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酸性植酸酶phyB在毕赤酵母GS115中的表达
1
作者
唐升斌
矫庆华
谢达平
《湖南农业大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期602-606,共5页
通过PCR方法扩增得到无信号肽无内含子的酸性植酸酶phyB基因,将此基因克隆至毕赤酵母表达载体pPIC9K上,并转化毕赤酵母GS115感受态细胞,获得重组毕赤酵母.在甲醇的诱导下,该植酸酶phyB基因在毕赤酵母中得到表达.经SDS-PAGE凝胶电泳分析...
通过PCR方法扩增得到无信号肽无内含子的酸性植酸酶phyB基因,将此基因克隆至毕赤酵母表达载体pPIC9K上,并转化毕赤酵母GS115感受态细胞,获得重组毕赤酵母.在甲醇的诱导下,该植酸酶phyB基因在毕赤酵母中得到表达.经SDS-PAGE凝胶电泳分析,该重组蛋白的相对分子质量为7.5×104,而该植酸酶在大肠杆菌DH5α表达系统中表达的相对分子质量为6.0×104,这可能是由于糖基化的结果.酶学性质检测发现,表达的植酸酶最适作用温度为65℃,比野生原始菌株的提高了10℃;诱导pH值为5.5时,蛋白的表达量最高,为10 528.6 U/mL,是野生菌株的2.8倍;最适作用pH值为2.5;在70℃条件下处理60 min,该酶的相对酶活力为40%,在75℃时处理10 min,该酶的相对酶活力为10%.
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关键词
酸性植酸酶phyb
pPIC9K质粒
毕赤酵母GS115
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职称材料
题名
酸性植酸酶phyB在毕赤酵母GS115中的表达
1
作者
唐升斌
矫庆华
谢达平
机构
湖南农业大学生物科学技术学院
中国科学院微生物研究所
出处
《湖南农业大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期602-606,共5页
基金
国家"九五"重点科技攻关项目(96C030202)
文摘
通过PCR方法扩增得到无信号肽无内含子的酸性植酸酶phyB基因,将此基因克隆至毕赤酵母表达载体pPIC9K上,并转化毕赤酵母GS115感受态细胞,获得重组毕赤酵母.在甲醇的诱导下,该植酸酶phyB基因在毕赤酵母中得到表达.经SDS-PAGE凝胶电泳分析,该重组蛋白的相对分子质量为7.5×104,而该植酸酶在大肠杆菌DH5α表达系统中表达的相对分子质量为6.0×104,这可能是由于糖基化的结果.酶学性质检测发现,表达的植酸酶最适作用温度为65℃,比野生原始菌株的提高了10℃;诱导pH值为5.5时,蛋白的表达量最高,为10 528.6 U/mL,是野生菌株的2.8倍;最适作用pH值为2.5;在70℃条件下处理60 min,该酶的相对酶活力为40%,在75℃时处理10 min,该酶的相对酶活力为10%.
关键词
酸性植酸酶phyb
pPIC9K质粒
毕赤酵母GS115
Keywords
acid phosphorutase
phyb
pPIC9K plasmid
Pichia pastoris GS115
分类号
Q344.13 [生物学—遗传学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
酸性植酸酶phyB在毕赤酵母GS115中的表达
唐升斌
矫庆华
谢达平
《湖南农业大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2006
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