酶联免疫电转移印迹技术(EITB)检测抗EB病毒特异性DNA酶抗体

本研究用酶联免疫电转移印迹技术,检测血清中抗 EB 病毒特异性 DNA 酶抗体,试图建立一种可常规应用于临床的检测方法。结果表明:50例鼻咽癌患者血清中,26例在52～59KD 范围内出现由4条阳性显带融合而成的阳性反应区;健康成人和其他头颈部肿瘤患者血清无一例在此区域内出现阳性显带,表明其特异性甚高。

日本血吸虫各期虫体的酶联免疫电转移印迹分析及抗原定位研究

本文采用酶联免疫电转移印迹技术（EITB）分析、比较日本血吸虫不同发育时期虫体特定的组分蛋白分子、雌虫、雄虫和虫卵抗原分别与相应的雌、雄虫和虫卵免疫血清反应呈现17、20和8条蛋白带，这三种抗原与其它不同时期虫体免疫血清反应，三者间及彼此间均出现交叉反应，而雌、雄虫和虫卵抗原与其它寄生虫感染血清作用没发现有叉及反应。应用间接荧光抗体试验（IFA）和免疫酶染色试验（IES）对日本血吸虫抗原进行定位研究，其结果相似。血吸虫主要抗原物质来源于成虫表皮、肠上皮和卵内的毛蚴.

酶联免疫转印技术(EITB)在检测人类脑囊虫病患者血清IgG和IgG_4抗体中的应用

本试验对 4组脑囊虫病患者血清中的总 Ig G和 Ig G4亚类抗体水平进行研究。第 1组由未经治疗的 ,通过寄生虫学及临床表现确诊的感染者组成。第 2 ,3,4组由经过 1～ 3,4～ 6和 7～ 9疗程治疗的治疗后患者组成(每一疗程为 10天 ,吡喹酮治疗 ,剂量为 30 m g/kg.d)。用植物亲和层析纯化抗原 ,通过 EITB,检测 4组共 2 4 1份血清样品中的 Ig G和 Ig G4含量。对照组为采用健康个体的 36份血清。另外还检测了 2 7份肝包虫和肝吸虫患者血清。通过与对照组比较 ,4组中的总 Ig G和 Ig G4抗体水平分别为 96 .3%和 97.5% ,93.3%和 78.6 % ,88.0 %和 38.0 % ,86 .1%和 13.9%。4组中的 Ig G水平无显著差异 ( P>0 .0 1)。相对的 ,治疗后患者的 Ig G4抗体水平低于治疗组。对有症状的治疗后患者 ,检测其特异的抗体水平发现 77.1%的患者 Ig G4水平治疗前后有显著差异 ( P<0 .0 0 1) ,而只有 2 1.8%的患者没有显著差异。对于这四组而言 ,被 Ig G识别的抗原没有一种是独特的。许多患者的 Ig G最常识别 GP4 2和 GP2 4这两条带 ,但在最后两组中 ,Ig G4能特异识别 18k Da和13k Da低分子量抗原。36份阴性对照均为阴性。2 7份其他寄生虫感染中有 2例总 Ig G阳性 ,而 Ig G4均为阴性。这些观察结果表明 ,Ig

酶联免疫吸附法和免疫印迹技术检测天疱疮抗体的比较

目的比较酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫印迹技术(IBT)检测天疱疮抗体的临床应用价值。方法对23例天疱疮患者(PV13例,PF10例)及10例正常对照者行ELISA检测血清中抗桥粒芯糖蛋白(Dsg)1和Dsg3抗体滴度;并用正常包皮分离表皮后提取的蛋白为底物行IBT检测,并与ELISA方法进行比较。结果两种方法阳性率均为91.30%,两种方法对PV和PF抗体的检测差异无统计学意义(P=0.400和1.000)。结论 ELISA和IBT在天疱疮的实验室诊断中均有重要价值,ELISA方法更简便、迅速。

酶联免疫印迹技术检测系统性红斑狼疮患者血清7种 ENA 抗体分析

酶联免疫印迹技术检测系统性红斑狼疮患者血清７种ＥＮＡ抗体分析马海军（附属医院皮肤科实验室）关键词酶联免疫印迹技术ＥＮＡ抗体系统性红斑狼疮中图法分类号Ｒ５９３．２４１抗ＥＮＡ抗体即抗磷酸盐缓冲液可提取的核抗原抗体多存在于结缔组织疾病患者体内，文献报道的...

酶联免疫吸附技术(ELISA)和线性免疫印迹技术(LIA)应用于系统性红斑狼疮患者血清中的抗核抗体(ANA)检测中的诊断价值对比

目的:分析对比系统性红斑狼疮患者实施ELISA和LIA诊断的优势。方法:纳入2017年4月至2018年4月本院收治的150例系统性红斑狼疮患者,按随机表法将其分为三组,A组:酶联免疫吸附技术检测;B组:线性免疫印迹技术检测;C组:联合检测。观察其检测准确率、阳性检出率、阴性检出率、抗核抗体分布情况。结果:A、B两组各指标对比均无显著差异,但与C组对比差异显著。结论:系统性红斑狼疮患者实施ELISA和LIA诊断准确性无差异,但联合诊断准确性较高,值得临床诊断借鉴。

呋喃唑酮代谢物分子印迹聚合物的合成及其酶联免疫吸附检测方法的建立

使用分子印迹技术,在96孔酶标板上直接合成了一种可以代替生物抗体的新型呋喃唑酮代谢物(AOZ)人工抗体,并与化学免疫发光法结合。结果表明,制得的酶标板对AOZ的灵敏度为0.008μg/L,批内变异系数为2.4%～3.6%,批内回收率为94%～110%。与SEM、AMOZ、AHD的特异性交叉反应率均小于1.0%,灵敏度高于市售ELISA商品试剂盒的0.02μg/L,同时在精密度、回收率、特异性方面无明显差异,并且可以重复使用。

酶联免疫斑点检测技术研究进展

酶联免疫斑点检测技术（ELISPOT）结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附试验（ELISA）的长处，能够分析经特异抗原活化后分泌细胞因子[如γ干扰素（IFN-γ）、肿瘤坏死因子α（TNF—α）等]的单个效应细胞的频数，具有敏感、特异、易于重复的优点。

分子印记聚合物仿生抗体用于酶联免疫吸附法检测恩诺沙星

在聚苯乙烯酶标板表面直接合成对恩诺沙星具有特异性识别吸附能力的分子印迹聚合物膜,将其作为仿生抗体代替生物抗体,建立直接竞争仿生酶联免疫分析法(ELISA)进行恩诺沙星的检测。结果表明最适条件下仿生酶联免疫方法的最低检出限(IC15)为0.80μg/L,灵敏度(IC50)为65.93μg/L,对恩诺沙星的代谢物环丙沙星有较高的交叉反应率(72.85%),对其它7种喹诺酮类结构类似物的交叉反应率均较低(0%~2.87%)。该方法对鸡肉组织和猪尿两种样品的添加回收实验中(鸡肉加标量分别为2.5、15、75μg/kg;猪尿加标量分别为5、30、150μg/kg),有较高的回收率(鸡肉:97.30%~103.56%;猪尿:94.48%~96.53%),采用HPLC方法与仿生ELISA方法进行对比验证无显著性差异(p>0.05)。该仿生ELISA法准确度、精密度及特异性均较高,步骤简单,与传统ELISA方法相比省时经济,可以应用于实际样品中恩诺沙星残留的快速检测。

微阵列酶联免疫技术检测糖尿病自身抗体的临床应用

目的探讨微阵列酶联免疫技术(Array-ELISA)用于检测糖尿病自身抗体的临床应用价值。方法选择2020年6—12月在广东省中医院就诊的120例糖尿病患者作为研究对象,其中1型糖尿病(T1DM)患者72例作为T1DM组,2型糖尿病(T2DM)患者48例作为T2DM组;另外选择同期23名健康体检者作为正常对照组。采用Array-ELISA作为试验方法,条带免疫印迹法(IBT)作为对比方法,检测各组谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)、胰岛细胞抗体(ICA)、锌转运体8抗体(ZnT8A)和胰岛素抗体(IAA)5种抗体,评价两种方法的一致性;分析Array-ELISA检测各组5种抗体的阳性率,比较单独和同时检测5种抗体的诊断效能。结果Array-ELISA和IBT两种方法检测GADA、IA-2A、ICA、ZnT8A和IAA的总符合率均大于95.00%(GADA为98.60%,IA-2A为98.60%,ICA为97.20%,ZnT8A为97.20%,IAA为95.80%),Kappa值均大于0.75(GADA为0.95,IA-2A为0.93,ICA为0.88,ZnT8A为0.86,IAA为0.85),配对χ2检验的P值均大于0.05(GADA为0.50,IA-2A为0.50,ICA为0.13,ZnT8A为0.63,IAA为0.69),两种检测方法具有高度一致性。Array-ELISA检测T1DM患者5种抗体的阳性率均明显高于T2DM组和正常对照组〔GADA为34.72%(25/72)比0.00%(0/23)、0.00%(0/48),IA-2A为20.83%(15/72)比0.00%(0/23)、2.08%(1/48),ICA为30.56%(22/72)比0.00%(0/23)、0.00%(0/48),ZnT8A为20.83%(15/72)比0.00%(0/23)、0.00%(0/48),IAA为31.94%(23/72)比0.00%(0/23)、2.08%(1/48),均P<0.05〕。Array-ELISA同时检测T1DM组5种抗体的敏感度为58.33%,特异度为97.18%,诊断符合率为77.62%。结论Array-ELISA作为一种新方法同时检测5种糖尿病自身抗体对糖尿病的诊断分型具有一定的临床应用价值。

应用组织印迹技术检测蚕豆病毒感染的方法

组织印迹法（Tissue blotting）是在酶联免疫吸附（Enzyme-linked Immunosorbent Assay ELISA）的基础上发展起来的植物病毒检测技术，该技术不仅保持了ELISA对病毒检测的灵敏度高，特异性强的特点，且大大地简化了操作程序，对病毒的检测更加快速、简便，样点印迹在硝酸纤维膜上能保存3个月以上，检测结果能够直接地显示出病毒感染的部位。该技术尤其适用于蚕豆病毒的大规模普查。

ENA多肽抗体的检测在自身免疫性疾病诊断中的应用

系统性自身免疫性疾病主要指风湿病中属于弥漫性结缔组织的一类疾病，包括系统性红斑狼疮(SLE)，混合性结缔组织病(MCTD)、干燥综合症(SS)、系统性硬皮病(PSS)、多发性肌炎或皮肌炎(PM／DM)类风湿性关节炎(PA)等，抗可提取性核抗原抗体多存在于自身免疫性疾病患者体内，文献报道的有十余种之多。

口蹄疫病毒非结构蛋白3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测

【目的】口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测。【方法】利用原核表达系统表达了FMDV NSP 3A、3B和富含B细胞抗原位点序列的2C蛋白。利用高浓度尿素裂解包涵体,采用稀释法和氧化型、还原型谷胱甘肽系统相结合方法对2C蛋白进行复性。用金属鳌合亲合层析的方法对表达的FMDV NSP 3A、3B和2C进行纯化。采用ELISA方法对比检测了3种纯化蛋白在检测羊血清NSP抗体的效果。【结果】检测得知3A和3B为可溶性表达蛋白,2C以包涵体形式表达。通过Western-blot分析,表明纯化后蛋白能与FMDV感染动物血清发生特异性反应。纯化的3A、3B和复性后的2C融合蛋白与3ABC抗原的检测结果具有很高的符合性。【结论】该研究为建立鉴别FMDV自然感染动物和灭活疫苗免疫动物的酶联免疫电转移印迹技术(EITB)提供了所需的材料。

食品中丙烯酰胺检测方法的研究进展

丙烯酰胺是在食品高温加工过程中产生的小分子有机化合物,具有致癌性。从样品提取、衍生化、净化、富集等前处理过程以及对检测器的选择出发,总结国内外近年来用于检测丙烯酰胺的方法,如从传统的气相色谱、液相色谱及其联用技术,到新兴开发的分子印迹技术、酶联免疫吸附和生物传感器等新检测技术。并根据其适用范围和操作条件,对各分析方法的优点和不足进行讲述,最后对将来丙烯酰胺检测方法发展新思路提供策略和依据。

囊尾蚴病是秘鲁癫痫的主要原因

为了调查囊尾蚴病与癫痫之间的联系,秘鲁研究人员采用酶联免疫电转移印迹(EITB)测试法在利马一家神经病医院498名连续门诊病人的血清中检出了猪肉绦虫抗体。经神经病学和脑电描记术检查之后,病人被分为癫痫或非癫痫两种类型,人数分别为189名和309名。

新书介绍

内容简介：本书以分析仪器为主线，囊括了气相色谱、液相色谱、离子色谱、超临界流体色谱、红外光谱、紫外光谱、核磁共振波谱、毛细管电泳及生物技术，如酶联免疫检测（曰ISA）和聚合物链式反应法（PCR）等。针对某些微量难分离成分的纯化和测定介绍了分子印迹技术和胶体纳米金技术。

贾第虫病免疫学诊断方法及其应用研究进展

蓝氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫)是一种重要的肠道致病原虫,人体感染后可引起腹泻等症状。目前,贾第虫感染诊断主要有病原学、免疫学及分子生物学等方法;其中免疫学诊断技术因快速、简便、敏感性高、特异性强等优点,具有良好的应用前景。本文主要就常用贾第虫感染免疫学诊断技术及其应用情况作一综述。