毒和羊睾丸细胞(ST)培养的RHDV19代、24代、26代细胞毒,均呈特异性阳性反应,P/N值>2.1,正常细胞培养物标本为阴性结果,P/N值<2.1,试验结果与免疫荧光试验相吻合。

健康教育在T细胞酶联免疫斑点法阳性风湿免疫病患者中的临床价值

目的探讨健康教育在T细胞酶联免疫斑点法阳性风湿免疫病患者中的临床价值。方法选取本院2012年10月-2014年10月诊治的T细胞酶联免疫斑点法阳性风湿免疫病患者88例,采用随机数字表法分为两组,对照组患者44例实施传统健康教育,观察组患者44例实施健康教育路径,比较两组患者疾病知识掌握程度、不良反应认知情况、遵医行为、护理满意度。结果观察组患者疾病知识掌握程度、不良反应认知情况、遵医行为（按时用药、确保用量、定期复诊）好于对照组（P〈0.05）。观察组患者护理满意度高于对照组（P〈0.05）。结论健康教育能提高T细胞酶联免疫斑点法阳性风湿免疫病患者的认知水平,有助于改善遵医行为并提高护理满意度。

酶联免疫法检测血清胰岛素、C肽的研究

目的:探讨酶联免疫法替代放免法检测血清胰岛素、C肽的可行性与准确性。方法:对121例2型糖尿病患者分别应用放免法和酶联免疫法。结果:检测前对同一定值质控标本进行10次重复检测,结果:结果表明EIA试剂稳定性良好,精密度高;EIA与RIA检测比较无显著性差异(P>0.05),但结果偏低。结论:EIA具有操作简便、安全准确等优点,可以替代RIA测定胰岛素和C肽,值得推广使用。

磁微粒化学发光法与酶联免疫吸附法测定抗中性粒细胞胞浆抗体的结果比较

目的:比较分析磁微粒化学发光法与酶联免疫吸附法测定抗PR3抗体、抗MPO抗体的检测结果。方法:分别采用磁微粒化学发光法(A方法)和酶联免疫吸附法(B方法)对166例自身免疫病患者血清、50例健康者血清中抗PR3抗体、抗MPO抗体进行定量检测,对检测结果进行统计分析。结果:A方法测定高、中、低质控血清的批内和批间重复性优于B方法,A、B方法测定质控血清的准确度均符合要求;A、B方法测定抗PR3抗体、抗MPO抗体临床样本的线性相关系数r分别为0.987 8,0.989 6;A、B方法的检测结果采用kappa分析,kappa系数分别为0.897和0.882。结论:磁微粒化学发光法(A方法)测定抗PR3抗体、抗MPO抗体优于酶联免疫吸附法(B方法),更符合临床应用要求。