响应面法优化酶解辅助-超声提取菥蓂中的黑芥子苷

为从菥蓂种子中高效提取高得率的目的活性成分黑芥子苷,采用酶解辅助-超声提取法,并利用高效液相色谱测定其含量。在单因素试验的基础上,以酶添加量、酶解温度和酶解时间为关键因素,以黑芥子苷得率为响应值,应用Design-Expert V11软件,Box-Behnken Design响应面法优化菥蓂种子中黑芥子苷酶解辅助-超声提取工艺;并与单独超声、索氏提取2种提取法的黑芥子苷得率进行比较。结果表明,采用Agilent HCC18柱(25 mm×4.6 mm×5μm),流动相A和B分别为甲醇和0.5%磷酸水溶液,检测波长215 nm,柱温25℃,流速1 mL·min^(-1),进样量10μL,在等度洗脱10 min下,获得的分离效果和峰型较好。以筛选出的碱性蛋白酶为酶制剂,最佳提取工艺条件为:酶解温度49℃,酶用量2.90%,酶解时间18 min;在此条件下,菥蓂种子中黑芥子苷得率为2.679 mg·g^(-1),经方差分析与理论值(2.687 mg·g^(-1))差异不显著,但显著高于单独超声提取(2.036mg·g^(-1))和索氏提取(1.702 mg·g^(-1))(P<0.05)。优化得到的菥蓂中黑芥子苷酶解辅助-超声提取工艺,方法简单、节能、环保、高效,目的活性成分得率高,可应用于菥蓂中黑芥子苷的生产实践,为菥蓂的深度开发奠定了理论基础。

龙脑樟去油枝叶中总多酚的酶解-超声辅助提取及抗氧化活性

为探讨龙脑樟去油枝叶中总多酚的酶解-超声辅助提取工艺,在单因素实验的基础上,通过Box-Behnken设计-响应面法研究纤维素酶用量(X_1)、乙醇浓度(X_2)、液料比(X_3)对龙脑樟去油枝叶中总多酚提取率的影响;同时,以清除DPPH自由基和羟基自由基的能力为评价指标,对总多酚提取物的抗氧化活性进行测定。结果表明,各因素对总多酚提取率的影响顺序为液料比(X_3)>乙醇浓度(X_2)>酶用量(X_1);酶解-超声辅助提取龙脑樟去油枝叶中总多酚的最优工艺条件为:酶用量1.9%,乙醇浓度54%,液料比34 m L/g,酶解温度50℃,酶解时间1.5 h,超声时间30 min,超声频率45 k Hz,超声功率360 W,超声温度70℃;在此条件下,总多酚提取率的平均值为22.08 mg/g,与预测值相近,二次回归模型预测性良好。总多酚提取物对DPPH自由基和羟基自由基的清除作用均呈现量效关系,半数抑制浓度(IC_(50))值分别为0.36和0.15 mg/m L,表明总多酚提取物具有较强的抗氧化能力。

超声辅助酶解-索氏提取联用法提取马齿苋籽油及其脂肪酸组成分析

为提高马齿苋籽油的提取率和油品品质,以马齿苋籽油提取率及理化性质为指标,利用超声辅助酶解法预处理马齿苋籽,采用索氏提取法提取马齿苋籽油,并在单因素试验基础上采用正交试验确定酶解法预处理的最优条件。利用气相色谱/质谱联用仪(GC-MS)对超声辅助酶解-索氏提取联用法和传统索氏提取法制备的马齿苋籽油脂肪酸成分进行分析并比较。结果表明:酶解法预处理的最优工艺条件是加酶量2.0%,酶解温度50℃,酶解pH 6.0,液固比(mL∶g)6∶1,此条件下马齿苋籽油提取率可达86.8%,与传统索氏提取法相比提高了15.43%。两种方法所得的马齿苋籽油中均含有多种不饱和脂肪酸,且不饱和脂肪酸含量均大于85%,其中亚麻酸含量大于39%。