T细胞表面分子CD28及其信号通路的研究

用免疫磁性阴极选择法从正常人外周血单个核细胞中择取 T 细胞,经 CD28单克隆抗体和(或)乙酰肉豆蔻佛波酯刺激,Western 印渍免疫沉淀反应,白细胞介素-2和白细胞介素-2受体等检测,结果表明 CD28单抗和乙酰肉豆蔻佛波酯复合刺激具有诱导 c-Rel 核内移位和磷酸化、增强白细胞介素-2受体表达和白细胞介素-2分泌的作用,证明 CD28信号途径有诱导环孢素 A 抵抗-非钙依赖和环孢素A敏感-钙依赖的传导通路,对 T 细胞活化有重要意义。

AG490阻断Stat3信号蛋白活性对巩膜成纤维细胞MMP-2和Integrinβ1表达的影响

目的 研究AG490阻断Stat3信号转导通路激活对豚鼠巩膜成纤维细胞MMP-2和Integrinβ1表达的影响.方法 实验研究.选用传3代处于对数生长期豚鼠巩膜成纤维细胞.实验共分4个组,分别为A组（空白对照组）：不加胰岛素生长因子1（IGF-1）的DMEM培养液、B组（单纯IGF-1组）、C组（IGF-1＋PBS组）、D组（IGF-1＋25 μm0l/L AG490组）.置入37 ℃ CO2细胞培养箱中培养48 h后终止培养.采用RT-PCR和免疫印迹检测4组中Stat3、MMP-2、Integrinβ1mRNA水平和Stat3、p-Stat3（结合位点Tyr-705）、MMP-2、Integrinβ1的蛋白含量变化.用配对t检验和one-wayANOVA方法对测得的数据作处理分析.结果 A、B、C、D组Stat3蛋白表达量分别为0.0637±0.0024、0.6167±0.0276、0.6141±0.0271、0.0674±0.0044,mRNA表达量分别为0.3600±0.0148、0.6315±0.0003、0.6311±0.0001、0.3702±0.0142;p-Stat3蛋白表达量分别为0.0031±0.0000、0.4252±0.0107、0.4274±0.0040、0.0032±0.0000,MMP2蛋白表达量分别为0.0044±0.0002、0.5252±0.0083、0.5251±0.0076、0.0053±0.0003,mRNA表达量分别为0.3067±0.0196、0.5894±0.0122、0.5858±0.0083、0.3107±0.0082.与A、D组比较,B、C组的Stat3、p-Stat3、MMP-2蛋白和基因转录水平明显上调（tpr=-32.324,-26.284,-32.876,-26.345,-68.668,-58.724,-187.481,-58.842,-110.264,-120.256,-121.345,-120.286;tmRNA=-31.554,-31.178,-31.286,-31.198,-12.076,-14.969,-11.896,-14.546;均P＜0.05）,但B、C组间比较差异无统计学意义（tp=-32.720,-32.816,-68.668,-187.481,-110.264,-121.345;tmRNA=-0.692,-0.579;均P＞0.05）;而Integrinβ1在4个组中无明显改变（Fpr=0.214;FmRNA=0.045,均P＞0.05）.结论 AG490阻断Stat3信号通路激活可下调豚鼠巩膜成纤维细胞MMP-2的表达,AG490可以阻断Stat3信号通路激活,是否可作为预防近视的靶点候选药物有待进一步研究.