酶联技术在水产品中呋喃唑酮代谢物AOZ的检测中的应用

用酶联免疫检验技术(ELISA)检测呋喃唑酮(Furazolidone)代谢物AOZ。AOZ经过16h的衍生后和酶联结合物对微孔中的抗体进行竞争反应,利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的基本原理,在酶标仪上450nm处测定吸光强度,进行定性定量分析。

酶联免疫分析技术在食品安全快速检测中的应用

酶联免疫分析技术操作简单、灵敏度较高、技术成本较低且能够应用到多种成分检测中,因此被广泛应用于大批量食品安全快速检测中。随着相关技术的革新,酶联免疫分析技术在实践检测中的应用也愈发成熟,同时衍生出众多新型技术,满足了食品快速、高质量检测需求。基于此,本文探究了酶联免疫分析技术在各类食品检测中的应用,分析了酶联免疫分析技术的优势,希望能够为广大从业人员提供些许参考。

酶联免疫技术检测玉米弯孢菌叶斑病的研究

本文通过提取玉米弯孢菌叶斑病病原菌蛋白质 ,免疫家兔制备抗血清 ,用不等弯孢菌、玉米小斑病菌、玉米圆斑病菌和玉米大斑病菌 (与弯孢菌相似或相近 )蛋白吸附除去抗血清中的交叉反应抗体 ,提高了抗体的特异性。建立了酶联免疫检测玉米弯孢菌叶斑病的技术 ,应用ABC -ELISA和间接ELISA检测玉米弯孢菌叶斑病 ,比较了两种方法的灵敏性和特异性。结果显示ABC -ELISA较间接ELISA检测灵敏度高 2到 5倍。

酶联免疫技术与食品安全快速检测

本文首先对酶联免疫检测技术(ELISA)做了简要介绍。其次,就该技术在食品安全检测与分析中的应用进行了详细的评述,主要包括这几个方面:食品中的毒素、残留农药、食品微生物、食品的品质和重金属污染等的检测;最后阐述了该项技术的发展趋势及其在食品安全性检测中的应用前景。

酶联免疫斑点技术在快速诊断结核性胸膜炎中的应用

目的探讨酶联免疫斑点技术(enzyme-link immunospot assay,ELISPOT)在快速诊断结核性胸膜炎中的临床价值。方法应用ELISPOT技术检测28例结核性胸膜炎患者、30例非结核患者对照者外周血单个核细胞的INF-γ,同时对24例病例和全部对照者行结核菌素皮肤实验(tuberculin skin test,TST)。结果病例组ESAT-6形成SFCs数为84(17.3,171.0)/2.5×105PBMCs,高于对照组的9(2.0,15.5)/2.5×105PBMCs,差异有统计学意义(P<0.001),病例组CFP-10形成的SFCs数为115.5(21.5,227.5)/2.5×105PBMCs,也高于对照组的7(2.0,16.5)/2.5×105PBMCs,差异有统计学意义(P<0.001)。病例组TST硬结直径中位数为8.0 mm,对照组TST硬结直径中位数为4.8 mm,差异无统计学意义(P=0.099)。ELISPOT灵敏度为85.7%,特异度为80.0%;TST灵敏度为70.8%,特异度为50.0%。胸腔积液抗酸杆菌检查的敏感度只有18.5%。ELISPOT特异度和阳性预测值高于TST,差异有统计学意义(P值分别为0.015和0.025);ELISPOT的敏感度和阴性预测值也高于TST,但差异无统计学意义(P值分别为0.19和0.25)。ELISPOT和TST检测结果一致性较差(κ=0.26)。结论 ELISPOT检测结核性胸膜炎具有较高的敏感度和特异度,可作为临床实践中快速诊断结核性胸膜炎的辅助诊断技术,使患者得到准确、及时的诊断和治疗。

酶联免疫吸附分析技术及其在食品农药残留检测中的应用

农药残留对食品安全的影响越来越明显,这就对食品农药残留的快速检测提出高要求。本文主要介绍酶联免疫分析技术的基本原理以及建立酶联免疫技术的关键技术,并对其在食品农药残留检测中应用进行综述。

酶联免疫转印技术(EITB)在检测人类脑囊虫病患者血清IgG和IgG_4抗体中的应用

本试验对 4组脑囊虫病患者血清中的总 Ig G和 Ig G4亚类抗体水平进行研究。第 1组由未经治疗的 ,通过寄生虫学及临床表现确诊的感染者组成。第 2 ,3,4组由经过 1～ 3,4～ 6和 7～ 9疗程治疗的治疗后患者组成(每一疗程为 10天 ,吡喹酮治疗 ,剂量为 30 m g/kg.d)。用植物亲和层析纯化抗原 ,通过 EITB,检测 4组共 2 4 1份血清样品中的 Ig G和 Ig G4含量。对照组为采用健康个体的 36份血清。另外还检测了 2 7份肝包虫和肝吸虫患者血清。通过与对照组比较 ,4组中的总 Ig G和 Ig G4抗体水平分别为 96 .3%和 97.5% ,93.3%和 78.6 % ,88.0 %和 38.0 % ,86 .1%和 13.9%。4组中的 Ig G水平无显著差异 ( P>0 .0 1)。相对的 ,治疗后患者的 Ig G4抗体水平低于治疗组。对有症状的治疗后患者 ,检测其特异的抗体水平发现 77.1%的患者 Ig G4水平治疗前后有显著差异 ( P<0 .0 0 1) ,而只有 2 1.8%的患者没有显著差异。对于这四组而言 ,被 Ig G识别的抗原没有一种是独特的。许多患者的 Ig G最常识别 GP4 2和 GP2 4这两条带 ,但在最后两组中 ,Ig G4能特异识别 18k Da和13k Da低分子量抗原。36份阴性对照均为阴性。2 7份其他寄生虫感染中有 2例总 Ig G阳性 ,而 Ig G4均为阴性。这些观察结果表明 ,Ig

酶联免疫斑点技术辅助诊断小儿结核性脑膜炎的临床意义

目的：探讨酶联免疫斑点技术（ELISPOT）在小儿结核性脑膜炎诊断中的应用价值。方法：收集0～14岁疑似结核性脑膜炎患儿共17例进行ELISPOT检测，对最终确诊病例进行分析，并与头颅CT／MRI检查、结核菌纯蛋白衍生物试验（PPD）试验、脑脊液检查、结核抗体检查、胸片结果相对比。结果：在最终确诊的13例结核性脑膜炎中，头颅CT／MRI、PPD、脑脊液、结核抗体、胸片在入院5d内的检查阳性率分别为30．8％、30．8％、23．1％、12．5％、30．8％，而ELISPOT阳性率为76．9％，显著高于其它辅助检查方法（P〈0．05）。结论：ELISPOT检硷灵敏、快速，对于小儿结核性脑膜炎有早期诊断价值。

酶联荧光免疫分析技术检测粪便中艰难梭菌毒素A/B

目的应用酶联荧光免疫分析(ELFIA)技术及PCR联合检测粪便标本中艰难梭菌毒素A/B(CDAB),分析不同临床表现的住院患者粪便标本中CDAB的检出情况。方法收集北京大学第一医院2010年8月～11月242位住院患者粪便标本,用ELFIA法检测CDAB,对检测结果为可疑的标本用PCR复测。将患者分为非抗生素相关腹泻组和抗生素相关腹泻组,对两组的CDAB阳性率进行χ2检验,并分析检测结果与临床表现的相关性。结果 242位患者中,22例ELFIA法CDAB检测为阳性,12例检测结果为可疑。12例可疑标本有10例进行了PCR复测,8例(80.0%)CDAB基因阳性。两法联合检测共计30例为CDAB阳性,阳性率为12.4%。抗生素相关腹泻组CDAB阳性率(24.0%)显著高于非抗生素相关腹泻组(6.9%)(χ2=14.21,P<0.01)。CDAB阳性组的年龄(68.2±23.6)岁高于CDAB阴性组(58.7±23.9)岁(P<0.05)。结论 ELFIA法检测CDAB,有商品试剂盒,方法简便可靠。可疑阳性标本用PCR法检测tcdA/tcdB基因,可进一步提高阳性率。艰难梭菌毒素在抗生素相关腹泻患者检出率较高,与临床表现具有较好的相关性。

间接酶联免疫吸附技术检测活的非可培养状态的大肠杆菌O157:H7

大肠杆菌 O157:H7在低温贫营养的条件下可进入活的非可培养状态 (Viable butnonculturable state,VBNC) ,用常规的培养法无法将其检出。作者利用间接酶联免疫吸附技术(Indirect Enzyme- L inked Immunosorbent Assay,EL ISA)检测 VBNC的大肠杆菌 O157:H7,发现此方法可以快速有效地将其检出 ,最小检测浓度为 10 5个 / m L。

酶联免疫斑点试验检测技术(Elispot)在诊断结核性脑膜炎及Ⅲ型肺结核中的应用价值

目的评价酶联免疫斑点技术(Elispot)检测外周血结核杆菌抗原特异性r干扰素(IFN-r)水平在结核脑膜脑炎及Ⅲ型肺结核患者诊断中的应用价值。方法利用Elispot技术分别对383例结核病人(包括73例结核性脑膜炎患者、310例Ⅲ型肺结核患者)、97例健康人外周血结核杆菌抗原特异性r干扰素(IFN-r)水平进行定量检测。结果 Elispot技术在结核病中诊断敏感性为81.46%,特异性为85.57%;结核脑膜脑炎组Elispot阳性率为61.64%;Ⅲ型肺结核患者组Elispot阳性率为86.13%;健康对照组Elispot阳性率为10.31%;各组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 Elispot技术在结核病诊断中具有良好的辅助诊断价值,在Ⅲ型肺结核中的诊断价值优于结核性脑膜脑炎。

酶联免疫电转移印迹技术(EITB)检测抗EB病毒特异性DNA酶抗体

本研究用酶联免疫电转移印迹技术,检测血清中抗 EB 病毒特异性 DNA 酶抗体,试图建立一种可常规应用于临床的检测方法。结果表明:50例鼻咽癌患者血清中,26例在52～59KD 范围内出现由4条阳性显带融合而成的阳性反应区;健康成人和其他头颈部肿瘤患者血清无一例在此区域内出现阳性显带,表明其特异性甚高。

酶联免疫斑点技术和分枝杆菌改良罗氏固体培养法在肺结核辅助诊断中的价值

目的评价酶联免疫斑点技术(ELISPOT)和分枝杆菌改良罗氏固体培养法在肺结核辅助诊断中的应用价值。方法收集临床疑似肺结核的214例患者的血液和痰液,用ELISPOT技术(T-SPOT.TB试剂)分析血液标本中结核分枝杆菌特异性致敏T细胞的γ-干扰素释放情况;用酸性改良罗氏培养基进行痰液的分枝杆菌分离培养;用PNB固体培养法进行菌种初步鉴定,确定为结核复合群。比较两种方法在肺结核辅助诊断中的符合率和诊断效能。结果两种方法的阳性检出率差异无统计学意义(χ2=1.58,P=0.21),两法符合率为85.5%(183/214)。以临床确诊肺结核为金标准,固体培养法的敏感性为98.2%,特异性为100%,阳性预测值为100%,阴性预测值为98.1%,约登指数为0.98;T-SPOT.TB法敏感性为89.2%,特异性为83.5%,阳性预测值为85.3%,阴性预测值为87.8%,约登指数为0.73。结论 ELISPOT检测(T-SPOT.TB)对肺结核的诊断效能较好,检测周期较分枝杆菌固体培养方法短,在肺结核感染快速诊断和早期筛查中具有广泛应用前景。

酶联免疫斑点(ELISPOT)技术的应用(讲座)

此文重点介绍近年来建立起来的另一酶免疫分析技术——酶联免疫斑点 (ELISPOT)技术的基本原理及操作步骤 。

酶联免疫斑点技术在肿瘤研究中的应用

酶联免疫斑点技术(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)广泛应用在肿瘤疫苗开发、疗效评价和肿瘤病因研究方面,本文就ELISPOT技术的历史、原理、一般步骤、在肿瘤研究中的应用及优缺点做一综述。

酶联免疫吸附技术在安全检测中的应用

酶联免疫吸附技术(Enzyme LinkedImmunosorbent Assay,ELISA)简称酶标法,是由瑞典和荷兰的生物科学家提出并建立的,它是利用抗原-抗体的免疫学反应和酶的高效催化底物反应特点的检测技术,测定灵敏度可高达纳克(10-9g),甚至皮克(10-12g)水平.经过30多年的探索和完善,已成为一种普遍应用的分析方法.

不同抗原酶联免疫斑点检测技术对结核性胸膜炎辅助诊断价值的比较

目的探讨结核分枝杆菌不同抗原的酶联免疫斑点检测技术(ELISPOT)对结核性胸膜炎的辅助诊断价值。方法分离55例结核性胸膜炎患者和43例恶性胸腔积液患者的胸腔积液单个核细胞(PEMCs),经早期分泌抗原靶6kD(ESAT-6)、培养滤液蛋白10kD(CFP-10)、ESAT-6/CFP-10融合蛋白(E/C)、Rv3873和Rv3879c5个蛋白抗原共同孵育,进行ELISPOT试验,检测经抗原刺激后分泌干扰素-γ(IFN-γ)的效应T淋巴细胞(即斑点形成细胞,SFC)的数量,以中位数(四分位间距)表示。结果结核性胸膜炎组ESAT-6-ELISPOT、E/C-ELISPOT、CFP-10-ELISPOT、Rv3873-ELISPOT和Rv3879c-ELISPOT每孔的SFC数量分别为27(13～65)/5×104,26(12～52)/5×104,34(18～79)/5×104,26(8～50)/5×104和11(1～24)/5×104,均显著高于恶性胸膜积液组[1(0～2)/5×104,2(0～4)/5×104,2(1～4)/5×104,3(1～6)/5×104和1(0～3)/5×104,P均<0.01]。5个抗原中E/C的敏感性最高(92.7%),ESAT-6和Rv3879c的特异性最高(均为93.0%),ESAT-6的诊断准确性最高(91.8%)。结论 ESAT-6联合新抗原Rv3879c的ELISPOT能够辅助诊断结核性胸膜炎,但其特异性易受结核分枝杆菌潜伏感染的影响。

酶联免疫吸附技术测定鸡蛋黄中抗幽门螺杆菌IgY活性

目的:探索测定抗Hpylori-IgY的方法. 方法:用间接ELISA法测定幽门螺旋杆菌(Hpylori)超声破碎物免疫鸡所产鸡蛋中抗H pylori-IgY的效价.用间接ELISA法检测抗Hpylori-IgY的酸碱及酶稳定性. 结果:用幽门螺旋杆菌的超声破碎物免疫产蛋母鸡,可得到高效价的抗幽门螺旋杆菌IgY.IgY的酸稳定性好,耐胃蛋白酶. 结论:间接ELISA法简单、准确,可作为测定IgY的标准方法.

一种细胞免疫学新技术——酶联免疫斑点技术

酶联免疫斑点技术(ELISPOT)是利用ELISA技术的基本原理从单细胞水平检测分泌抗体的细胞或分泌细胞因子的细胞的一种细胞免疫学检测技术,可从单细胞水平评价机体的细胞免疫或体液免疫功能。近年来ELISPOT技术以其简便、特异、敏感的优点,被广泛用于肿瘤疫苗评价试验、免疫监测和结核杆菌感染的诊断等方面。现综述ELISPOT技术的原理、基本操作步骤、优缺点和应用等。

酶联免疫斑点技术对儿童结核病诊断的应用价值

目的研究ELISPOT试验在儿童结核病临床诊断中的应用价值。方法对2011年11月～2012年11月入住笔者医院的32例儿童结核病患儿及38例非结核患儿进行痰涂片分析、结核抗体检测、PPD试验及ELISPOT试验检测，比较分析不同方法的检测结果并进行统计学分析。结果ELISPOT诊断儿童结核病的敏感度为87．5％，特异性为94．7％，与PPD试验相比，敏感度和特异性均高于PPD试验，但敏感度差异无统计学意义（P=0．323），特异性差异有统计学意义（P：0．003）。而与PPD强阳性诊断结核病的敏感度和特异性比较，特异性相仿（P=0．485），敏感度显著高于PPD试验（P〈0．001）。ELISPOT试验阳性率为87．5％，显著高于痰培养及结核抗体检测阳性率，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论ELISPOT试验具有相对较高的敏感度和特异性，是诊断儿童结核的快速敏感方法，在儿童结核感染早期临床诊断中有重要的应用价值。