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题名Cε3-Cε4蛋白核酸适配子筛选与鉴定
被引量:5
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作者
刘中成
赵丽君
张艳芬
时海浪
解瑶
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机构
河北大学药学院
河北大学实验室管理办公室
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出处
《药学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第12期1605-1611,共7页
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基金
国家自然科学基金资助项目(81202338)
河北省自然科学基金资助项目(C2010000248)
河北大学博士后经费资助(114184)
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文摘
设计并合成随机ssDNA文库,以硝酸纤维素膜为筛选介质,利用SELEX技术筛选人Cε3-Cε4蛋白特异性高亲和力核酸适配子,通过对退火温度、循环次数及靶蛋白与ssDNA摩尔比等关键参数进行优化,建立了适合的筛选体系。ELISA测定各适配子亲和力,获得了人Cε3-Cε4蛋白高亲和力、高特异性适配子,并分析了其一级结构和二级结构。以所获高亲和力适配子分别作为捕获适配子和检测适配子,建立了酶联适配子吸附试验(enzyme-linked aptamers sorption assay,ELASA)方法,灵敏度达到120 ng.mL-1,可用于人IgE的定量检测。
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关键词
配体指数级富集系统进化
免疫球蛋白E
适配子
酶联适配子吸附试验
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Keywords
SELEX
IgE
aptamer
ELASA
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分类号
R963
[医药卫生—微生物与生化药学]
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