铝对大鼠黑质酪氨酸羟化酶mRNA表达的影响

为了探讨铝对中枢神经系统多巴胺能神经元的影响，采用地高辛标记酪氨酸羟化酶（TH）反义RNA探针原位杂交组织化学方法，观察了氯化铝对大鼠黑质THmRNA表达的影响。结果发现，大鼠服用氯化铝3个月后，黑质背侧部多巴胺神经元THmRNA杂交信号弱于对照组，表明氯化铝对大鼠黑质THmRNA表达有抑制作用。

高血压病肝阳上亢证酪氨酸羟化酶基因多态性分析

为探讨高血压病肝阳上亢证与酪氨酸羟化酶基因 (TH )多态性的相关性 ,采用西医辨病和中医辨证方法选择研究对象 ,用 Southern Blot分析了肝阳上亢证、肝肾阴虚证和健康人 TH基因多态性 ,并测定了血浆去甲肾上腺素 (NE)和肾上腺素 (E)。结果表明 :高血压病肝阳上亢证患者血浆 NE、E含量明显高于健康人组和肝肾阴虚证组 (P<0 .0 5 ) ,高血压病肝阳上亢证 TH基因有显著扩增 (P<0 .0 5 )。提示高血压病肝阳上亢证的形成可能与

大鼠酪氨酸羟化酶基因在肌母细胞中稳定表达

用电穿孔法将大鼠酪氨酸羟化酶（Ｔｙｒｏｓｉｎｅｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｅ，ＴＨ）基因转染大鼠Ｌ－６ＴＧ成肌细胞株，经ＰＣＲ检测、免疫组织化学和荧光组织化学检测证明，ＴＨ基因能在细胞内稳定整合和表达，并在辅因子存在时将酪氨酸转化为多巴．移植于大鼠纹状体后可成活并表达ＴＨ。

大鼠中脑切片的酪氨酸羟化酶和谷氨酸双重免疫荧光染色

在大鼠中脑组织切片上进行酪氨酸羟化酶和谷氨酸双重免疫荧光染色。用改良的脑灌注法以降低双重免疫荧光染色时谷氨酸的背景噪音 ,获得了满意的结果。在大鼠中脑腹侧 ,91 %± 4%的多巴胺神经元呈谷氨酸染色阳性 ,从细胞组织学上证明了中脑腹侧多数多巴胺神经元存在多巴胺与谷氨酸递质共存现象。

氯丙嗪对佛波二丁酯致活酪氨酸羟化酶的抑制作用

在前文研究的基础上,本文证明,氯丙嗪使大鼠SCG中DOPA生成量减少约50％,使PDBu引起的DOPA生成量同样减少约60%。实验中,排除了氯丙嗪通过N或M胆碱能神经受体,或影响DOPA脱羧酶活性而减少DOPA生成的可能性。结论:氯丙嗪抑制蛋白激酶C,阻碍后者对酪氨酸羟化酶的磷酸化作用,从而降低SCG中的DOPA生成量。

人胎蓝斑酪氨酸羟化酶样免疫反应神经元的发育

用免疫组织化学ＡＢＣ法较系统地观察了人胎蓝斑酪氨酸羟化酶（ＴＨ）样免疫反应神经元的分布及形态变化。结果：①蓝斑ＴＨ样免疫反应神经元在胚胎第４个月时已出现在蓝斑的腹侧部。②ＴＨ样免疫反应神经元的数量随胎龄增长逐渐增多，以胎龄第５个月增加显著。ＴＨ样神经元的密度，胚胎早期升高，晚期呈下降趋势。③蓝斑ＴＨ样神经元主要分布在蓝斑的背侧部，少量散在于腹侧部。④蓝斑ＴＨ样神经元开始出现时呈圆形或卵圆形，５～６个月呈锥形和梭形，７～８个月则以梭形、多角形为主。胞体逐渐增大，核浆之比由大变小。胞突由少变多，从宽短粗糙变为细长平滑。结果提示：人胎蓝斑移植以４月份胎龄作供体较适宜。

多巴胺自身受体通过抑制依赖cAMP的磷酸化调控TH活性

应用ＨＰＬＣ－ＥＣＤ法测定大鼠纹状体突触体ＴＨ的活性，研究ＤＡ自身受体介导的ＤＡ生物合成负反馈调控的机理。研究发现，ＡＣ激活剂ＦＳＫ和ＰＫＡ激活剂ｄｂｃＡＭＰ均以浓度依赖的方式激活突触体ＴＨ的活性，增加ｌ－ｄｐｏａ的生成。ＤＡ自身受体激动剂ＬＹ１７１５５５能抑制ＦＳＫ对ＴＨ的激活效应，但不影响ｄｂｃＡＭＰ对ＴＨ的激活。实验结果表明，ＤＡ自身受体介导的负反馈调控的机理是通过抑制依赖ｃＡＭＰ的ＰＫＡ对ＴＨ的磷酸化激活，其作用环节在于抑制ＡＣ，而不是对ＰＫＡ的直接抑制。

认知辅佐药沙普蝶呤盐酸盐(Sapropterin Dihydrochloride)

6R-L-赤-四氢生物蝶呤(6R-BH4)是酪氨酸羟化酶(酪氨酸3-氨基氧合酶)的天然辅因子,又是儿茶酚胺类(如多巴胺、去甲肾上腺素和肾上腺素)的限速酶。而且,6R-BH4既是色氨酸羟化酶(色氨酸5-单氧合酶)的辅因子,又是5-羟色胺(5-HT)生物合成的限速酶。鉴于脑内6R-BH4浓度比酪氨酸羟化酶和色氨酸羟化酶的K_m值(米氏常数)低,故认为6R-BH4的组织水平在调节上述酶类的活性起重要作用。

帕金森病裸DNA法基因治疗的实验研究

采用体内裸ＤＮＡ基因治疗帕金森病（ＰＤ）取得显著疗效，将酪氨酸羟比酶（ＴＨ）基冈表达质粒与Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ形成的复合物立体定位注射于ＰＤ模型鼠纹状体．显著改善了ＰＤ鼠的不对付旋转行为．

MPTP对小鼠不同脑区神经递质代谢酶基因表达的影响

1-甲基 -4 -苯基 -1,2 ,3 ,6-四氢吡啶 (MPTP)能够诱发黑质纹状体系统多巴胺能神经元损伤并产生与帕金森病类似的症状。本实验通过 MPTP注射诱导 C5 7BL小鼠神经元损伤 ,利用逆转录 PCR方法检测酪氨酸羟化酶 (TH)、单胺氧化酶 B(MAO-B)以及胆碱乙酰基转移酶 (Ch AT)三种神经递质代谢相关基因的表达变化。结果发现 ,在小鼠黑质与纹状体中 ,MPTP导致 TH基因表达显著降低 ,而 MAO-B与 Ch AT基因的表达变化在黑质与纹状体则有所不同 ,在黑质 MPTP导致 MAO-B与 Ch AT基因表达的上升 ,在纹状体则略有下降。