淫羊藿总黄酮对去势大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b的影响及与骨密度的相关性

目的:探讨淫羊藿总黄酮(TFE)对去势大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)及骨密度的影响。方法:10月龄雌性SD大鼠去卵巢法建立大鼠模型,随机数字表法分为空白对照组(N)、模型对照组(O)、TFE低(T_(L))、中(T_(M))、高(T_(H))剂量组,β-雌二醇(E)组各10只,灌胃干预90d。用抗酒石酸酸性磷酸酶试剂盒测定TRACP-5b含量,用小动物分析软件测定活体全身骨密度。结果:(1)TRACP-5b水平O组明显高于N组,具有显著性差异(P<0.01),T_(L)、T_(M)、T_(H)和E组TRACP-5b水平明显低于O组,具有显著性差异(P<0.01)。(2)与N组比较,O、T_(L)、T_(M)、T_(H)和E组腰椎骨密度均下降,唯有O组呈显著性差异(P<0.05);与O组比较,T_(M)、T_(H)组腰椎骨密度升高、呈显著性差异(P<0.05),E组腰椎骨密度升高、具有显著性差异(P<0.01)。(3)与N组比较,O、T_(L)、T_(M)、T_(H)和E组全身骨密度均下降,唯有O组差异有统计学意义(P<0.05);与O组比较,T_(L)、T_(M)、T_(H)和E组全身骨密度均升高,唯有E组呈显著性差异(P<0.05)。结论:TFE可以降低去势大鼠血清中TRACP-5b的含量,并与去势大鼠腰椎骨密度、全身骨密度呈一定的量效关系。

青稞酸性磷酸酶基因HvnACP2克隆和亚细胞定位研究

为了探索青稞酸性磷酸酶基因 HvnACP2的基因和蛋白结构特点,为青稞磷吸收利用机制研究提供基础。以青稞‘肚里黄’叶片为材料,根据植物基因组数据库Gramene中的大麦 HvACP2基因和启动子区域序列设计引物,通过PCR获得青稞 HvnACP2基因和启动子区域序列。采用生物信息学软件对 HvnACP2基因启动子区域元件以及蛋白理化性质、跨膜结构、磷酸化位点、信号肽、二级、三级结构进行分析。结果表明: HvnACP2有2个外显子和1个内含子,启动子区域有与分生组织、光响应、厌氧、茉莉酸和脱落酸相关的顺式作用元件。HvnACP2蛋白由454个氨基酸组成,分子质量为51 285.15 u,总原子数为7 058,亲水系数为-0.451,理论等电点为6.17,不稳定指数34.54,脂溶性指数为67.05。具有12个磷酸化位点和信号肽,不具有跨膜结构。 HvnACP2中α螺旋、延长链、β转角、无规则卷曲所占比例分别为18.72%、53.96%、23.57%、3.74%。 HvnACP2和其他物种的同源蛋白都有紫色酸性磷酸酶N末端结构域和金属酸性磷酸酶结构域,将 HvnACP2与其他植物的氨基酸序列进行对比并构建进化树,发现青稞 HvnACP2与小麦TaACP2亲缘关系最近。亚细胞定位结果显示 HvnACP2定位在细胞膜上。

不同蓼草根际土壤酸性磷酸酶活性及其影响因素

为研究不同蓼草对磷的吸收能力,探讨土壤环境因子对蓼草根际土壤酸性磷酸酶(ACP)的影响,将通过抖动法采集的3种蓼草根际和非根际土壤进行理化性质和ACP测定分析。结果表明:3种蓼草非根际土壤ACP活性在0.32~1.65 mg·g^(-1)·h^(-1),而根际土ACP活性为1.37~1.92 mg·g^(-1)·h^(-1),其中粘蓼根际土壤ACP活性最高,其次是丁香蓼和红蓼。粘蓼植株全磷含量最高,根系中全磷含量为0.596 mg·g^(-1),地上部全磷含量为0.490 mg·g^(-1)。丁香蓼吸收、蓄积磷的能力最强,平均每株固磷9.58 g,是一种理想的土壤磷污染修复植株。土壤全氮、全磷和速效磷含量与ACP活性均呈显著正相关关系,土壤水分、pH值、有机质、碱解氮、CEC和黏粒含量与蓼草根系ACP活性的相关性均未达到显著水平。土壤全磷含量是影响这3种蓼草根际土壤ACP活性的最主要因素。

酸性磷酸酶(ACP)法在一级传入通路上的应用

在大鼠和小鼠的Rolando胶状质内出现强烈的酸性磷酸酶(ACP)活性的事实,20余年前即已为一些学者所证实(Colmant,′59;Thomas和Exss,′67;Wolman′70)。但到70年代才发现位于溶酶体内(神经细胞和胶质细胞)的ACP无何实际意义。而在Rolando胶状质的ACP是溶酶体以外的抗氟化物ACP(FRAP),它位于胶状质的轴突终末内,游离于囊泡之间,用2×10^(-2)mM浓度的NaF不能使其抑制。它起源于背根节的“小暗细胞”,由背根的Aδ和C纤维将之运送至中枢突的终末内(Knyihar,′71,′73)。

基于Hg_(2)[Fe(CN)_(6)]纳米酶的多功能酶级联传感体系检测葡萄糖和酸性磷酸酶

该文基于Hg^(2+)可与K_( 4)[Fe(CN)_(6)]原位反应形成Hg_(2)[Fe(CN)_(6)]纳米酶的机理,并利用过氧化氢(H_(2)O_(2))可激发Hg_(2)[Fe(CN)_(6)]酶活性,以及焦磷酸盐(PPi)可通过与Hg^(2+)结合阻止Hg_(2)[Fe(CN)_(6)]纳米酶的形成的原理,构建了多功能酶级联传感平台。当葡萄糖存在时,葡萄糖氧化酶氧化葡萄糖生成H_(2)O_(2),Hg_(2)[Fe(CN)_(6)]催化H_(2)O_(2)分解产生的羟基自由基(·OH)可氧化底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)显色,从而实现葡萄糖的检测。该方法对葡萄糖检测的线性范围为0.10~500μmol/L,检出限为30 nmol/L。当酸性磷酸酶(ACP)存在时,ACP可以水解PPi并释放出与PPi结合的Hg^(2+),Hg^(2+)与K_( 4)[Fe(CN)_(6)]原位反应生成Hg_(2)[Fe(CN)_(6)]纳米酶,进而可实现ACP的检测。结果表明,该方法对ACP检测的线性范围为0.03~50 U/L,检出限为0.0070 U/L。该传感平台操作简单、灵敏度高,为多功能传感体系的设计提供了一种新的思路。

高温酸性磷酸酶acp基因的克隆、表达和功能的初步鉴定

从高温塘泥(温度在40～85℃之间)中分离到一组嗜热微生物,提取环境基因组DNA,通过随机测序,发现许多基因与Thermus属的DNA相似性很高,根据Genbank上Thermus thermophilusHB8基因组序列中推定的酸性磷酸酶基因(TTHA1616),设计引物,PCR扩增得到一段798bp的DNA序列,测序结果与Thermus thermophilusHB8基因组中酸性磷酸酶基因相似性达98%,含有完整的酸性磷酸酶保守区,于是将该基因在大肠杆菌中表达,得到一条约33KD的特异蛋白条带,酶活检测证实该推定蛋白具有酸性磷酸酶活力。

多光谱结合分子对接分析表儿茶素与酸性磷酸酶的相互作用

酸性磷酸酶是风味物质(肌苷酸)降解的一种关键酶,抑制该酶对保持贮藏过程中水产品的风味非常重要。采用紫外-可见吸收光谱、荧光光谱、圆二色光谱和分子对接等方法研究表儿茶素与酸性磷酸酶的相互作用,结果表明:表儿茶素能有效抑制酸性磷酸酶的活性,IC_(50)值为0.184 mmol/L,其抑制类型为混合型抑制。当表儿茶素浓度为0.1 mmol/L时,抑制常数(Ki)为1.025 mmol/L。表儿茶素可使酸性磷酸酶发生动态荧光猝灭。在298 K下,酸性磷酸酶的结合常数(Ka)为1.455×10^(5)L/mol,酸性磷酸酶与表儿茶素之间的主要相互作用力是氢键和范德华力。表儿茶素使酸性磷酸酶的二级结构发生改变,使其α-螺旋增加,而β折叠、β-转角和无规则卷曲减少。研究结果为贮藏过程中抑制水产品中肌苷酸的降解提供了新思路。

海鲈鱼酸性磷酸酶分离纯化及其抑制剂虚拟筛选

为延缓海水鱼类肌苷酸降解,保留鱼类本身的鲜味成分,以新鲜的海鲈鱼为研究对象,经NaAc-HAc缓冲液(pH值为5.0)提取,饱和硫酸铵分级沉淀、阴离子交换柱和葡聚糖凝胶柱分离纯化后,研究海鲈鱼肝中酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)的酶学特性,采用虚拟筛选和分子对接技术筛选潜在的天然ACP抑制剂。结果表明:分离纯化出ACPⅠ和ACPⅡ2种同工酶;ACPⅠ的比活力为6.57 U/mg,纯化了36.50倍,回收率为9.96%;ACPⅡ的比活力为4.62 U/mg,纯化了25.69倍,回收率为6.07%。对回收率和纯化倍数相对较高的ACPⅠ进一步研究,发现其K_(m)为3.174 mmol/L,v_(max)为0.982μmol/(L·min)。ACPⅠ最适温度为30℃,最适pH值为5.0。ACPⅠ的二级结构中α-螺旋含量为14.10%,β-折叠含量为35.90%,β-转角含量为18.20%,无规则卷曲含量为32.60%。虚拟筛选出5个多酚类化合物可作为ACP抑制剂,与ACP相互作用方式主要是氢键和疏水作用。在一定浓度范围内(0~1 mmol/L),5个多酚类化合物均能有效抑制ACP活性,浓度越大抑制效果越好。研究旨在为贮藏过程中水产品的风味和品质控制提供理论依据。

精浆酸性磷酸酶对男性不育症患者的影响分析

目的探究男性不育症与精浆酸性磷酸酶的相关性。方法选取2020年1月至2022年1月我院收治的男性不育症患者70例纳入观察组,选取同期于我院接受体检的正常健康体检人员70例纳入对照组,随后对比两组的精液生化指标。结果观察组精浆锌、精浆弹性蛋白酶、果糖、精浆a-糖苷酶、pH酸碱度、精液量、液化时间、精子密度与对照组比较,差异显著(P<0.05),观察组精浆酸性磷酸酶低于对照组,且低于正常值,差异有统计学意义(P<0.05)。结论男性不育症患者的精浆酸性磷酸酶与病情有着密切联系,当患者的精浆酸性磷酸酶低于正常值,则说明可能存在男性不育症,并且根据其他临床指标也可以证实该结论,可以据此进行检验,从中分析患者的病情,使得患者能够及早确诊。

六味地黄丸对骨质疏松性椎体骨折患者血清骨特异性碱性磷酸酶、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b及骨密度的影响

目的探讨骨质疏松性椎体骨折患者采用六味地黄丸治疗的效果。方法选取2021年2月至2022年2月衡阳市中医医院收治的80例骨质疏松性椎体骨折患者作为研究对象,采用随机数字表法将其分为对照组(40例)和观察组(40例)。对照组采用手术联合西药治疗,观察组加用六味地黄丸治疗。比较两组的骨密度、血清骨碱性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)、Oswestry功能障碍指数(ODI)评分。结果观察组治疗后的骨密度水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗前的血清BALP、TRACP-5b水平的比较,差异无统计学意义(P>0.05),观察组治疗后血清BALP、TRACP-5b水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),两组治疗前ODI评分比较,差异无统计学意义(P>0.05),观察组治疗后的ODI评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论六味地黄丸治疗骨质疏松性椎体骨折的效果明显,患者骨密度明显升高,其机体血清指标下降,患者功能障碍改善明显,临床上可借鉴及推广。

大鼠坐骨神经纤维对脊髓胶状质投射的节段和区域定位—酸性磷酸酶(ACP)法的研究(二)

本实验按照超神经节溃变机理,在捻挫大鼠坐骨神经之后,利用Gomori酸性磷酸酶改良法研究了坐骨神经纤维对脊髓胶状质的节段(纵)和区域(横)投射。本捻挫法之后,坐骨神经纤维对胶状质的投射节段,是L_(3)~S_(1)。在L_(3)段胶状质,投到最内侧一部、中间一部和最外侧一部;在L_(4、5)段,投到全部胶状质;在L_(6)段胶状质,投到内侧大部;在S_(1)段胶状质,投到最内侧一部及中间一部。捻挫法后ACP反应消失的节段和区域,不如神经切断法出现广泛,可能是由于部分纤维未受损或受损较轻的缘故。因此,认为此项研究以切断法为优。

氦氖激光穴位照射对兔子宫和卵巢酸性磷酸酶（ACP）、碱性磷酸酶（ALP）的作用效应

用不同功率的Ｈｅ—Ｎｅ激光照射雌兔外生殖器，照射穴位，用生化方法分别测定兔子宫和卵巢的酸性磷酸酶（ＡＣＰ）、碱性磷酸酶（ＡＬＰ）的活性。激光照射后，子宫和卵巢的ＡＣＰ酶活性保持基本恒定状态，与正常对照组比较无显著差异；相反，ＡＬＰ酶活性显著提高。分析这两种酶在激光用射后表现出来的差异，作者认为是激光作用使细胞内环境改变之故，且这两种酶对Ｈｅ—Ｎｅ激光的耐受性有所不同。

甲胎蛋白联合甲胎蛋白-L3、碱性磷酸酶和酸性水解酶检测在肝细胞癌诊断中的价值

目的探究甲胎蛋白(AFP)联合甲胎蛋白-L3(AFP-L3)、碱性磷酸酶(ALP)和酸性水解酶(AFU)检测在肝细胞癌(HCC)诊断中的价值。方法选取2019年1月至2020年4月滨州医学院附属医院收治的HCC患者98例作为HCC组,选取同时期的肝硬化患者98例作为肝硬化组,同时期到本院进行健康检查的98名人员作为对照组。上述研究对象均接受AFP、AFP-L3、ALP和AFU指标检测,另外HCC组额外接受病理切片检查。结果HCC组的AFP、AFP-L3、ALP和AFU水平高于肝硬化组、对照组,差异有统计学意义(P<0.05),肝硬化组的各项指标水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);HCC组的AFP、AFP-L3、ALP和AFU指标单一和联合检测阳性率高于肝硬化组、对照组,差异有统计学意义(P<0.05),肝硬化组的各项指标单一和联合检测阳性率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);联合指标检测的敏感性、准确性高于单一指标检测,差异有统计学意义(P<0.05);AFP、AFP-L3、ALP和AFU联合诊断的依从性高于病理切片检查,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在HCC诊断中,应用AFP联合AFP-L3,ALP和AFU检测可以提高临床诊断准确性、敏感性,且具有无创性,可以较大程度上提高患者在诊断方面的依从性,为随后治疗工作的开展提供重要参考依据。

补肾壮骨汤治疗老年骨质疏松患者及对抗酒石酸酸性磷酸酶（TRACP-5b）表达的影响

目的分析补肾壮骨汤治疗老年骨质疏松患者及对抗酒石酸酸性磷酸酶（Tartrate resistantacidphos phatase-5b，TRACP-5b）表达的影响，评价补肾壮骨汤对老年骨质疏松患者的疗效。方法选取84例老年骨质疏松患者作为研究对象进行随机对照研究，随机分为对照组采取阿仑膦酸钠、碳酸钙D3治疗，观察组采取补肾壮骨汤治疗；检测两组患者治疗前、治疗后1个月、3个月、6个月的骨密度值（SOS）、血清TRACP-5b水平，并作对比分析。结果观察组临床总显效率为92．86％，大于对照组临床总显效率83．33％（χ2=12．652，P=0．046）。与治疗前相比，治疗后3个月与6个月两组患者的SOS均显著较高，差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗后6个月观察组患者的SOS为（3989．2±134．2）m／s大于对照组（3936．2±104．5）m／s（t=2．019，P=0．047）。两组患者治疗后1个月、3个月、6个月的血清TRACP-5b水平均显著低于治疗前水平，差异有统计学意义（P〈0．05），观察组治疗后1个月、3个月、6个月期间，血清TRACP-5b水平下降程度显著大于对照组，分别为（5．15±0．36）U／L比（4．98±0．41）U／L（t=2．019，P=0．047）、（4．91±0．52）U／L比（4．63±0．38）U／L（t=2．817，P=0．006）、（4．68±0．49）U／L比（4．32±0．35）U／L（t=3．874，P〈0．001）。结论补肾壮骨汤治疗老年骨质疏松的效果确切，可显著改善症状；通过降低血清TRACP-5b水平，抑制骨吸收功能，调节骨代谢水平，提高骨密度，整体改善预后。

A3α肽聚糖对凡纳滨对虾幼体酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活力的影响

用含不同质量分数（0.005%、0.01%、0.1%）A3α肽聚糖（PG）的饵料投喂及在育苗水体中添加不同质量浓度（0.005、0.01和0.05 mg/ml）的PG浸浴凡纳滨对虾幼体,以投喂不添加PG的饵料作对照,另设投喂活饵的试验组作参考;饲养7 d后,检测PL1期仔虾体内酸性磷酸酶（ACP）和碱性磷酸酶（ALP）活性。结果显示：PG经浸浴和口服能促进幼虾ACP和ALP活性提高;经活饵投喂的幼虾的ACP和ALP活性也较高。活饵组的ACP和ALP活性,0.01%PG添加量组和0.005 mg/ml PG的浸浴组幼体的ACP活性,0.01%和0.1%PG添加量组、PG质量浓度为0.01、0.05 mg/ml的浸浴组的ALP活性均较对照组有显著提高（P〈0.05）;口服组和浸浴组ACP活性均与PG浓度正相关,而口服组中0.01%PG添加量组ALP活性最高,浸浴组中PG浓度与ALP活性正相关。试验结果表明,PG能提高幼虾的非特异性免疫力。PG用于育苗的口服质量分数建议为0.05%-0.1%,浸浴质量浓度为0.05mg/ml。

十二烷基硫酸钠(SDS)对克氏原螯虾抗氧化功能和酸性磷酸酶活性的影响

研究了不同浓度(0、35、70、140和280 mg·L-1)十二烷基硫酸钠(SDS)对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)肝胰腺和鳃的毒性效应。结果表明,肝胰腺和鳃超氧化物歧化酶(SOD)活性与SDS浓度及暴露时间密切相关,总体表现为低浓度(≤70 mg·L-1)下受诱导而高浓度(≥140 mg·L-1)下受抑制、暴露时间延长则活性下降的趋势,肝胰腺SOD对高浓度SDS(≥140 mg·L-1)胁迫比鳃SOD更为敏感。2种组织过氧化氢酶(CAT)活性变化趋势总体相似,表现为先升高后下降,鳃CAT活性受诱导或受抑制程度均低于肝胰腺。肝胰腺和鳃酸性磷酸酶(ACP)活性变化大体分别表现为上升—下降和下降—上升—下降,肝胰腺ACP对SDS胁迫高度敏感,暴露24 h时即出现显著受诱导现象(P<0.05或P<0.01),对SDS胁迫具有指示作用。肝胰腺和鳃还原型谷胱甘肽(GSH)含量均表现出先升高后下降趋势,两者分别在48和24 h时达最大值,肝胰腺GSH主要在抵御较低浓度SDS(≤140 mg·L-1)胁迫中发挥重要作用,而鳃GSH含量在24 h内极显著升高(P<0.01),鳃GSH比肝胰腺更容易受诱导。由此可见,克氏原螯虾可通过调节抗氧化系统及物质代谢来抵御SDS胁迫,且多数酶表现出明显的时间-剂量效应,而肝胰腺ACP和鳃GSH对SDS胁迫敏感,可作为SDS污染的潜在生物指示物。

模拟酸雨对土壤酸性磷酸酶活性的影响及机理

通过恒温恒湿连续培养的方法,研究了外源酸雨对土壤pH值、酸性磷酸酶活性的影响,同时运用紫外差光谱和荧光光谱对其机理进行了探讨.结果表明,酸雨通过改变土壤pH值而影响酶活性,pH6.66的近中性土壤酶活性呈现激活-抑制的变化过程;而pH4.61的酸性土壤酶活性持续下降.溶液构象研究表明,pH值是通过改变酶的肽链构象、氨基酸残基微环境而影响其活性的.

长期饥饿和再投喂对泥鳅不同组织糖原、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶的影响

研究长期饥饿和再投喂对泥鳅肝、消化道和肌肉3种组织细胞糖原、酸性和碱性磷酸酶的细胞化学变化.对泥鳅进行饥饿处理,0～28 d不喂养食物,29～35 d恢复正常喂食.分别于0,7,14,21,28和35 d取材,利用显微石蜡切片、组织化学染色的方法检测其肝、消化道和肌肉细胞糖原、酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(ALP)细胞化学特征.结果表明,随着饥饿程度的加深,糖原的量减少,碱性磷酸酶活性下降,酸性磷酸酶活性则增强,投喂后,糖原量、酸性和碱性磷酸酶活性都有不同程度的恢复.整个过程中,它们的变化存在组织差异.泥鳅中酸性和碱性磷酸酶均与长期饥饿条件下机体的应激反应有关.

贻贝(Mytilus edulis)发育早期酸性和碱性磷酸酶活性

采用组织化学和分光光度技术对贻贝卵、胚胎和早期幼虫酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活性进行了定位和定量研究,以探讨贝类早期发育过程中的免疫防御机制。组织化学显示,从卵细胞到D型面盘幼虫各个时期都呈ACP和AKP阳性,卵细胞中阳性颗粒较大且分布比较均匀,受精卵中央着色较深,卵裂期核区呈强阳性且大分裂球内阳性颗粒较多,原肠胚和担轮幼虫外层细胞阳性较强,面盘幼虫外套膜边缘膜、内脏团和面盘基部呈强阳性。生化测定ACP和AKP活力,均是卵细胞最低,随着发育酶活力逐步提高,其中ACP活力在受精后和囊胚期明显提高,囊胚期达到最高峰,其后又略有下降;AKP活力在卵裂期、担轮幼虫和面盘幼虫提高较大,面盘幼虫期酶活力最高。ACP和AKP可能在贻贝的发育早期抵抗病原生物侵染方面发挥重要作用。

磷胁迫对不同杉木无性系酸性磷酸酶活性的影响

缺磷是限制目前农林业产量的一个重要因子,传统的农林业生产主要通过施肥和土壤改良来满足植物对 磷的需求,近年来人们开始发掘磷高效利用植物来替代传统方法提高磷的利用效率。杉木(Cunninghamia lanceola- ta)是我国亚热带地区最重要的造林树种之一,生长快、材质好、产量高,在中国人工林经营中占有重要地位。为揭 示磷素胁迫条件下杉木无性系酸性磷酸酶的变化规律和筛选磷高效利用杉木无性系,通过土培试验,设计4种磷 素处理水平(正常供磷16.mg·kg-1、轻度磷胁迫8 mg·kg-1、中度磷胁迫4 mg·kg-1、重度磷胁迫0 mg·kg-1),进行磷 素胁迫条件下不同杉木无性系酸性磷酸酶(APA)活性的比较研究。结果表明:缺磷条件下1年生杉木叶片和根际 的APA活性明显高于正常供磷处理。随缺磷时间的延长、不同杉木无性系酸性磷酸酶的变化规律不同,其中8号、 24号、37号无性系叶片和根际的APA活性明显高于正常供磷处理;5号、9号无性系根际APA活性虽然增幅较大, 但其叶片酶活性变化较小;3号、23号、34号无性系整体而言对磷胁迫不敏感,缺磷条件不对其叶片APA及根系 APA活性造成显著影响。在磷胁迫条件下,杉木无性系可通过叶片及根际酸性磷酸酶活性的增强来适应环境磷缺 乏,但不同杉木无性系对磷缺乏的适应性存在明显差异。