基质金属蛋白酶酶谱分析法

基质金属蛋白酶酶谱分析法刘煜张嘉宁朱正美基质金属蛋白酶（ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ，ＭＭＰｓ）是一组重要的蛋白水解酶，可以水解细胞外基质中胶原、纤维连接蛋白等多种成分［１］，参与了人体内许多生理和病理过程，如骨的重建［２］、肿瘤转...

女性下生殖道感染病原菌检测方法的结果分析

目的探讨白带常规镜检法、细菌预成酶谱分析法及联合法3种方法在鉴别诊断女性常见下生殖道感染疾病中的作用。方法分别采用白带常规镜检法和细菌预成酶谱分析法对来我院就诊的4130例就诊者的阴道分泌物进行检测,检测结果结合临床表现和治疗效果进行汇总分析比较。结果采用白带常规镜检法检出阳性者1976例(检出率47.8%、准确率71.6%);采用细菌预成酶谱分析法检出阳性者1302例(检出率为31.5%、准确率58.1%);采用联合法检出阳性者2622例(检出率63.5%、准确率91.1%)。结论联合法集取白带常规镜检法和细菌预成酶谱分析法的优点,能一次采样即可准确鉴别5种女性常见下生殖道感染疾病。

加味木防己汤对类风湿关节炎大鼠滑膜的基质金属蛋白酶生成的影响

目的:探讨加味木防己汤对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜细胞基质金属蛋白酶(MMP)生成的影响及其可能的分子机制。方法:将Wistar大鼠随机分4组,每组10只,并应用弗氏完全佐剂诱发大鼠AA实验性模型,造模18d开始给药,第40天处死大鼠取膝关节滑膜组织体外进行原代细胞培养,通过明胶酶谱分析法检测加味木防己汤对AA大鼠滑膜细胞MMP-2和MMP-9生成的影响。结果:①正常组大鼠滑膜细胞仅产生MMP-2;②在TNF-α(10μg/L)存在下,正常组大鼠可表达MMP-9,AA组大鼠滑膜细胞MMP-2和MMP-9生成量增加;③加味木防己汤治疗组大鼠滑膜细胞,在无干预情况下MMP-2和MMP-9的表达量均显著降低,在TNF-α存在时MMP-9的表达量未见明显增加。结论:加味木防己汤不仅能抑制AA大鼠滑膜细胞生成MMP-2和MMP-9,同时也能抵抗TNF-α对AA大鼠滑膜细胞生成MMP-9的刺激作用。提示加味木防己汤可能具有调控类风湿关节炎发病的作用。

同型半胱氨酸对大鼠血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶2表达的影响

目的 观察同型半胱氨酸对大鼠血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶2表达的影响，探讨其致动脉粥样硬化可能的机制。方法 体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞，加入不同浓度的同型半胱氨酸分别作用24、48和72h，采用免疫印迹法和明胶酶谱分析法检测细胞培养基中基质金属蛋白酶2的表达。结果 同型半胱氨酸浓度在0．5～1．0mmol／L时促进血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶2的表达；浓度在5．0mmol／L以上时抑制血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶2的表达。同一浓度同型半胱氨酸作用72h明显强于24h和48h。结论 同型半胱氨酸可影响血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶2的表达，在动脉粥样硬化中可能起着一定的促进作用。

大鼠实验性脑出血后基质金属蛋白酶2和9的表达

目的探讨大鼠脑出血后基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9的表达及其意义。方法采用未抗凝新鲜自体股动脉血注入大鼠尾状核建立脑出血动物模型。用酶谱分析法测定脑出血后6h、12h、24h、3天、6天、10天和15天时基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9的表达。结果基质金属蛋白酶2在脑出血后24h开始表达(P<0.05),第6天时达高峰(P<0.01),到第10天仍维持高水平表达(P<0.05);而基质金属蛋白酶9在脑出血后6h开始表达(P<0.05),24h^3天最明显(P<0.01),此后活性逐渐降低,第10天时的活性仍高于对照组(P>0.05),15天时不再表达。结论脑出血后6h^3天出血灶周围脑组织中基质金属蛋白酶9的活性增高,可能与急性期脑水肿的形成有关,而基质金属蛋白酶2的迟发表达可能参与了脑组织的修复过程。

骨关节炎软骨细胞和滑膜细胞金属蛋白酶活性的影响因素

目的 探讨几种细胞因子、生长因子和药物等刺激物对骨关节炎软骨细胞及滑膜细胞金属蛋白酶活性的影响。方法 骨关节炎患者的单层软骨细胞和滑膜细胞均以白细胞介素 1β、转化生长因子 β1、肿瘤坏死因子 α、双氯芬酸钠、多西环素和地塞米松分别处理 72h。应用酶谱分析细胞培养上清液中酶活性。结果 单层软骨细胞产生金属蛋白酶 9和 2 ,而滑膜细胞仅产生金属蛋白酶 2。白细胞介素 1β、肿瘤坏死因子 α和双氯芬酸钠均能显著增强金属蛋白酶 9活性 ,其中以白细胞介素 1β作用最强 ,与肿瘤坏死因子 α或双氯芬酸钠有协同作用。多西环素、转化生长因子 β1和地塞米松均能抑制金属蛋白酶 9和 2活性 ,并与白细胞介素 1β、肿瘤坏死因子 α和双氯芬酸钠起拮抗作用 ,多西环素为最强的抑制物。结论 白细胞介素 1β和肿瘤坏死因子 α可能为破坏关节软骨的重要细胞因子 ,转化生长因子 β1则为保护因子 ,多西环素则可能成为骨关节炎的有效治疗药物。

八肽胆囊收缩素对大鼠滑膜细胞株RSC-364基质金属蛋白酶-2和-9产生的影响

目的探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导的大鼠滑膜细胞株RSC-364细胞金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9产生的影响及其可能的分子机制。方法通过酶谱分析法检测不同浓度的CCK-8对大鼠滑膜细胞株RSC-364细胞MMP-2和MMP-9产生的影响。结果RSC-364细胞在无干预因素存在的情况下,仅有MMP-2的表达,MMP-9无明显表达;TNF-α(10ng/L)可诱导RSC-364细胞MMP-9的表达,使MMP-2的表达增加;在TNF-α(10ng/L)存在的情况下,10-6、10-7和10-8mol/L浓度的CCK-8对RSC-364细胞MMP-2和MMP-9的表达均有明显的抑制作用,CCK的受体拮抗剂丙谷胺可拮抗此作用。结论CCK-8可抑制TNF-α诱导的大鼠滑膜细胞株RSC-364细胞MMP-2和MMP-9的产生,提示CCK-8可能具有潜在的调控类风湿关节炎发病过程的作用。