利用半干技术进行水平板不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的同工酶分析

采用滤纸条半干技术进行水平板不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的同工酶分析,提高了电泳的分辨率,缩短了电泳时间(从10-12h缩短到4-5h),简化了操作,节省了试验药品费用.

LDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析植物过氧化物酶同工酶

以高粱和甘蓝型油菜叶片为材料,用十二烷基磺酸锂不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳(LDS-PAGE)检测过氧化物酶同工酶的结果表明,LDS-PAGE的酶带条数比非变性不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳(nativePAGE)明显增加,分辨率大大提高,上样量少,胶片易保存;比复性电泳(G-PAGE)的步骤简单,电泳后无需除去LDS即可直接按常规活性染色方法染色。

运用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析方法对中国卤虫(Artemia)同工酶变异的研究

本文提出运用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,对我国山东半岛几个盐场中的卤虫的十一种同工酶变异进行分析。其中三种同工酶,乳酸脱氢酶(LDH),苹果酸脱氢酶(MDH),以及四唑氧化酶(TO),表现为多态酶,并且存在盐场内和盐场间的相对变异。该项技术将有助于基础科学的研究以及在水产养殖中用来筛选和辨别卤虫的不同品系。

新聚丙烯酰胺凝胶电泳快速检测大豆脂氧酶缺失方法

通过对传统SDS-PAGE电泳技术中样品前处理及制胶技术的改进,开发出了一种能够清晰鉴别Lox-1与Lox-2同工酶的SDS-PAGE电泳快速检测新技术。利用新改进的方法,在289个CS8000(♀)×FJ307(♂)F2杂交后代中,选拔出Lox-1,-2,-3同工酶完全缺失的个体27株,以及Lox-1,-3和Lox-2,-3缺失中间材料若干株。证明新改进方法可以缩短杂交后代脂氧酶缺失个体筛选进程,提高筛选精度,降低筛选成本。

PCR产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

ＰＣＲ产物检测方法的灵敏度对临床诊断结果有较大的影响。我们对端粒酶催化亚基蛋白质（ｈＴＲＴ）ｍＲＮＡ［１］的ＲＴ－ＰＣＲ扩增产物琼脂糖凝胶电泳ＥＢ染色法和聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法进行比较，以期在ＰＣＲ检测方面引起重视。１材料和方法１．１材料ＨＬ－６０...

细菌酯酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳技术研究

本文应用纸片法筛选出5种动物病原菌的醋酶同工酶阳性株，并对3种强阳性株应用PAGE进行酶谱测定。同时对这些细菌酯酶同工酶样品的提取及测定条件进行了摸索。结果表明：不同细菌酯酶同工酶酶谱存在着显著差异。这为某些细菌种鉴定提供一种方法。

运用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳和图像软件分析TPA处理NIH3T3细胞前后的蛋白质表达谱差异

目的建立及优化聚丙烯酰胺双向凝胶电泳技术,并应用图像软件分析伏波醇酯(TPA)刺激前后小鼠成纤维细胞NIH3T3系的蛋白质差异表达,为进一步鉴定与TPA生物学作用有关的蛋白质奠定基础。方法分别提取TPA处理前后的NIH3T3细胞总蛋白质,经双向电泳,硝酸银染色后用软件分析显示两者蛋白质的差异表达。结果软件分析显示TPA刺激前后的细胞蛋白质有明显的差异表达。结论高质量的双向电泳设备、熟练的电泳操作和图像处理技能是寻找稳定可信的功能蛋白质的必要条件。

超薄平板微型聚丙烯酰胺凝胶的等电聚焦电泳方法——介绍一种高效、快速的生物同工酶分析方法

介绍了一种简易、高效、快速的生物同工酶分析方法——超薄平板微型聚丙烯酰胺凝胶的等电聚焦电泳方法。该方法与目前国内外市场销售的同种用途等电聚焦的产品 (如BIO- RAD公司的 model1 1 1 Mini IEF Cell)相比 ,具有以下优点 :实验操作灵活 ,用途更广 ;谱带清晰 ;每次可实验的样本量大 ;电泳所需时间短 ;实验费用低 ;适用于多种酶系统的同工酶和等位酶分析 ;凝胶干燥不需任何设备且能长期保存 ;样本用量少。

SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分析壳寡糖

目的研究一种快速准确的分析壳寡糖组成的定性测定方法。方法通过连续电泳和不连续电泳对比实验确定壳寡糖的最佳分析条件。结果浓缩胶浓度为3%,分离胶浓度为17.5%,上样量为10μl,恒定电流为40mA,电泳时间50min条件下,获得最佳壳寡糖分析图谱。结论SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析壳寡糖组成的方法的确是一种简单快速有效地定性检测方法。

基于非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的菜心SCoT分析

以菜心(Brassica rapa var.parachinensis)抗小菜蛾品种Caixin65和感小菜蛾品种Caixin69及6份F2株系为材料,利用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测菜心抗虫株系的SCoT多态性,同时进行SCoT多态性的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测效率、遗传多样性分析和差异条带克隆分析。结果表明,非变性聚丙烯酰胺凝胶能检测出亲本与子代间的SCoT多态性和遗传多样性变化,条带数量较多且清晰,提高了SCoT标记检测效率。选取亲本的10条非变性聚丙烯酰胺凝胶差异片段克隆测序,获得感虫序列4条、抗虫序列6条,GENSCAN预测其中8条具有启动子、终止子、阅读框等基因结构序列。同源性检索分析表明,感虫序列分别与泛素羧基末端水解酶mRNA序列、大白菜克隆序列、白菜线粒体丙酮酸载体蛋白序列、甘蓝基因组编码未知蛋白的HDEM序列同源,抗虫序列分别与白菜RNA假尿苷合酶4线粒体mRNA序列、京水菜线粒体DNA序列、白菜未知蛋白mRNA序列、白菜4-香豆酸:辅酶A连接酶mRNA序列、大白菜克隆序列、哈茨木霉mRNA序列同源。本研究提高了SCoT标记清晰度、遗传多样性检测水平和差异片段克隆的精准性,使得SCoT成为批量克隆差异片段的高效工具,有助于挖掘SCoT功能性标记信息,开展初步的功能基因组学研究,提高优异株系筛选鉴定效率,加快育种进程,为菜心抗虫性机制的进一步研究提供理论基础。

马铃薯过氧化物同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳技术研究

为了完善同工酶标记鉴定马铃薯品种技术,对聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离马铃薯过氧化物酶(POD)同工酶的技术进行了研究。结果表明:马铃薯植株不同部位材料的聚丙烯酰胺凝胶电泳同工酶胶片经染色后,芽和茎的同工酶酶谱清晰、分辨力高,并且不同品种马铃薯酶谱差异明显。总之,马铃薯过氧化物同工酶电泳技术可用于马铃薯品种真实性鉴定和纯度检验。

二氟沙星光敏损伤溶菌酶的十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳研究

本文采用稳态光照的方法研究了二氟沙星药物对溶菌酶生物大分子的光敏损伤。研究发现,在315~375 nm波长的光照射下,二氟沙星药物能够光敏损伤溶菌酶类大分子物质。通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析光照产物发现,生物大分子的光敏损伤途径和损伤产物与二氟沙星药物的浓度、光照时间、光照气氛等条件密切相关。其他条件相同时,二氟沙星浓度越高,光照时间越长,光照对溶菌酶的损伤越严重;三种不同气氛(氮气、空气、氧气)条件下,氧气气氛对溶菌酶的损伤最严重。通过对不同气氛条件下损伤机理的研究发现,在氮气气氛条件下为Ⅰ型光敏损伤机制,在有氧气氛条件下是I型和Ⅱ型反应协同作用的结果,并以Ⅱ型反应为主。

复方参果液对大鼠半乳糖性白内障晶状体生化的影响(Ⅱ)——尿素溶性蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

目的 :探讨复方参果液防治白内障的作用机理。方法 :大鼠用半乳糖诱发白内障 ,同时灌胃给药。剖取晶状体 ,制备尿素溶性蛋白溶液 ,进行SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,用薄层扫描仪进行电泳图谱分析 ,蛋白质分子量用相对迁移率 (Rf)表示。结果 :与正常组比较造型组尿素溶性蛋白相对应的Rf含量 ( % )均有不同程度改变。复方参果液大、小剂量组各Rf含量 ( % )较造型对照组有不同程度的改变 ,Rf 1.0、Rf 0 .93、Rf 0 .88和Rf 0 .75蛋白含量 ( % )接近正常对照组。结论 :复方参果液对半乳糖性白内障晶状体尿素溶性蛋白组分改变有一定的纠正作用。

豇豆品种同工酶聚丙烯胺凝胶电泳凝胶浓度的筛选

用凝胶浓度分别是７．５％和６．０％的聚丙烯酰胺凝胶系统对１２个豇豆品种的酯酶（ＥＳＴ）、淀粉酶（ａ—ＡＭＹ）和过氧化氢酶（ＣＡＴ）同工酶作电泳分忻．将两种不同浓度凝胶系统的电泳图谱作对比，得出豇豆品种的淀粉酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳应选择低浓度凝胶系统（６．０％），酯酶同工酶、过氧化二酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳应选择高浓度凝胶系统（７．５％），才能得到较高质量的凝胶电泳图谱的结论．

利用聚丙烯酰胺凝胶平板电泳对杂交细胞酯酶同功酶的分析研究

酯酶同功酶可作为遗传及表达活性的生化指标。本文利用柴胡和石防风两种药用植物 ,经过原生质体融合及组织培养后取其再生融合细胞的愈伤组织 ,采用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳方法 ,进行酯酶同工酶电泳图谱分析 ,可以测得杂交细胞基因重组后是否有新的酯酶 (蛋白质 )表达与出现 。

聚丙烯酰胺凝胶电泳配合荧光增白剂显色检测木霉几丁质酶同工酶谱

为提高木霉几丁质酶检测方法的准确性和灵敏度,建立一种快速检测几丁质酶同工酶的方法。采用活性凝胶电泳、变性凝胶电泳、原位显色凝胶电泳结合荧光增白剂(Calcofluor white M2R)显色从绿色木霉LTR-2发酵产物中检测几丁质酶同工酶。活性凝胶电泳在粗酶液浓缩5倍时显示两条活性谱带,变性凝胶电泳在浓缩10倍时显示一条活性谱带,原位显色凝胶电泳在浓缩20倍时显示两条不清晰的活性谱带,SDS-PAGE显示这两条活性谱带的分子量分别为65kDa和42kDa。结果表明活性聚丙烯酰胺凝胶电泳和Calcofluor white M2R显色相结合的方法在几丁质酶上样量为0.47U时具有较好的分辨能力,是检测木霉几丁质酶同工酶的有效的方法。

酸枣仁中蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

目的:比较不同产地及生炒酸枣仁的蛋白质电泳结果,分析它们之间的共性和差异。方法:本实验采用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的技术对40个不同酸枣仁样品进行分析评价。结果:根据电泳指纹图谱整理分析的数据得到对酸枣仁的初步聚类分析结果。结论:聚丙烯酰胺凝胶电泳可以大致定性区别不同产地的酸枣仁样品。

浙江五种白蚁的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

白蚁分类,一般以兵蚁和有翅繁殖蚁的形态为依据,而工蚁形态分类较少。应用酯酶同工酶酯谱来研究白蚁种间,同种的各品级之间关系,有一定理论和实际意义。