酸敏感离子通道3对肠易激综合征大鼠内脏高敏感性的影响及其机制

目的探讨酸敏感离子通道3(ASIC3)对肠易激综合征(IBS)大鼠内脏敏感性的影响及可能的信号通路调节机制。方法孕龄鼠产后第2天开始,将分娩的6只幼鼠与母鼠继续在原笼中饲养,作为对照组,其余幼鼠采取母婴分离(NMS)法制作IBS模型。待NMS幼鼠生长至成年(8周龄),通过腹部回撤反射(AWR)评分筛选出16只造模成功的大鼠,将其随机分为NMS组(n=8)与NMS+APETx2组(n=8),NMS+APETx2组每日给予ASIC3特异性阻滞剂APETx2100μg/kg腹腔注射,NMS组及对照组腹腔注射等量生理盐水,持续1周。采用AWR评分评估内脏敏感性,墨汁染色法检测肠道传输速率以评估肠道动力,ELISA法检测结肠组织5-羟色胺(5-HT)水平,免疫组化法检测结肠组织5-HT4受体、ASIC3表达水平。结果与对照组比较,NMS组大鼠在结直肠压力为40、60、80 mmHg时的AWR评分明显增加,肠道传输速率降低,5-HT、ASIC3及5-HT4受体表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.01);而与对照组比较,NMS+APETx2组的AWR评分及肠道传输速率无明显变化(P>0.05),但结肠组织5-HT、ASIC3及5-HT4受体表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。与NMS组比较,NMS+APETx2组大鼠AWR评分降低,肠道传输速率增高,5-HT、ASIC3及5-HT4R受体表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论ASIC3参与了IBS大鼠内脏高敏感性的形成,可能与其促进大鼠体内5-HT通路活化有关。

酸敏感离子通道3在关节炎疼痛中的作用

疼痛相关的酸敏感离子通道3(Acid-sensingion channels 3,ASIC3)主要分布在周围神经系统,是对pH值改变最敏感的酸受体。最近,越来越多的研究证实,在脊髓背根神经节(DRG)丰富表达的ASIC3,与痛觉及伤害性感受密切相关,在慢性炎性疼痛的病理过程中发挥重要的作用。研究表明在炎性痛模型中可以上调脊髓背角ASIC3在转录和蛋白水平的表达;阻断或敲除ASIC3基因(ASIC3-/-)能明显抑制炎症性关节痛。上述各点提示,在生理或病理情况下,脊髓背角ASIC3对脊髓水平的感觉信息传递特别是痛觉的传导可能发挥着重要作用,这可能是关节炎疼痛的治疗靶点。本文将ASIC3的生物学特征以及它在关节炎疼痛和治疗中的作用作一综述。

酸敏感离子通道3在胃食管反流大鼠中的表达和意义

目的检测酸敏感离子通道3(ASIC3)在胃食管反流大鼠食管黏膜及背根神经节(DRG)中的表达变化,探讨其在胃食管反流病(GERD)发病中的作用。方法将Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为实验组(G组)和对照组(S组)。实验组采用限制幽门及结扎胃底方法建立GERD大鼠模型。于造模后15 d处死两组大鼠,通过HE染色对大鼠食管黏膜进行组织病理学检测,通过蛋白质印迹法(Western blotting)和实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠食管黏膜及DRG中ASIC3蛋白及mRNA表达变化。结果HE染色显示G组大鼠食管黏膜慢性炎症改变,S组大鼠食管黏膜无异常;Western blotting显示G组大鼠DRG中ASIC3蛋白表达高于S组(6.75±0.74 vs 5.07±0.72)(P<0.05),食管黏膜中ASIC3蛋白表达高于S组(8.04±0.67 vs 7.31±0.740)(P<0.05);RT-PCR同样显示,G组大鼠DRG中ASIC3 mRNA表达高于S组(0.00030±0.00003 vs 0.00013±0.00002)(P<0.05),食管黏膜中ASIC3 mRNA表达高于S组(0.01073±0.00231 vs 0.00088±0.0007)(P<0.05)。结论 ASIC3在DRG及食管黏膜上表达上调可能是导致GERD食管内脏高敏感的原因之一。

补肾方骨青颗粒对佐剂性关节炎大鼠的干预和影响软骨表达酸敏感离子通道3的实验研究

目的:观察补肾方骨青颗粒对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠的干预作用及对软骨酸敏感离子通道3(acid-sensitive ion channel 3,ASIC3)表达的影响。方法:将大鼠随机分成空白对照组、AA模型组、阳性对照药组(阿司匹林50mg/kg)、骨青颗粒治疗剂量组(8.4 g生药/kg)、骨青颗粒高剂量组(16.8 g生药/kg)。除空白对照组外其余各组大鼠左后足趾皮内注射完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)诱导AA,致炎后第10天起各组灌胃给予相应药物,连续给药10 d。记录大鼠体重足趾容积和关节炎评分,实验结束后,光学显微镜观察大鼠踝关节病理变化,用RT-PCR和Western blot分析大鼠膝关节软骨细胞中ASIC3 mRNA及蛋白表达。结果:经治疗后,骨青颗粒能明显抑制AA大鼠踝关节的肿胀,显著降低AA大鼠关节软骨细胞ASIC3 mRNA及蛋白的表达,效果与阳性对照药物阿司匹林无显著性差异。结论:骨青颗粒可减轻佐剂性关节炎大鼠的关节炎症,保护关节软骨,并能下调软骨ASIC3的表达。

强筋壮骨祛风合剂对髓核致炎大鼠背根神经节中3型酸敏感离子通道的影响

目的:观察强筋壮骨祛风合剂对髓核致炎大鼠背根神经节中3型酸敏感离子通道(acid-sensing ion channel 3,ASIC3)的影响。方法:选取40只清洁级成年雄性SD大鼠,随机分为空白组、假手术组、模型组、阿米洛利组和中药组,每组8只。除空白组外,其余各组大鼠均手术暴露L5背根神经节。假手术组暴露L5背根神经节后直接缝合切口;模型组和中药组取出大鼠尾部的髓核组织置于暴露的L5背根神经节上,缝合切口;阿米洛利组将取自大鼠尾部的髓核组织置于暴露的L5背根神经节上,并在暴露的L5背根神经节周围滴入含0.1 mg盐酸的阿米洛利药液1 m L,缝合切口。自造模后第1天开始,中药组按5 m L·kg-1以强筋壮骨祛风合剂灌胃,每天2次,连续30 d;空白组、假手术组、模型组不进行药物干预。分别于造模前1 d及造模后3、5、9、15、23、29 d,采用Up-Down法测定大鼠左后足50%机械刺激缩足阈值(50%paw withdrawal threshold,50%PWT)。中药组药物干预结束后,处死所有大鼠,取出L5背根神经节分成2份,一份采用免疫组织化学法计算ASIC3阳性面积,另一份采用Western Blot技术检测ASIC3蛋白表达量。结果:造模后3 d内,模型组、阿米洛利组和中药组均有部分大鼠出现左后足外翻以及足趾背伸现象。造模前后不同时间50%PWT的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=50.132,P=0.000)。5组50%PWT总体上比较,组间差异有统计学意义,即存在分组效应(F=288.219,P=0.000)。除造模前1 d时外(F=0.332,P=0.854),造模后各时点5组大鼠50%PWT比较,组间差异均有统计学意义(F=288.015,P=0.000;F=308.588,P=0.000;F=374.945,P=0.000;F=560.713,P=0.000;F=343.043,P=0.000;F=459.914,P=0.000);造模后各时点模型组的50%PWT均低于空白组、假手术组、阿米洛利组和中药组(P=0.010,P=0.011,P=0.001,P=0.001;P=0.023,P=0.022,P=0.000,P=0.004;P=0.013,P=0.013,P=0.003,P=0.001;P=0.012,P=0.002,P=0.002,P=0.002;P=0.004,P=0.000,P=0.000,P=0.000;P=0.003,P=0.005,P=0.003,P=0.013);造模后各时点空白组和假手术组50%PWT比较,差异均无统计学意义(P=0.640,P=0.710,P=0.590,P=0.480,P=0.330,P=0.390);造模后各时点阿米洛利组50%PWT均高于中药组(P=0.021,P=0.011,P=0.013,P=0.002,P=0.001,P=0.005)。时间因素与分组因素存在交互效应(F=2.358,P=0.002)。5组大鼠背根神经节中ASIC3阳性面积和ASIC3蛋白表达量比较,组间差异均有统计学意义(F=205.890,P=0.030;F=101.740,P=0.001);空白组、假手术组、阿米洛利组和中药组背根神经节中ASIC3阳性面积和ASIC3蛋白表达量均小于模型组(P=0.004,P=0.003,P=0.001,P=0.007;P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000);阿米洛利组背根神经节中ASIC3阳性面积和ASIC3蛋白表达量均大于中药组(P=0.001;P=0.000)。结论:强筋壮骨祛风合剂可以降低髓核致炎大鼠病变的背根神经节中ASIC3的水平,提高大鼠的疼痛阈值,但其作用效果不及盐酸阿米洛利。

大鼠食道扩张内脏痛模型的建立及酸敏感离子通道3的功能变化及意义

目的:通过建立大鼠食道扩张(Esophageal distensions,ED)内脏痛动物模型并研究其脊髓背根神经元(DRG)中酸敏感性离子通道3(ASIC3)的表达及功能的改变,探讨ASIC3参与ED内脏痛模型中DRG神经元高敏感性发生的可能机制。方法:50只SD大鼠随机分成2组:ED动物模型组30只,对照组20只;免疫荧光检测DRG神经元ASIC3的表达,膜片钳分析技术记录ED刺激后DRG神经元兴奋性改变及ASIC3电流变化,并与对照组比较。结果:免疫荧光检测发现,ASIC3在DRG细胞中表达定位于细胞膜及细胞质;在给予大鼠1h的重复ED刺激之后,相应节段的DRG神经元受到去极化刺激时产生的动作电位数量明显增多,且ED大鼠ASIC3通道离子电流也明显增加。结论:食道球囊扩张可成功建立食道内脏痛动物模型,DRG神经元中ASIC3表达与功能的改变可能是导致GERD食管内脏高敏感发生的原因之一。

背根神经节内代谢型谷氨酸受体2与酸敏感性离子通道3和辣椒素受体1的共存研究(英文)

代谢型谷氨酸受体(mGluR)2/3在伤害性信息从外周向脊髓传递的过程中发挥着重要作用。以往研究证明在大鼠中mGluR2参与了机械性超敏和热超敏的形成,因此本研究拟采用免疫荧光组织化学染色技术揭示背根节(DRG)中mGluR2和酸敏感性离子通道3(ASIC3),一个多觉机械性感受器,或者和热伤害性感受器辣椒素受体(TRPV1)的共存情况。结果显示:mGluR2主要存在于DRG神经元的胞浆中。计数结果显示DRG中35.85%的神经元呈mGluR2免疫阳性。在这些阳性神经元中,82.61%为小细胞(直径小于30μm);5.79%为中等细胞(直径为30～50μm);11.59%为大细胞(直径大于50μm)。进一步在免疫荧光双重标记切片上可观察到分别有42.45%和79.78%的小型mGluR2阳性神经元同时表达ASIC3或TRPV1免疫阳性。以上结果提示mGluR2主要存在于DRG中的小神经元中,这些神经元通常被认为是外周Aδ-或C-纤维传入的伤害性感觉神经元,在这类神经元中mGluR2与ASIC3或TRPV1均有大量共存,提示这些共存可能与机械性或热超敏的产生或者维持有着重要的联系。

APETx2对应激性胃黏膜损伤大鼠脊髓背根神经节酸敏感离子通道3表达的影响

目的:观察酸敏感离子通道3(ASIC3)特异性拮抗剂APETx2对应激性胃黏膜损伤大鼠脊髓背根神经节(DRG)神经元上ASIC3表达的影响。方法:24只雄性Wistar大鼠随机等分为对照组(NC组)、应激模型组(WIRS组)及APETx2处理组(AT组,腹腔内注射APETx2 25μg/kg)。采用浸水束缚应激(WIRS)法复制应激性胃黏膜损伤模型,于应激6 h后留取标本测定胃液p H值;HE染色观察胃组织病理学改变;免疫组化和实时定量PCR法测定DRG神经元上ASIC3蛋白及m RNA表达。结果:与NC组比较,WIRS组胃p H值明显降低(P<0.05),胃黏膜损伤程度严重,DRG神经元上ASIC3表达明显上调(P<0.05);与WIRS组比较,AT组胃液p H值明显升高(P<0.05),胃黏膜损伤程度减轻,DRG神经元上ASIC3表达明显减少(P<0.05)。结论 :浸水束缚应激所致胃黏膜损伤大鼠DRG神经元上ASIC3被激活,与胃液p H下降、胃黏膜损伤严重程度密切相关,APETx2可特异性拮抗ASIC3表达,对应激性胃黏膜损伤可能起保护作用。

酸敏感离子通道3及其基因敲除小鼠特性的研究进展

酸敏感离子通道3(acid-sensing ion channels 3,ASIC3)是对p H值改变最敏感的酸受体。在对ASIC3及其基因敲除小鼠(ASIC3-/-小鼠)的研究中发现,ASIC3参与痛觉、酸味觉、感受伤害性刺激、心肌缺血等多种生理和病理过程,并发挥重要作用。这些成果为在分子水平研究针刺治疗疾病的机制提供条件和基础。

酸敏感离子通道3参与NERD内脏高敏感机制的研究进展

非糜烂性反流病(Non-erosive reflux disase,NERD)的发病机制目前尚不明确,可能与内脏高敏感相关。内脏高敏感的外周致敏和中枢致敏形成过程中,酸敏感离子通道(Acid-sensing ion channels,ASICs)均起到重要作用。其中酸敏感离子通道3(Acid-sensing ion channel 3,ASIC3)作为与NERD内脏高敏感性关联最强的ASICs,其可在酸性环境下活化,并受炎症介质等多种物质调控表达水平和空间结构。NERD患者酸暴露时多脑区激活,ASIC3在中枢致敏环节的研究对于内脏高敏感机制的完善是不可或缺的一部分。

酸敏感离子通道1a在酸诱导的大鼠关节软骨细胞自噬的作用及其机制研究

目的研究酸敏感离子通道1a(acid-sensing ion chan-nel 1a)在体外培养的酸诱导的大鼠关节软骨细胞自噬的作用及其可能机制。方法Ⅱ型胶原酶消化法分离大鼠关节软骨细胞,鉴定后传代培养,观察在不同pH条件下诱导的细胞自噬情况以确定胞外酸化条件;将软骨细胞分为pH7.4环境下培养的正常组、pH 6.0的酸化组、以及经ASIC1a非特异性阻断剂Amiloride和特异性阻断剂PcTX1处理的酸化组,RT-PCR法检测细胞自噬基因Beclin-1 mRNA的表达,Western blot法检测自噬蛋白LC3及ERK1/2、p38MAPK磷酸化蛋白的表达,透射电子显微镜法(TEM)观察自噬小体数量的变化;通过使用ERK1/2、p38MAPK磷酸化抑制剂(PD98059、SB203580),采用RT-PCR和Western blot法观察ERK1/2及p38MAPK对酸诱导的软骨细胞自噬的影响。结果 pH 5.5和pH 6.0胞外酸化刺激均能明显升高软骨细胞自噬水平(P<0.01);与pH 7.4组比较,酸化组软骨细胞Beclin-1 mRNA及LC3、磷酸化的ERK1/2和p38MAPK蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),且自噬小体数量增多,ASIC1a阻断剂组自噬水平及ERK1/2、p38磷酸化蛋白表达水平较酸化组明显降低(P<0.01),且自噬体数量减少;与pH 6.0组相比,ERK1/2磷酸化抑制剂处理后,Beclin-1 mR-NA和LC3蛋白的表达均下调(P<0.05,P<0.01),而p38磷酸化抑制剂组自噬水平则无明显变化。结论胞外酸化环境下能诱发软骨细胞自噬,阻断ASIC1a能明显减弱酸化诱导的软骨细胞自噬,其机制可能与抑制ERK1/2磷酸化有关。

酸敏感离子通道的功能及其相关调控

酸敏感离子通道 (ASICs)是一类由胞外酸化所激活的阳离子通道 .目前 ,已发现了 6个ASICs亚基 ,它们在外周和中枢神经系统中广泛表达 .利用基因敲除等技术 ,已证明它们在触觉、痛觉、酸味觉以及学习记忆中具有重要作用 .同时 ,它们也参与某些病理反应 .ASICs可以被神经肽、温度、金属离子和缺血相关物质等调控 。

3型酸敏感离子通道在髓核致炎大鼠背根神经节中的表达研究

目的通过观察3型酸敏感离子通道(ASIC3)信号通路阻断剂阿米洛利对髓核致炎大鼠背根神经节(DRG)中ASIC3表达的影响,探索ASIC3在髓核组织诱导发生根性疼痛过程中的可能机制。方法 48只大鼠采用随机数字表法分为对照组、模型组和阿米洛利组3组,每组16只。对照组在暴露L5DRG后直接缝合。模型组取出大鼠尾部的髓核组织置于暴露的L5DRG上,缝合切口。阿米洛利组在模型组的基础上,于术后2周内每天腹腔内注射20μg/kg阿米洛利。对照组和模型组不进行药物干预。造模成功后分别于术后2、4、6、8、10、12d检测大鼠后足的机械刺激缩足阈值(PWT)。采用RT-PCR法和Western blot法测定ASIC3、TNF-α和IL-6 m RNA和蛋白表达水平。术后1、3、7和14d采用ELISA法检测外周血及DRG上清液中的TNF-α和IL-6水平,并检测一氧化氮(NO)水平。结果与对照组比较,术后12d时模型组大鼠后足的PWT显著下降(P<0.01),术后14d模型组大鼠DRG中ASIC3的m RNA和蛋白水平上调(均P<0.01),外周血和DRG中NO、TNF-α、IL-6水平均上调(均P<0.01)。与模型组比较,阿米洛利组大鼠后足的PWT在8d内下降,之后逐渐增加,术后10和12d大鼠后足的PWT明显高于模型组(均P<0.01),术后14d DRG中ASIC3的m RNA和蛋白水平下降(均P<0.05),外周血和DRG中NO、TNF-α、IL-6水平均显著降低(均P<0.01)。结论ASIC3可能在由髓核突出引起的神经根性疼痛中起重要作用。ASIC3可能通过上调NO及细胞炎性因子(TNF-α和IL-6)的表达并增强这些介质的疼痛加强作用,诱导痛觉过敏从而引起神经根性疼痛。

TWIK相关酸敏感钾离子通道在呼吸与睡眠调节中的研究进展

TWIK相关酸敏感钾离子通道(TASK)-1和TASK-3是双孔钾离子通道家族的重要成员,广泛表达于中枢神经系统和外周组织,对缺氧和细胞外液p H值变化极为敏感。TASK参与呼吸中枢的表达及呼吸运动的调节,同时在睡眠调节中也可发挥一定作用,本文总结了TASK在呼吸与睡眠调节中的相关研究进展。

CGRP/ASIC3参与大鼠食道扩张内脏痛模型中背根神经节神经元高敏感机制的研究

目的:探讨降钙素基因相关肽(CGRP)和酸敏感离子通道3(ASIC3)参与大鼠食道扩张(ED)内脏痛模型中脊髓背根神经节(DRG)神经元高敏感发生的机制。方法:将50只健康雄性SD大鼠随机分为实验组(n=30)和对照组(n=20)。腹腔麻醉50只SD大鼠,暴露大鼠食管下段,利用PE-240管对实验组大鼠的胸段食管进行1 h重复ED刺激,对照组则不予处理。分离并培养50只大鼠胸段脊髓DRG神经元,根据实验组培养液中有无加入CGRP拮抗剂(CGRP8-37)将其进一步分为ED组(n=15)和ED+CGRP8-37组(n=15)。采用全细胞膜片钳技术记录DRG神经元动作电位及ASIC3电流变化;免疫荧光法检测DRG神经元中CGRP、ASIC3的表达定位;逆转录实时聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测CGRP与ASIC3 mRNA表达;Western blot法检测CGRP与ASIC3蛋白表达。结果:ED组DRG神经元动作电位数较对照组显著增加(P<0.01);免疫荧光结果示CGRP与ASIC3在DRG神经元中存在共表达;与对照组比较,ED组CGRP与ASIC3的mRNA、蛋白水平显著上调(P<0.01);且CGRP的mRNA、蛋白表达与ASIC3的mRNA、蛋白表达均呈正相关(r分别为0.833、0.981,P<0.01);ED组和ED+CGRP8-37组ASIC3电流较对照组显著增加(P<0.01),ED+CGRP8-37组ASIC3电流较ED组明显减少(P<0.01)。结论:CGRP和ASIC3共同参与了ED模型中DRG神经元的超敏反应,CGRP参与调节ASIC3电流变化可能是DRG神经元高敏感发生的重要机制之一。

囊泡膜谷氨酸转运体与ASIC3或TRPV1在大鼠结状神经节内的共存研究(英文)

为了探讨囊泡膜谷氨酸转运体(VGluTS)与酸敏感离子通道亚基3(ASIC3)或瞬时感受器电位香草酸亚型1(TRPV1)样阳性产物在大鼠迷走神经结状神经节(nodoseganglia,NG)内的分布和共存,本研究采用免疫荧光组织化学双重标记技术,在激光共聚焦显微镜下观察了大鼠NG内VGluT1或VGluT2分别与ASIC3或TRPV1的共存情况。结果显示:(1)在NG内,VGluT2、ASIC3和TRPV1主要见于中、小型神经元的胞浆内,大型神经元少见,而VGluT1阳性神经元数量较少,主要见于大型或中型神经元;(2)部分VGluT2阳性神经元同时显示ASIC3或TRPVl免疫活性,其中VGluT2/ASIC3双标神经元分别占VGluT2阳性神经元的43.06%,占ASIC3阳性神经元的58.74%;而VGluT2/TRPVl双标神经元分别占VGluT2或TRPVl阳性神经元的5617%和51.12%;(3)VGluTI与ASIC3或TRPV1双标神经元的数量很少,不到1%。以上结果提示,VGluT2主要存在于NG内中、小型神经元,这些神经元通常被认为是内脏伤害性信息的初级感受神经元,因而VGluT2分别与ASIC3或TRPVl的共存表明它们可能与内脏伤害性信息的产生和传递密切相关。

酸敏感离子通道-3在急性肺损伤大鼠肺组织中的表达

目的探讨酸敏感离子通道-3（ASIC3）在急性肺损伤肺组织中的表达。方法24只雄性SD大鼠随机分为4组（每组6只）：脂多糖（LPS）刺激组（LPS 2h，LPS 4h，LPS 6h），分别为IPS刺激后2，4，6h；生理盐水对照组；LPS组静脉注射LPS复制大鼠急性肺损伤模型，对照组静脉注射同等剂量生理盐水，以肺部特征性病理改变作为ALI模型成功的主要指标。各组检测动脉血气，留取肺组织标本，观察肺湿／干质量比、肺组织病理，免疫组化检测肺组织ASIC3的表达。统计数据用均数±标准差表示，采用SPSS13．0统计软件行单因素方差分析、Dunnett-t检验和Kendall秩相关系数（Kendall’Stau_b）检测其相关性，以P〈0．05为差异具有统计学意义。结果LPS2h，4h，6h组大鼠的动脉血氧分压（PaO2）分别为（67．47±6．01）mmHg，（59．17±7．18）mmHg，（52．54±7．62）mmHg，比对照组（98．15±1．06）mmHg低，差异有统计学意义（P〈0．01）；pH值LPS4h（7．28±0．04），6h（7．24±0．03）组显著低于对照组（7．35±0．01）（P〈0．01）。光镜下见肺组织内的炎性细胞逐渐增多，肺泡隔增宽，肺间质水肿，肺结构破坏逐渐加重；LPS注射后4h，6h肺泡上皮细胞内ASIC3的表达分别是（205．91±10．12），（196．51±18．60），显著低于对照组（220．23±10．11）（P〈0．05）；肺的湿／干质量比6h组（5．18±0．21）亦明显高于对照组（4．45±0．18）（P〈0．05）。结论LPS诱导的大鼠急性肺损伤肺泡上皮细胞和支气管黏膜上皮有ASIC3表达。

电针对酸敏感离子通道3基因敲除小鼠心肌缺血后损伤的影响

目的:观察电针对小鼠心肌缺血后损伤的影响,探讨酸敏感离子通道3(ASIC3)在其中的作用。方法:选用C57BL/6与ASIC3基因敲除(ASIC3-/-)小鼠建立心肌缺血模型,检测针刺前后心电图。结果:针刺后,与造模后比较,两种小鼠电针组ST段和T波降低(P<0.01);与ASIC3-/-小鼠比较,C57BL/6小鼠ST段和T波降低更加明显。结论:电针内关穴可改善心肌缺血后损伤,机制之一可能是通过激活传入纤维末梢的ASIC3受体通道,抑制交感神经,治疗心肌缺血。

酸敏感钾离子通道-3基因多态性与高血压患者血浆三酰甘油的关系

目的探讨高血压患者酸敏感钾离子通道-3(TWIK-related acid-sensitive K^+ channel-3, TASK-3)基因rs2615374、rs3808403、rs888345位点单核苷酸多态性对血浆三酰甘油(triacylglycerol, TG)水平的影响。方法 287例高血压患者,血浆TG>1.7 mmol/L 136例为高TG组,TG≤1.7 mmol/L 151例为正常组。采用竞争性等位基因特异性PCR法测定TASK-3基因rs2615374、rs3808403、rs888345位点基因型分布及等位基因频率,多因素logistic回归分析TASK-3基因rs2615374位点多态性对血浆TG的影响。结果高TG组TASK-3基因rs2615374位点加性模型、隐性模型基因型分布及等位基因频率与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05),显性模型基因型分布与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05);rs3808403、rs888345位点加性模型、显性模型、隐性模型基因型分布及等位基因频率与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05);多因素logistic回归分析结果显示,TASK-3基因rs2615374位点AA基因型是血浆TG升高的危险因素(OR=2.47, 95%CI:1.02～6.00,P=0.046)。结论 TASK-3基因rs2615374位点单核苷酸多态性可能与高血压患者血浆TG水平有关,rs2615374位点AA基因型是血浆TG升高的危险因素。

APETx2对感染后肠易激综合征小鼠内脏敏感性的作用及机制

目的探讨酸敏感离子通道3特异性拮抗剂(APETx2)对感染后肠易激综合征(PI-IBS)小鼠内脏敏感性的调控作用及其机制。方法采用旋毛虫感染NIH小鼠建立PI-IBS模型。通过测量首次排黑便的时间和6 h内收集的粪便颗粒数评估胃肠道运输功能;腹壁回撤反射(AWR)评分评估小鼠内脏敏感性;免疫组织化学法检测结肠组织中降钙素基因相关肽(CGRP)蛋白表达;通过实时定量PCR(qRT-PCR)法检测结肠组织中脑源性神经营养因子(BDNF)、CGRP mRNA表达。蛋白质印迹法(Western blot)检测脑组织中酸敏感离子通道3(ASIC3)、CGRP、瞬时受体电位香草素1(TRPV1)蛋白表达。结果与对照组比较,PI-IBS组首次排黑便时间显著降低,6 h内的粪便颗粒数,AWR评分均显著升高,结肠组织中CGRP蛋白表达显著升高,BDNF、CGRP mRNA显著升高,脑组织中CGRP、ASIC3、TRPV1的蛋白表达显著升高;与PI-IBS组比较,APETx2组首次排黑便时间显著延长,6 h内的粪便颗粒数,AWR评分均显著降低,结肠组织中CGRP蛋白表达显著降低,BDNF、CGRP mRNA表达显著降低,脑组织中CGRP、ASIC3、TRPV1的蛋白表达显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论APETx2可通过下调BDNF、CGRP、ASIC3、TRPV1的表达,减轻PI-IBS小鼠的内脏敏感性并调节胃肠道运动。APETx2可能为治疗IBS提供一个新的治疗选择。