栉孔扇贝酸性α-醋酸萘酯酶的组织化学研究

采用酶组织化学方法对栉孔扇贝 (Chlamysfarreri)各主要器官组织中的酸性α 醋酸萘酯酶 (ANAE)进行了定性定位研究。结果表明 ,栉孔扇贝的大部分器官 ,包括 :外套膜、鳃、唇瓣、口唇、胃、肠、直肠、肝脏、肾脏、生殖腺、心脏和闭壳肌 ,其上皮组织和大血窦多呈很强的ANAE阳性 (++++) ;血细胞呈ANAE强阳性 (+++) ;结缔组织和肌纤维呈ANAE较强阳性 (++)或弱阳性 (+) ;肝脏肝小叶呈较强的ANAE阳性 ;肾脏肾小管呈ANAE强阳性 ,生殖腺滤泡呈很强的ANAE阳性。

血清酸性α-醋酸萘酯酶的比色测定及初步临床应用

目的 建立比色测定血清酸性α 醋酸萘酯酶总活性的方法。方法 用α 醋酸萘酯为底物 ,在 37℃、pH6 .2的酸性环境中经酶水解产生α 萘酚 ,然后与重氮试剂固蓝B偶联反应显色测定。结果 最适pH 6 .0～ 6 .4 ,底物浓度为 2mmol/L ,吸收峰波长为 5 2 0nm ,线性范围 0～ 2 5 0 0U/L ,酶促反应时间为 2 0min ,显色反应时间为 2 0min ,显色稳定时间为 2 0min ,批内、批间变异系数分别为 2 .6 7%和 5 .1 %。血红蛋白 1g/L和胆红素 1 72 μmol/L无干扰。枸橼酸钠、草酸盐、肝素、EDTA K2 常用浓度无抑制 ,氟化钠可抑制该酶活性。标本 2～ 8℃冰箱保存 7d结果无变化。正常参考值 (n =1 0 0 )为 (1 6 4 5± 378.5 )U/L( x± 1 .96s)。结论 该方法简便实用 ,适于各级实验室开展 ,可作为评价肝细胞变性坏死、肝纤维化。

青年人外周血淋巴细胞酸性α-醋酸萘酯酶反应类型及其正常值的探讨兼测气温对反应类型的影响

用酸性α-醋酸萘酯酶(Acid α-naphtylacetateesterase-ANAE)反应检测58例青年人外周血淋巴细胞总阳性率为76.0%,并按5种类型统计分析,其中1—3个园点状颗粒型为47.8%,4个以上园点状颗粒型为17.1%,散在细小颗粒型为2.7%,单核样弥散型为5.6%,大小不等颗粒型为2.3%。同时观察了32名同一群体在气温差别较大的生活条件下对ANAE反应类型的影响,未见有意义的差异。术文与生后1天和30天新生儿以及临产妇外周血淋巴细胞ANAE反应类型作了比较,发现本分型能较好地反映淋巴细胞ANAE反应类型的动态变化。

HBV-STF对小白鼠T淋巴细胞酸性α-醋酸萘酯酶的影响

报道在小白鼠腹腔注射HBV STF ,然后检测小白鼠T淋巴细胞酸性α 醋酸萘酯酶(ANAE) ,结果显示 :实验组小白鼠T淋巴细胞ANAE阳性率显著高于对照组 ,表明HBV STF能够显著提高小白鼠T淋巴细胞的免疫功能。

酸性α-醋酸萘酯酶染色法的改良

通过对酸性α-醋酸萘酯酶染色过程中的几个重要因素进行研究,确定了其最佳处理条件,并探讨了几个因素间的相互作用。结果表明,固定液用2.5%戊二醛的效果要优于甲醛-丙酮混合液;用pH值5.8～6.2的孵育液孵育1.5h,甲基绿复染1～10s效果最佳。变化各因素的处理条件对最终的观测效果和结果都有影响,其中以甲基绿复染时间过长影响最大。同时,该染色法应用于贵妃鸡的T淋巴细胞计数中,4次重复的结果表明,贵妃鸡酸性α-醋酸萘酯酶阳性细胞率为37.86±1.89%,各重复间差异不显著。

血液酸性α-醋酸萘酯酶染色方法改进

1 方法用酸性α-醋酸萘酯酶法(简称ANAE法)检测血液中的T淋巴细胞及其亚群,以观察机体的细胞免疫功能,已广泛用于组织学中的细胞化学及相关的动物实验中.由于α-醋酸萘酯酶易受时间、温度及pH值等多种因素的影响,故作者在常规染色的基础上,对几个主要步骤进行了改进,效果较好.其方法是:(1)取末梢血制成涂片,室温干燥;(2)于4℃甲醛-丙酮固定液(pH6.0)固定45s;

肝硬化患者血清和腹水中酸性α-醋酸萘酯酶的含量

目的 :探讨肝硬化患者血清、腹水酸性α 醋酸萘酯酶 (ANAE)的含量与肝硬化肝功能Child pugh分级的关系。方法 :比色法测定肝硬化患者血清、腹水ANAE含量。结果 :肝硬化患者血清、腹水ANAE含量较对照组明显降低 ,其中肝硬化肝功能ChildB级以后血清、腹水ANAE含量下降明显。血清、腹水ANAE含量相关性显著。结论 :肝硬化患者血清、腹水ANAE含量 。

酸性α-醋酸萘酯酶染色法在鳜细胞免疫水平检测中的应用研究

研究了酸性α-醋酸萘酯酶染色法在鳜细胞免疫水平检测中应用的可行性。用不同比重的淋巴细胞分离液对鳜外周血中的淋巴细胞进行分离，结果表明比重为1．080的分离液可最大程度地将鳜外周血中的淋巴细胞分离出来。用酸性α-醋酸萘酯酶染色法对分离出的淋巴细胞进行染色，结果显示最佳的染色条件为在pH6．0～6．5的孵育液中37℃孵育90min，然后2％甲基绿37℃复染10min，酸性α-醋酸萘酯酶阳性细胞胞核被染成绿色而胞浆被染成红色，阴性细胞胞核和胞浆都被绿染。对正常未免疫鳜与嗜水气单胞菌脂多糖和鳜病毒主要衣壳蛋白免疫一周后的鳜外周血淋巴细胞染色计数，结果酸性α-醋酸萘酯酶阳性细胞所占的比例分别为15％～18％、33％～40％和26％～29％，方差分析表明免疫组与对照组阳性率差异极显著，说明α-醋酸萘酯酶染色法可用于鳜细胞免疫水平的检测。

112名健康学龄前儿童T淋巴细胞酸性α-醋酸萘酯酶活性测定

所测112名健康学龄前儿童ANAE阳性率平均值为58．39±4．66(ˉX±SE)，男女之间差异无显著性。同时对43例健康学龄前儿童进行Ea花结试验，平均值为39．98±7．47(ˉX±SE)，与ANAE阳性率比较，差异非常显著。

血清α-醋酸萘酯酶同工酶琼脂糖凝胶电泳法及临床应用

为简化α－醋酸萘酯酶同工酶检查技术，建立琼脂糖凝胶电泳法。１０ｇ／Ｌ琼脂糖－ＰＶＰ和ｐＨ７．４０．１ｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液，泳池ｐＨ８．６，μ＝０．０６巴比妥缓冲液，滤纸刺槽加样，电压１５０Ｖ，电流２ｍＡ／ｃｍ电泳４０ｍｉｎ，搭桥填充染色。染色液由α－醋酸萘酯ｐＨ６．２０．１ｍｏｌ／ＬＰＢ液和固蓝Ｂ盐组成，３７℃染色２０ｍｉｎ，醋酸漂洗比色。结果对照组（ｎ＝３０）α－ＡＮＥ同工酶谱带３～４条（Ｅ１、Ｅ１ａ、Ｅ２、Ｅ３）着色强度Ｅ３＞Ｅ１＞Ｅ１ａ＞Ｅ２，ｘＥ３占８８％，Ｅ１～Ｅ２１２％左右，相对电泳位置Ｅ１：ｐｒｅＡｌ／Ａｌ，Ｅ１ａ：Ａｌ／α１，Ｅ２：ｐｒｅ－α２，Ｅ３：α２／β，Ｒｆ分别为０．５４５、０．５２７、０．４３６、０．３６４。Ｅ３区组成复杂，用ＮＡＮＡ酶水解和ＷＧＡ亲加试验证明它富含ＳＡ和ＧｌｃＮＡＣ的一组不均一的糖蛋白。谱形异常的典型病例有Ⅰ型在症糖尿病和部分肝癌患者，它除有正常谱带外，前者多Ｅ４和Ｅ５，其色度比（％）Ｅ４０．１１４，Ｅ５０．１９８，相对电泳位置在β和β与Ｐｒｅ－γ之间，Ｒｆ＝０．２５４，０．１８２。肝癌病人谱带也多１～２条（Ｅ５和Ｅ６）位于Ａ／ｐｒｅ－γ和ｐｒｅ－γ，?

冷浴对小鼠外周血淋巴细胞酸性α-醋酸萘酯酶活性的影响

目的:观察冷浴对小鼠外围血淋巴细胞酸性α-醋酸萘酯酶活性的影响.方法:受试小鼠在0～4℃低温水中冷浴2min.分别在冷浴后1、5、24 h采集小鼠外周血,测定T淋巴细胞酸性а-醋酸萘酯酶(ANAE)活性.结果:冷浴后1 h时及5 h ANAE阳性率与冷浴前无显著性差异(P>0.05),冷浴后24 h ANAE阳性率明显增高(P<0.001).小鼠冷水浴后,进食增加,行动活跃.而对照组25℃水浴后ANAE活性无显著性变化.结论:0～4℃适宜时间冷水浴,可激发小鼠机体免疫功能.

血清酸性α-醋酸萘酯酶的比色测定及初步临床应用

目的建立比色测定血清酸性α-醋酸萘酯酶总活性的方法。方法用α-醋酸萘酯为底物,在37℃、pH6.2的酸性环境中经酶水解产生α-萘酚,然后与重氮试剂固蓝B偶联反应显色测定。结果最适pH6.0~6.4,底物浓度为2mmol/L,吸收峰波长为520nm,线性范围0~2500U/L,酶促反应时间为20min,显色反应时间为20min,显色稳定时间为20min,批内、批间变异系数分别为2.67%和5.1%。血红蛋白1g/L和胆红素172umol/L无干扰。枸橼酸钠、草酸盐、肝素、EDTA-K2常用浓度无抑制,氟化钠可抑制该酶活性。标本2~8℃冰箱保存7d结果无变化。正常参考值(n=100)为(1645±378.5)U/L(x-1.96s)。结论该方法简便实用,适于各级实验室开展,可作为评价肝细胞变性坏死、肝纤维化、肝脏合成功能异常的一项新的血清学指标。

Ⅰ型糖尿病血清α-醋酸萘酯酶同工酶出现变异谱带的初步分析

目的 :探讨血清α-醋酸萘酯酶 (α-ANE)及其同工酶在不同类型糖尿病的实用价值。方法 :采用琼脂糖凝胶电泳法分离α-ANE同工酶。结果 : 型糖尿病和胰腺炎 ,谱形基本正常 ; 型糖尿病谱形异常 ,多分离出 1～ 2条慢速的谱带 ,分别 E4和E5 ,并按其比例和色度 ,可分为 3种表现型 E4( )、E5 ( )、E4+ E5 ( ) ,相对迁移率为 0 .2 5 4和 0 .182。相对电泳位置 :β和β/pre-γ之间。结论 :E4和 E5带经过神经胺酸酶处理证明属脱 SA带 ,初步认定 E4带可能是 型糖尿病患者的一种特殊酶学特征 ,E5带在部分肝癌患者也有发现。

血清α-醋酸萘酯酶在160例肝病中的诊断意义

目的探讨血清α-醋酸萘酯酶(α-ANE)对肝病的诊断、动态监测和预后评估及临床应用价值。方法应用偶氮比色法对160例肝病组和40例对照组进行血清α-ANE测定。结果对照组血清α-ANE为(1625±275)u/L,肝病组中急性肝炎患者血清α-ANE为(1315±280)u/L;慢性肝炎患者血清α-ANE为(1250±235)u/L;肝硬化患者血清α-ANE为(714±201)u/L;肝癌患者血清α-ANE为(950±162)u/L。结论约92%肝病患者血清α-ANE活性有不同程度降低,肝硬化患者最为突出。血清α-ANE活性变化可作为肝实质细胞功能和损伤程度的一项新的酶学指标,且该酶与AST/ALT、蛋白联合检查有助于慢性肝硬化的鉴别诊断,血清α-ANE测定对肝炎的治疗、动态监测及预后评估有重要意义。

以α-乙酸萘酯为底物植物酯酶活力测定条件的优化

确定了以α-乙酸萘酯为底物植物酯酶活力测定的最佳条件:底物溶液配制浓度为0.015mol·L-1,磷酸缓冲液pH=6.5,40℃恒温水浴定时反应5min,酶抑制剂SDS浓度为3.0%,加入固兰B盐显色,显色30s,加入1∶1的盐酸调溶液pH<5.2,混合均匀,于535nm测定吸光度值,空白为酶液换成蒸馏水,其它不变。

不同植物酯酶对α-乙酸萘酯催化活性研究

为从不同作物中筛选出一种适于有机磷农药残留快速检测的酶源,研究不同作物种子、不同生长期、不同部位植物酯酶对底物α-乙酸萘酯催化作用的变化规律。结果表明:种子发芽及幼苗期后几种植物的酯酶活性总体呈现递减趋势,几种植物种子中的酯酶活性大小顺序依次为:小麦>大豆>玉米>水稻;龙麦26、豫麦39、麦976189种子酯酶活性较高;经过粉碎筛分后的龙麦26不同部位中,麸片酯酶活性最高。建议利用龙麦26麸片作为酶法快速检测有机磷农药的酶源。

7-氨基-1-羟基萘-3-磺酸(γ酸)衍生的酸性染料的合成及其性能研究

本文涉及由γ酸衍生的,在分子中含有磺酰胺基的红色酸性染料的合成。该类染料构想用来在弱酸性染浴中染聚酰胺和羊毛纤维。通过检测染料的应用性能。坚牢度和光谱特性,发现磺酰胺基和在它的氮原子上的取代基会影响该类染料的性能。

HPLC法测定尿素-醋酸曲安萘德软膏中醋酸曲安萘德的含量

目的采用高效液相色谱法测定尿素醋酸曲安萘德软膏中醋酸曲安萘德的含量。方法KromasilC18(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇水乙醚(62∶38∶2);流量1.0ml·min-1;检测波长为240nm。采用炔诺酮作内标物质。结果醋酸曲安萘德在0.16～0.79μg范围内呈线性关系,r=0.9998(n=5),平均回收率为100.7%(n=5),RSD为0.97%。结论本法简便、准确,可以控制该制剂的质量。

青海撒拉族人外周血淋巴细胞A——醋酸萘酯酶反应阳性率及其亚群的观察

应用α-醋酸萘脂酶反应标记法,对94例青海撒拉族健康人的外周血淋巴细胞阳性率进行了研究.结果:α-醋酸萘酯酶反应者为T淋巴细胞.阳性率为75.15±5.22%,T淋巴细胞的亚群:“点状颗粒型”淋巴细胞为61.75±7.29%:“弥散颗粒型”淋巴细胞为13.08±3.39%。同时发现α-醋酸萘酯酶反应阳性淋巴细胞随年龄增长而发生变化.

氦-氖激光对大鼠免疫细胞内非特异性酯酶影响的图像分析

目的 探讨氦 -氖 (He -Ne)激光照射对机体免疫功能的影响。方法 将大鼠随机分为 4组 ,1组为对照组 ,2～ 4组为He -Ne激光照射的不同时间组。采用α -萘酚醋酸酯法显示非特异性酯酶 ,并用计算机图像分析系统对大鼠腹腔巨噬细胞、血液淋巴细胞、中性粒细胞内非特异性酯酶作定量分析。结果 各照射组的三种免疫细胞内非特异性酯酶的各项指标与对照组比较 ,差异均有极显著性意义 (P<0 .0 1) ,各照射组之间比较 ,差异也有极显著性意义 (P<0 .0 1) 。结论 He -Ne激光可激活免疫细胞 ,增强机体免疫力。