箬竹叶酸性多糖对糖尿病视网膜病变小鼠的影响及机制研究

为探讨箬竹叶酸性多糖对糖尿病视网膜病变小鼠的影响及机制,通过链脲佐菌和高糖高脂饮食建立小鼠糖尿病模型,用不同剂量箬竹叶酸性多糖(500、300、100 mg/kg)对其进行连续4周的干预治疗。通过检测小鼠空腹血糖、HbA1c和AGEs含量以研究其降血糖能力,进行视网膜电图和光学相干断层成像对视网膜生理指标检测,并测定视网膜组织的抗氧化能力和炎症相关指标含量,测定其抗氧化相关基因和细胞凋亡相关基因表达量。结果表明箬竹叶酸性多糖可以降低小鼠空腹血糖、HbA1c和AGEs含量,具有一定的降血糖能力。在抗氧化上,箬竹叶酸性多糖可以通过增加SOD、CAT和GSH-Px酶活性提高T-AOC活性以降低MDA含量。在炎症上,箬竹叶酸性多糖可以抑制炎症因子IL-1β、TNF-α和IL-6的释放,还可降低VEGF含量以免视网膜组织血管增生。箬竹叶酸性多糖通过Nrf2-ARE通路上调抗氧化酶类表达量,以减轻氧化应激反应,下调NF-κB途径涉及的炎症反应、细胞凋亡和血管增生,进而缓解高血糖视网膜病变。箬竹叶酸性多糖是一种利于高血糖患者的潜在功能性食品添加剂。

芜菁酸性多糖结构及对脂多糖诱导肺损伤小鼠的保护作用

目的:研究芜菁酸性多糖(Brassica rapa L.acidic polysachharide-1,BRAP-1)的结构及其对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠肺损伤的影响及其机制。方法:采用苯酚硫酸法、间羟基联苯法、考马斯亮蓝法、高效凝胶渗透色谱、傅里叶变换红外光谱、气相色谱-质谱法对BRAP-1化学组成、分子质量、结构及单糖组成进行分析。动物实验正常组、模型组小鼠灌胃0.5 mL/d生理盐水,BRAP-1低、中、高剂量组分别灌胃50、100、200 mg/(kg mb·d),持续10 d,采用LPS气管滴注法建立肺损伤模型,检测相关指标,包括肺湿质量/干质量比值、肺泡灌洗液蛋白质量浓度、总细胞数,并进行苏木精-伊红染色;采用酶联免疫吸附测试法测定各组小鼠血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-10、干扰素γ水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测肺组织中肿瘤坏死因子受体、Toll样受体4、核转录因子-κB p65(nuclear factor kappa B p65,NF-κB p65)、IL-1β、NOD样受体3(NOD-like receptor 3,NLRP3)基因m RNA表达水平。结果:与模型组相比,BRAP-1对肺损伤小鼠肺组织水肿、肺泡浸润、蛋白渗出、细胞因子过度释放等病理学改变有缓解作用;并显著降低NF-κB/NLRP3通路关键基因mRNA表达水平。结论:BRAP-1对LPS诱导的小鼠肺损伤具有显著保护作用,其机制可能是调节NF-κB/NLRP3信号通路。

铜绿微囊藻(Microcystic aeruginosa)胞内酸性多糖和胞外酸性多糖理化性质的比较研究

目的:研究比较铜绿微囊藻(Microcystic aeruginosa)胞内酸性多糖(IAPS)和胞外酸性多糖(EAPS)的理化性质、组分和结构,旨在将蓝藻水华作为一种天然植物资源进行综合开发利用。方法:采取不同的方法提取、分离、纯化得到IAPS和EAPS,并分别通过多种化学手段和HPLC、UV、IR、13CNMR等方法对IAPS和EAPS的分子量、单糖组成、糖醛酸、硫酸根等酸性基团和波谱学特征等进行了测定分析。结果硫酸咔唑法测定表明:IAPS糖醛酸含量为12.75%,而EAPS糖醛酸含量为10.74%;HPLC测定显示IAPS分子量(2.0025×105D)明显高于EAPS(7.0012×104D);IAPS主要由31.8341%D(+)木糖、33.0053%D-鼠李糖、4.1284%D-半乳糖、21.8689%L-阿拉伯糖,EAPS则由9.6549%D(+)木糖、19.2522%D-果糖、71.0930%葡萄糖;红外光谱和核磁共振图谱表明两者在结构上存在着显著的差异,这为研究两者的生理活性提供了物质基础。

铜绿微囊藻(Microcystic aeruginosa)胞外和胞内酸性多糖分离、纯化方法的比较及产物的鉴定

铜绿微囊藻(Microcystic aeruginosa)属于蓝藻,是水华爆发的主体藻类。本实验在不同pH值和温度条件下分别提取其胞内和胞外多糖的粗制品,采用DEAE-纤维素离子交换柱层析,分离出其中含有醛酸基团的酸性组分,再用具分子筛效应的SephadexG-150和G-100进一步纯化出具HPLC单一对称峰的两个胞外酸性多糖组分和一个胞内酸性多糖组分。分别测定和分析三种酸性多糖的分子量、糖醛酸及单糖的组成。

杜仲叶酸性多糖提取分离及含量测定

研究杜仲叶酸性多糖的提取分离工艺及其含量测定的简便方法。结果表明,以提取过药用有效成分后的杜仲叶为原料提取酸性多糖的较佳工艺条件是1.0%的碱水在100℃下提取2次,每次2h;提取液经大孔吸附树脂处理,多次醇沉等步骤分离的酸性多糖含量可达到41.46%。采用DNS法测定杜仲叶酸性多糖含量时水解时间控制在15～20min,显色反应为10min,检测波长为492nm;在试验条件下,葡萄糖浓度在0.20～0.60mg.mL-1范围内显色灵敏、稳定,线性关系良好;用该法测定杜仲叶渣酸性多糖含量时加样回收率为98.30%,RSD为1.76%;显色溶液在2h内吸光度值比较稳定,能够完全满足测定工作要求,可以作为实验室测定多糖含量的简便、快捷、有效的方法。

铜绿微囊藻(Microcystic aeruginosa var.major)胞外酸性多糖的分离、纯化及其理化特性

本实验的目的是提取和纯化铜绿微囊藻(Microcystic aeruginosa var．major)胞外带酸性基团的多糖，为综合利用爆 发的水华提供一定的理论依据．采用 pH 8．0、80℃的热水抽提铜绿微囊藻的胞外多糖．经充分脱蛋白、脱色后用 DEAE- 纤维素(DE-52)作离子交换柱层析，分离出其中不被 DE-52吸附和被吸附的两种组分．取后者上 sephadexG-150柱进 一步分离得到两种分子量不同的酸性多糖(EAPS Ⅰ和 EAPSⅡ)，质量比为1．92∶1，经 HPLC 测定 EAPS Ⅰ均分子量为7．01 ×10~4D，EAPSⅡ均分子量为4．21×10~4D．经测定，它们各带有不同含量的酸性基团：EAPS Ⅰ糖醛酸含量为10．74%， SO_4^(2-)含量为44．44μg/mg，EAPSⅡ糖醛酸含量为7．08%，SO_4^(2-)含量为9．08μg/mg．EAPSⅠ单糖组成为：9．6549%D(+) 木糖，19．2522% D-果糖，71．0930%葡萄糖；EAPSⅡ单糖组成为：6．4065%D(+)木糖，18．0016%D-果糖，75．5919%葡萄糖．

夏枯草水溶性酸性多糖的分离及活性分析

采用水提醇沉法提取夏枯草多糖,然后经非极性吸附树脂HZ-820脱色和脱蛋白后,再用DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析进行分离得到酸性多糖。化学法和红外光谱证明该酸性多糖中半乳糖醛酸和硫酸根含量较高,间羟基联苯-硫酸和氯化钡-明胶比浊法测定其半乳糖醛酸和硫酸根含量分别为(58.85±0.46)%和(7±0.52)%。紫外、红外光谱分析结果发现,该酸性杂多糖为非糖蛋白,可能含半乳糖醛酸、木糖、葡萄糖、鼠李糖和半乳糖等单糖。抗氧化活性研究表明该酸性多糖具有显著的DPPH自由基和羟自由基清除活性。

铜绿微囊藻酸性多糖的分离、纯化与结构研究

用热水浸提法提取、DEAE-52纤维素柱分离纯化得到铜绿微囊藻酸性多糖,通过理化分析及IR、UV、HPLC、^(13)CNMR分析其性质和化学结构。结果表明铜绿微囊藻酸性多糖是一种新型的α型吡喃糖,平均分子量为2.0028×10~5,由鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、半乳糖和半乳糖醛酸组成。

夏枯草酸性多糖的理化性质分析及其抗氧化活性

水提醇沉后的夏枯草粗多糖用HZ-820大孔吸附树脂脱色素和蛋白质,再经DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱色谱和Sephadex G-50凝胶柱色谱进一步纯化得到高纯度酸性多糖,用气相色谱、高效凝胶渗透色谱、红外光谱、热稳定性分析、扫描电镜等对其理化性质进行了分析,最后研究了其抗氧化活性。结果表明,夏枯草酸性多糖中含有鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、葡萄糖和甘露糖,其质量分数分别为0.985 7%、1.756 8%、3.202 9%、1.975 3%、0.680 6%,重均相对分子质量为57 234。夏枯草酸性多糖在230℃开始发生降解,600℃基本结束,说明其具有较好的热稳定性。夏枯草酸性多糖表面基本光滑,呈薄片状且无规则蜷曲。抗氧化研究表明,夏枯草酸性多糖能够有效地清除NO2-自由基,同时具有较强的还原能力和对铁离子的螯合能力。

巢湖蓝藻酸性多糖的理化性质及其体外抗氧化作用

目的:以从巢湖蓝藻中分离纯化的一种多糖(acidic polysaccharide from Cyanobacteria of Chaohu,CHAP)为研究对象,对其纯度、分子质量、光谱特征、单糖组成、抗氧化作用进行研究,旨在为水华蓝藻资源进行综合开发利用提供有价值的参考。方法:采用60℃的热水抽提蓝藻,采用硫酸铵去除其中蛋白质,粗多糖经DEAE-52阴离子交换层析柱分离并用Sephadex G-150进行纯化得到纯化多糖CHAP。结果:CHAP中多糖和蛋白质含量分别为91.49%和0.18%,紫外-可见光谱表明CHAP不含核酸,高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)测定CHAP的分子质量为2.209×105 D,离子色谱(ion chromatography,IC)表明CHAP由6.36%的阿拉伯糖、35.47%的葡萄糖、5.03%的木糖、17.09%的半乳糖、27.36%的甘露糖及一种未知单糖构成。红外光谱表明CHAP是具有α-D-半乳吡喃糖的特征吸收峰的吡喃糖,CHAP的抗氧化作用表明:CHAP对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和超氧阴离子自由基(O2-·)有较强的清除能力,其IC50分别为276μg/m L和186.05μg/m L。CHAP对羟自由基(·OH)的清除能力较弱,清除率不到10%。

北五味子酸性多糖对阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆能力的改善作用

目的:观察北五味子酸性多糖(SCP-A)对Aβ25-35致阿尔茨海默病(AD)模型小鼠学习记忆能力的改善作用,并阐明其相关机制。方法:75只雄性C57BL小鼠随机分为空白组(侧脑室注射生理盐水,灌胃蒸馏水),模型组(侧脑室注射Aβ_(25-35),灌胃蒸馏水),5、10和20 mg·kg-1 SCP-A组(侧脑室注射Aβ25-35,灌胃SCP-A),每组15只。灌胃药物每日1次,连续14d,于第8天给予Aβ25-35进行侧脑室注射。给药完毕后,第15天依次进行避暗实验及Morris水迷宫实验观察小鼠的潜伏期、错误次数、找到平台时间、穿越平台次数和目标象限停留时间,Western blotting法检测小鼠海马组织中Tau蛋白、糖原合成酶激酶3(GSK-3β)及其磷酸化蛋白的表达水平。结果:避暗实验,与空白组比较,模型组小鼠潜伏期明显缩短,错误次数明显升高(P<0.01);与模型组比较,10和20mg·kg-1 SCP-A组小鼠潜伏期明显延长(P<0.01),错误次数明显减少(P<0.05或P<0.01)。Morris水迷宫,与空白组比较,模型组小鼠找到平台时间明显延长(P<0.01),穿越平台次数及目标象限停留时间明显缩短(P<0.01);与模型组比较,10和20mg·kg-1 SCP-A组小鼠找到平台时间明显缩短(P<0.01),穿过平台次数及平台区域停留时间明显增加(P<0.01)。Western blotting法检测,与模型组比较,20mg·kg-1SCP-A组小鼠海马组织中磷酸化蛋白Tau Ser199、Tau Ser396及Tau Ser404表达水平明显降低(P<0.05),GSK-3β表达水平明显降低(P<0.01),磷酸化蛋白GSK-3βTyr216相对表达水平明显降低(P<0.05),磷酸化蛋白GSK-3βSer9相对表达水平明显升高(P<0.05)。结论:SCP-A具有抗AD作用,该作用与其调节GSK-3β活性进而降低海马组织中Tau蛋白磷酸化水平有关。

大枣酸性多糖ZJ-6的化学研究

大枣用乙醇回流脱脂,80～100℃温水浸取,提取液减压浓缩,乙醇分级沉淀,三氯乙酸脱蛋白,透析,透析内液减压浓缩,再醇沉得到三个级分ZJ-A,ZJ-B,ZJ-C,ZJ-B经DEAE-Cellulose柱、sepchcryls-300柱分离纯化,得大枣多糖ZJ-6,HPGPC法测定其分子量为4206,光谱和色谱分析(1HNMR,13CNMR,HPLC)表明,ZJ-6是以α-D-(1→4) -半乳糖醛酸为主链,葡萄糖、木糖、阿拉伯糖在末端或支链相连的酸性杂多糖。

中华芦荟酸性多糖的分离纯化与抗炎活性

目的:拟检测分析中华芦荟中可能存在的酸性多糖并初步探究其抗炎活性。方法:以中华芦荟为原料,采用热水提取、三氯乙酸法除蛋白、DEAE-52离子交换色谱经NaCl洗脱得到芦荟酸性多糖。用Sephacryl S-400凝胶柱色谱法进一步纯化,HPLC判断其纯度及相对分子量,用紫外、红外、薄层层析和气相色谱分析鉴定其结构组成。用二甲苯致小鼠耳肿胀模型检测其抗炎活性。结果:从芦荟叶片中分离得到一种纯酸性多糖APS-2,相对分子量为1.3×106Da。单糖组成为葡萄糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖和葡萄糖醛酸,它们以1→3和1→6糖苷键连接。从其分子量、单糖组成与连接方式可判断出APS-2为新多糖,且对二甲苯所致的小鼠耳肿胀有明显的缓解作用。结论:从中华芦荟中分离得到的新酸性多糖APS-2有较好的抗炎活性,此发现为该芦荟的深入开发利用提供了有价值的依据。

红松松子壳酸性多糖最佳提取条件研究

目的实验优选确定松子壳酸性多糖提取最佳条件。方法采用热水浸提法,选择浸提温度、时间、固液比和浸提次数作为单因素进行实验,再通过L9(34)正交实验确定最佳条件。结果松子壳酸性多糖提取最佳条件为浸提温度80℃,时间2 h,固液比为1∶3.5,反复浸提2次。结论该工艺稳定性好,酸性多糖率高。

茶叶酸性多糖的分离、纯化及其理化性质研究

采用水提醇沉法从采自江西婺源的粗老绿茶中提取茶叶多糖,通过Sevag法脱蛋白得到精制茶叶多糖,应用高效凝胶渗透色谱法(high performance gel permeation chromatography,HPGPC)分析茶叶多糖纯度并测定其分子质量,进一步测定茶叶多糖的糖含量、蛋白质含量、单糖组成、糖醛酸组成等理化指标,同时对其进行紫外和红外光谱扫描,考察其光谱性质。结果表明:该茶叶多糖组分为均一性高的酸性多糖组分,分子质量约为289 734 D,糖含量为55.1%,蛋白质含量为1.8%。该茶叶多糖酸性组分主要由鼠李糖、核糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,其物质的量比为1.26∶3.18∶4.08∶1.00∶1.52∶3.92,该茶叶多糖酸性组分中含有大量半乳糖醛酸,含量为33.5%。

白子菜叶片中酸性多糖的降血糖作用及其对相关指标的影响

与西药相比,传统中药及其提取物具有经济、安全的优点,同时还可避免西药的许多副作用[1]。中药材白子草又名白背三七,为菊科（Compositae）三七属（Gynura Cass.）植物白子菜〔Gynura divaricata（Linn.）DC.〕的干燥叶,具有清热、舒筋、止血、祛痰等功效[2]。在民间,白子菜的茎和叶可药食两用,用于治疗高血压、糖尿病和高血脂症等[3],其化学成分复杂,目前已分离获得多糖类[3]、黄酮类[4-6]、生物碱[4,7-8]和脂肪酸[9]等成分。

亚麻籽胶中酸性多糖和中性多糖的分离纯化

采用十六烷基三甲基溴化胺 (CTAB)络合法 ,利用离子交换柱层析和凝胶柱层析从亚麻籽胶中分离得到酸性多糖 (AFM -1 )和中性多糖 (NFM -1 )纯品 ,其分子质量分别为 7 62× 1 0 5u和 1 1 9× 1 0 6u ,总糖含量分别为 5 8 92 %和 84 93%,糖醛酸含量分别为 33 5 5 %和 6 5 8%,AFM-1中C、H和N的含量分别为 2 8 0 4%、5 89%和 0 80 %,红外光谱测定表明 ,AFM -1和NFM -1具有多糖的特征吸收 ,并且其糖环均为吡喃环。

五味子酸性多糖对小鼠抗疲劳作用的实验研究

目的探讨五味子酸性多糖(Schisandra chinensis acidic polysaccharide,SCP-A)对小鼠抗疲劳的作用机制.方法将ICR小鼠随机分为4组,即空白对照组(CON)、低剂量SCP-A组、中剂量SCP-A组、高剂量SCP-A组.通过负重游泳实验及前肢握力实验观察SCP-A对小鼠运动耐力的影响;化学比色法检测小鼠血清中尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和乳酸(lactic acid,LA)、骨骼肌组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)和8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2’-deoxyguanosine,8-OHdG)的水平.结果与CON组比较,SCP-A组的运动耐力均显示出不同程度的增强(P<0.05或P<0.01);BUN、LA、MDA及8-OHdG水平均显著降低(P<0.05或P<0.01).结论SCP-A对小鼠具有抗疲劳作用,该作用可能与其降低骨骼肌氧化损伤有关.

酸性多糖中的葡萄糖醛酸与中性糖的含量测定

目的对酸性多糖中的葡萄糖醛酸 (GA)与中性糖的含量进行测定。方法将葡萄糖和GA配成一系列混合糖 ,比较硫酸咔唑法和间羟联苯法测定GA含量的准确度 ;分别建立葡萄糖和GA对硫酸蒽酮的标准曲线以扣除GA对中性糖测定的干扰。结果葡萄糖的存在对用硫酸咔唑法测定GA有干扰 ,而用间羟联苯法测定几无干扰 ;另外 ,GA的存在对用硫酸蒽酮法测定中性糖有一定干扰。结论应采用间羟联苯法测定酸性多糖中的GA含量 ,同时扣除GA在硫酸蒽酮法中的干扰以得到中性糖的含量。

吸收光谱法比较研究两种光谱探针与酸性多糖的结合反应

对光谱探针天青A(AA)和亚甲蓝 (MB)分别与硫酸软骨素 (CS)、透明质酸 (HA)和硫酸化茯苓多糖 (SP)酸性多糖相互作用的吸收光谱进行了比较研究 ,并分析它们与上述三种酸性多糖的结合反应的特点 ,还测得AA和MB与CS、HA、SP的最大结合数分别为 1 50、3.37× 1 0 3、6 2和 73、54.研究结果表明 ,AA与酸性多糖的磺酸基和羧基均能发生结合反应 ,而MB则只与磺酸基发生结合反应 。