血清肝纤维化指标酶联免疫试验和放射免疫检测的比较

目的:探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)替代放射免疫分析(RIA)测定血清透明质酸、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原和层粘蛋白含量的可行性. 方法:分别用ELISA法和RIA法检测住院肝病患者87例的4项血清纤维化指标,并比较二者的敏感性、特异性、定量能力和临床实用性. 结果:两种方法的检测结果均能反映患者从急性肝炎到肝硬化的肝纤维化逐渐加重的趋势.但与RIA法比较,ELISA法的敏感性较低,以检测Ⅲ型前胶原(76.5%)和层粘蛋白(65.1%) 时更为明显,主要表现漏检早期患者.在特异性方面, ELISA法的特异性均在80%以上;在定量能力方面,ELISA 法的数值范围较窄,数值偏小,低估严重患者的病情. 结论:ELISA法敏感性较RIA法低,但特异性较好.

在抗-HAV lg M酶联免疫试验中代用抗-HAV阴性的恒河猴血清的研究

国内外一些学者报告,在应用酶联免疫试验(EIA)检测抗-HAV Ig M 时,为了减少非特异性反应,在抗-HAV Ig G 酶结合物的稀释液中,加入1～10%抗-HAV 阴性的正常人血清。我国甲肝呈地方性流行,抗-HAV 阴性的正常人血清不易获得。为此。

不同梅毒螺旋体基因重组抗原酶联免疫试验比较

目的 对单一梅毒螺旋体 (Treponemapallidum ,Tp)基因重组抗原Tp47、Tp42或Tp1 7及联合应用 3种基因重组抗原 (Tp47、Tp42和Tp1 7)酶联免疫试验 (enzymeimmunoassay,EIA)进行比较。 方法 分别用 3种单一Tp基因重组抗原Tp47、Tp42或Tp1 7EIA法 ,检测 1 1份梅毒血凝试验Tp抗体阳性和 2 8份阴性血清 ,并与联合应用 3种基因重组抗原 (Tp47、Tp42和Tp1 7)EIA法比较。 结果 单一基因重组抗原Tp47、Tp42或Tp1 7EIA法的灵敏度分别为1 0 0 % (1 1 / 1 1 )、1 0 0 % (1 1 / 1 1 )和 90 9% (1 0 / 1 1 ) ,特异度分别为 96 4% (2 7/ 2 8)、1 0 0 % (2 8/ 2 8)和 96 4% (2 7/ 2 8) ;联合应用 3种基因重组抗原EIA法的灵敏度和特异度分别为 1 0 0 % (1 1 / 1 1 )和 1 0 0 % (2 8/ 2 8)。结论 单一Tp基因重组抗原EIA法用于梅毒诊断存在一定的假阳性和假阴性反应 ,联合应用 3种基因重组抗原 (Tp47、Tp42和Tp1 7)

电化学发光法用于献血者梅毒特异性抗体酶联免疫试验反应性样本补充试验的效果评价

目的探讨电化学发光免疫分析法(ECLIA)用于梅毒特异性抗体酶联免疫试验(TP-ELISA)反应性样本后续补充试验的可行性。方法选取无偿献血者样本136例,其中TP-ELISA双试剂反应性样本55例,单试剂反应性样本41例,双试剂无反应性样本40例,分别用ECLIA和明胶螺旋体凝集试验(TPPA)及免疫印迹法(WB)检测,以WB法为金标准,比较ECLIA和TPPA法的灵敏度和特异性差异。结果以WB法为金标准,136份样本中ECLIA法敏感度为100.00%,特异性为97.53%,一致率为98.53%;TPPA法敏感度为98.18%,特异性为96.30%,一致率为97.79%;ECLIA和TPPA两种方法 Youden指数分别为0.975 3和0.944 8;ECLIA和TPPA检测一致率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ECLIA具有较高检测敏感度和特异度,且操作方便,自动化程度高,可作为TP-ELISA反应性样本的后续补充试验。

酶联免疫试验两步法检测乙型肝炎病毒表面抗原的影响因素分析

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)两步法检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的影响因素。方法分别在稀释液的量、洗板时机、孵育时间、显色时间等不同条件下对阳性混合血清、阴性混合血清和弱阳性对照血清进行检测。结果使用滴瓶滴加1滴稀释液、不加入稀释液、加入血清后温育时间缩短为45min、加入酶结合物后孵育时间缩短为15min、加入显色剂后显色时间缩短为15min,弱阳性结果较标准方法差异有统计学意义;加入样本孵育1h后洗板,阳性、弱阳性和阴性结果均较标准方法差异有统计学意义。结论 ELISA条件的改变,就强阳性标本而言或许影响不大,但弱阳性标本的结果会被显著影响,尤其是处于临界值(灰区)的标本所受影响可能就更为明显。

脂多糖酶联免疫试验检测方法的优化

目的改进脂多糖(LPS)酶联免疫试验(ELISA)法检测方法,提高ELISA法的灵敏度及特异性。方法将不同浓度(0 mg/ml、0.01 mg/ml、0.1 mg/ml、1 mg/ml、10 mg/ml、100 mg/ml)LPS(100μl)加样于预包被的ELISA板,筛选OD492较高的LPS浓度。按1∶2、1∶20、1∶50、1∶100、1∶200、1∶500稀释比例分别在每孔加入200μl牛酪蛋白、牛血清、山羊血清,筛选OD492较低的封闭液稀释比例。用优化的LPS浓度和封闭液稀释比例,比较牛酪蛋白、牛血清、山羊血清检测LPS灵敏度及特异性,筛选出最佳封闭液。结果 LPS在0.1 mg/ml以上时OD492较高,牛酪蛋白、牛血清、山羊血清在1∶100稀释比例时获得的OD492较低。选择1∶100稀释比例作为封闭液优化稀释比例。按1 mg/ml LPS浓度,1∶100稀释比例,山羊血清OD492显著高于其他封闭液(P<0.05)。按0 mg/ml LPS浓度,1∶100稀释比例,山羊血清OD492显著低于其他封闭液(P<0.05)。结论以1∶100稀释比例的山羊血清作为封闭液的ELISA法对LPS具有较好的灵敏度及特异性。

采用金标斑点法与酶联免疫试验对艾滋病患者的临床测定效果比较分析

目的分析金标斑点法与酶联免疫试验对艾滋病患者的临床测定效果。方法将本院于2013年3月~2015年9月期间进行从业人员体检的14 000例受检人员纳入此研究中,同时在输血前对其进行HIV抗体检查,随后所有受检人员均采用金标斑点法与酶联免疫试验检测,比对其两种检测效果。结果 30例HIV已经知道结果的血清样本分别采用金标斑点法和酶联免疫试验进行检测后10例结果呈现阳性,同时14 000例受检人员中,酶联免疫试验初筛检测出阳性例数为9例,金标斑点法初筛检测出阳性例数为12例,经艾滋病中心实验室检测可知,共有6例为确定阳性,阳性率0.04%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论经过分析可知,金标斑点法对急症患者和小型HIV实验室抗体筛查更为适用,而酶联免疫试验则对样本量过大检测更为适用。

HIV抗体酶联免疫试验结果的影响因素研究

目的探讨抗人免疫缺陷病毒(HIV)酶联免疫试验结果的影响因素,提高筛选检查准确性,为艾滋病的防控工作提供快速准确的科学依据。方法抽取2017年间送检至实验室的患者血清样本300例,进行回顾性分析,采用酶联免疫试验进行初筛选,由市疾控中心对其进行确认,同时对试验中所用试剂、标本、操作进行详细分析。结果在检测的样本中,上报20例,确认阳性15例,确认阴性4例,1例为HIV抗体不确定。结论临床应严格按照试剂盒说明书以及试剂操作要求规范试验操作,提高酶联免疫试验检测HIV筛选准确率,确保实验前后质量控制。

酶联免疫试验研究与应用

本文介绍了ELISA法的基本原理及ELISA法在临床医学、生物制药、食品科学、农牧渔业等方面的应用,并对该检测技术的发展趋势及应用前景进行了展望。

沙眼衣原体酶联免疫试验法和细胞培养法比较

目的评价一种改进的沙眼衣原体酶免疫法(ELISA)诊断沙眼衣原体感染的临床应用价值。方法180例性病门诊有泌尿生殖道症状的患者采用ELISA法和细胞培养法检测泌尿生殖道标本中的沙眼衣原体,两种试验结果不符合者采用PCR检测。结果180例受检者中,ELISA法阳性17例,细胞培养阳性18例。与“扩大金标准”比较,ELISA法和细胞培养法的敏感性分别为85%和90%。结论ELISA法检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染,敏感性和特异性高,且方便、快速,尤其适合大批量样本的检测,值得在临床应用。

IgA缺乏症献血者酶联免疫试验筛查方法的建立

目的建立适合用于大规模IgA缺乏症献血者筛选的ELISA检测方法。方法采用间接酶联免疫法,在微孔板中包被羊抗人IgA、用辣根过氧化物酶标记羊抗人IgA抗体作为酶标二抗。结果建立的ELISA测定法灵敏度为0.1μg/mL,IgA浓度为0.1、100μg/mL的批间变异系数（CV）是1.74%、3.49%,批间CV中位数为3.48%（范围：1.83%~6.96%）。检测过程约80min。结论成功建立了IgA缺乏症筛查的ELISA测定法,其灵敏度高、特异度强、省时、操作简易,可用于大规模筛选IgA缺乏症献血者及建立IgA缺乏献血者库。

影响HIV抗体酶联免疫试验结果的主要因素分析

HIV抗体酶联免疫吸附试验(ELISA法)因其快速简便、特异性强、灵敏度高、重复性好等优点普遍应用于HIV抗体初筛试验[1],各级疾控中心及中小医院多采用手工操作,实验过程涉及标本的收集保存、试剂准备、加样、温育、洗板、显色、比色、结果判断和结果报告及解释等方面多步骤,其中任一步骤的操作不当都会影响测定结果,且以加样、温育和洗板等步骤尤其重要。在血液中心和大型医院,一般对HIV的检测会采用全自动仪器,上机操作需要针对试剂设定程序,其程序设定的依据同样需要参考以上方面。

γ-干扰素释放酶联免疫试验在结核病诊断中的临床价值

目的对γ-干扰素释放酶联免疫试验在结核病诊断中的临床价值进行分析。方法选取肺结核病患者86例为观察组,另取同期非肺结核病患者和健康体检者各86例,分别定义为非肺结核组和对照组,对3组受试者展开全血、血清、痰液γ-干扰素释放酶联免疫试验,同时进行抗酸染色、结核抗体痰TB-DNA检测,并对检测结果进行统计分析。结果3组TB-IGRA、痰涂片、结核抗体、TB-DNA检测阳性率比较,差异具有统计学意义(P<0.05);TB-IGRA对结核杆菌诊断的敏感性为81.18%,特异性为86.13%,较抗酸染色、结核抗体、痰TB-DNA检测敏感性发生显著升高(P<0.05)。结论γ-干扰素释放酶联免疫试验在结核病诊断中具有显著临床价值,可为临床肺结核病诊断提供可靠的参考依据,值得关注并推广。

酶联免疫试验两步法检测乙型肝炎病毒表面抗原的影响因素研究

目的:探究为检测乙型肝炎病毒表面抗原的影响因素采用酶联免疫试验两步法的效果。方法:选献血员乙肝标本300例,分别在稀释液的容量、洗板时间、孵育时间等因素下对阳性混合的血清、阴性混合的血清、阳性参照血清进行监测。结果:利用滴瓶滴加入1滴的稀释液、不加入稀释液、加入血清之后的温育时间变为45 min,加入酶之后孵育时间、颜色显露的时间都缩短至15 min,弱阳性具备统计学意义(P<0.05);进行洗板、阳性、弱阳性、阴性的结果和标准化方法对比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:酶联免疫试验对强阳性标本的结果影响不大,对弱阳性标本的结果影响较大。

血凝抑制试验和酶联免疫试验应用于乙型脑炎诊断的比较

目的：比较血凝抑制试验和酶联免疫试验在乙型脑炎实验诊断上的价值。方法：对医院送检病人血清，用两种方法做了对比。结果：共检测患者血清 70份，血凝抑制试验阳性 22份，阳性率 31. 4％，酶联免疫试验阳性 26份，阳性率 37. 1％。结论：两法均可测到 IgM抗体，但酶联免疫试验更为敏感。

介绍一种自制简易洗板器在酶联免疫试验中的应用

在酶联免疫试验中,多数中小医院试验室至今仍采用可调定量加液器进行单孔加液手上洗板,由于每孔需要反复多次清洗且费力费时,所以笔者在多年实践工作中,研制出一种简易手动洗板器,可一次性成排加液,使用这种简易洗板器,大大的缩短了洗板时间,提高了工作效率,并具有加液快速准确,制做简便,结果准确之优点.可在中小医院实验室推广使用,现将此技术介绍给大家,供同行们参考.

应用单抗酶联免疫试验检测猪瘟免疫抗体

应用猪瘟单克隆抗体酶联免疫吸附试验检测互助、乐都、平安三县猪血样 336份 ,结果猪瘟免疫抗体阳性 331份 ,阳性率为 98 51%。群体保护率为 96 4 3%。

介绍一种自制多孔手动洗板器在酶联免疫试验中的应用

目前酶联免疫实验在免疫学中被广泛应用,部分规模较大的医院已经使用进口全自动洗板机,速度快、工作效率高.由于进口全自动洗板机价格昂贵,多数中小医院尚不能普及使用,那么用可调定量加液器进行手工单孔洗板,仍然是一项很困难的工作.