目的检测酸敏感离子通道3(ASIC3)在胃食管反流大鼠食管黏膜及背根神经节(DRG)中的表达变化,探讨其在胃食管反流病(GERD)发病中的作用。方法将Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为实验组(G组)和对照组(S组)。实验组采用限制幽门及结扎胃底方...目的检测酸敏感离子通道3(ASIC3)在胃食管反流大鼠食管黏膜及背根神经节(DRG)中的表达变化,探讨其在胃食管反流病(GERD)发病中的作用。方法将Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为实验组(G组)和对照组(S组)。实验组采用限制幽门及结扎胃底方法建立GERD大鼠模型。于造模后15 d处死两组大鼠,通过HE染色对大鼠食管黏膜进行组织病理学检测,通过蛋白质印迹法(Western blotting)和实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠食管黏膜及DRG中ASIC3蛋白及mRNA表达变化。结果HE染色显示G组大鼠食管黏膜慢性炎症改变,S组大鼠食管黏膜无异常;Western blotting显示G组大鼠DRG中ASIC3蛋白表达高于S组(6.75±0.74 vs 5.07±0.72)(P<0.05),食管黏膜中ASIC3蛋白表达高于S组(8.04±0.67 vs 7.31±0.740)(P<0.05);RT-PCR同样显示,G组大鼠DRG中ASIC3 mRNA表达高于S组(0.00030±0.00003 vs 0.00013±0.00002)(P<0.05),食管黏膜中ASIC3 mRNA表达高于S组(0.01073±0.00231 vs 0.00088±0.0007)(P<0.05)。结论 ASIC3在DRG及食管黏膜上表达上调可能是导致GERD食管内脏高敏感的原因之一。展开更多
目的探讨内皮祖细胞(EPCs)移植对百草枯(PQ)中毒所致的急性肺损伤(ALI)小鼠的作用机制。方法采用密度梯度离心联合贴壁培养法分离培养小鼠外周血EPC,为后期移植提供供体细胞。应用腹腔注射法建立百草枯所致的急性肺损伤(PQ-ALI)小鼠模型...目的探讨内皮祖细胞(EPCs)移植对百草枯(PQ)中毒所致的急性肺损伤(ALI)小鼠的作用机制。方法采用密度梯度离心联合贴壁培养法分离培养小鼠外周血EPC,为后期移植提供供体细胞。应用腹腔注射法建立百草枯所致的急性肺损伤(PQ-ALI)小鼠模型,建模成功后小鼠分为四组:正常对照组、模型组、PQ损伤组、EPCs治疗组(每组9只),移植后48 h处死小鼠并取肺组织,检测肺组织湿干质量(W/D)比值、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)含量及肺组织中酸敏感离子通道-l a(ASICla)的表达。结果①正常对照组与模型组比较小鼠肺W/D无明显变化(两者W/D比值分别为3.72、3.67),差异无统计学意义(P>0.05);PQ损伤组小鼠肺组织W/D比值为9.80,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);尾静脉E PC移植后(EPCs组)可以明显降低小鼠肺组织W/D比值,其值为4.91,与P Q损伤组比较差异有统计学意义(P<0.05)。②正常对照组及模型组中TNF-a分别为226 n g/L和204 n g/L,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);PQ损伤组小鼠肺组织中TNF-a为382 ng/L明显增高,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);EPCs治疗组小鼠肺组织TNF-a为276 n g/L呈下降趋势,与P Q损伤组比较差异有统计学意义(P<0.05)。③PQ损伤组和EPCs治疗组小鼠肺组织中ASICU的表达量分别为1.73和1.12,均较正常对照组ASICla的表达量(0.56)明显增多,差异有统计学意义(P<0.05);EPCs治疗组小鼠肺组织中ASICla的表达量低于PQ损伤组(P<0.05);模型组小鼠ASICla的表达量为0.54和治疗对照组小鼠肺组织中ASICla的表达量最少,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论PQ-ALI小鼠模型机制可能和ASICla激活有关,EPC移植可改善PQ中毒所致ALI小鼠状态,可能和下调ASIC1a的表达相关,但具体机制尚未清楚。展开更多
目的:观察强筋壮骨祛风合剂对髓核致炎大鼠背根神经节中3型酸敏感离子通道(acid-sensing ion channel 3,ASIC3)的影响。方法:选取40只清洁级成年雄性SD大鼠,随机分为空白组、假手术组、模型组、阿米洛利组和中药组,每组8只。除空白组外...目的:观察强筋壮骨祛风合剂对髓核致炎大鼠背根神经节中3型酸敏感离子通道(acid-sensing ion channel 3,ASIC3)的影响。方法:选取40只清洁级成年雄性SD大鼠,随机分为空白组、假手术组、模型组、阿米洛利组和中药组,每组8只。除空白组外,其余各组大鼠均手术暴露L5背根神经节。假手术组暴露L5背根神经节后直接缝合切口;模型组和中药组取出大鼠尾部的髓核组织置于暴露的L5背根神经节上,缝合切口;阿米洛利组将取自大鼠尾部的髓核组织置于暴露的L5背根神经节上,并在暴露的L5背根神经节周围滴入含0.1 mg盐酸的阿米洛利药液1 m L,缝合切口。自造模后第1天开始,中药组按5 m L·kg-1以强筋壮骨祛风合剂灌胃,每天2次,连续30 d;空白组、假手术组、模型组不进行药物干预。分别于造模前1 d及造模后3、5、9、15、23、29 d,采用Up-Down法测定大鼠左后足50%机械刺激缩足阈值(50%paw withdrawal threshold,50%PWT)。中药组药物干预结束后,处死所有大鼠,取出L5背根神经节分成2份,一份采用免疫组织化学法计算ASIC3阳性面积,另一份采用Western Blot技术检测ASIC3蛋白表达量。结果:造模后3 d内,模型组、阿米洛利组和中药组均有部分大鼠出现左后足外翻以及足趾背伸现象。造模前后不同时间50%PWT的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=50.132,P=0.000)。5组50%PWT总体上比较,组间差异有统计学意义,即存在分组效应(F=288.219,P=0.000)。除造模前1 d时外(F=0.332,P=0.854),造模后各时点5组大鼠50%PWT比较,组间差异均有统计学意义(F=288.015,P=0.000;F=308.588,P=0.000;F=374.945,P=0.000;F=560.713,P=0.000;F=343.043,P=0.000;F=459.914,P=0.000);造模后各时点模型组的50%PWT均低于空白组、假手术组、阿米洛利组和中药组(P=0.010,P=0.011,P=0.001,P=0.001;P=0.023,P=0.022,P=0.000,P=0.004;P=0.013,P=0.013,P=0.003,P=0.001;P=0.012,P=0.002,P=0.002,P=0.002;P=0.004,P=0.000,P=0.000,P=0.000;P=0.003,P=0.005,P=0.003,P=0.013);造模后各时点空白组和假手术组50%PWT比较,差异均无统计学意义(P=0.640,P=0.710,P=0.590,P=0.480,P=0.330,P=0.390);造模后各时点阿米洛利组50%PWT均高于中药组(P=0.021,P=0.011,P=0.013,P=0.002,P=0.001,P=0.005)。时间因素与分组因素存在交互效应(F=2.358,P=0.002)。5组大鼠背根神经节中ASIC3阳性面积和ASIC3蛋白表达量比较,组间差异均有统计学意义(F=205.890,P=0.030;F=101.740,P=0.001);空白组、假手术组、阿米洛利组和中药组背根神经节中ASIC3阳性面积和ASIC3蛋白表达量均小于模型组(P=0.004,P=0.003,P=0.001,P=0.007;P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000);阿米洛利组背根神经节中ASIC3阳性面积和ASIC3蛋白表达量均大于中药组(P=0.001;P=0.000)。结论:强筋壮骨祛风合剂可以降低髓核致炎大鼠病变的背根神经节中ASIC3的水平,提高大鼠的疼痛阈值,但其作用效果不及盐酸阿米洛利。展开更多
酸敏感离子通道3(acid-sensing ion channels 3,ASIC3)是对p H值改变最敏感的酸受体。在对ASIC3及其基因敲除小鼠(ASIC3-/-小鼠)的研究中发现,ASIC3参与痛觉、酸味觉、感受伤害性刺激、心肌缺血等多种生理和病理过程,并发挥重要作用。...酸敏感离子通道3(acid-sensing ion channels 3,ASIC3)是对p H值改变最敏感的酸受体。在对ASIC3及其基因敲除小鼠(ASIC3-/-小鼠)的研究中发现,ASIC3参与痛觉、酸味觉、感受伤害性刺激、心肌缺血等多种生理和病理过程,并发挥重要作用。这些成果为在分子水平研究针刺治疗疾病的机制提供条件和基础。展开更多
非糜烂性反流病(Non-erosive reflux disase,NERD)的发病机制目前尚不明确,可能与内脏高敏感相关。内脏高敏感的外周致敏和中枢致敏形成过程中,酸敏感离子通道(Acid-sensing ion channels,ASICs)均起到重要作用。其中酸敏感离子通道3(Ac...非糜烂性反流病(Non-erosive reflux disase,NERD)的发病机制目前尚不明确,可能与内脏高敏感相关。内脏高敏感的外周致敏和中枢致敏形成过程中,酸敏感离子通道(Acid-sensing ion channels,ASICs)均起到重要作用。其中酸敏感离子通道3(Acid-sensing ion channel 3,ASIC3)作为与NERD内脏高敏感性关联最强的ASICs,其可在酸性环境下活化,并受炎症介质等多种物质调控表达水平和空间结构。NERD患者酸暴露时多脑区激活,ASIC3在中枢致敏环节的研究对于内脏高敏感机制的完善是不可或缺的一部分。展开更多
酸敏感离子通道(acid—sensing ion channels,ASICs)是神经细胞的非电压门控阳离子通道,广泛分布于中枢及外周神经系统,参与痛觉、触觉、酸味觉的形成。在突触可塑性、学习记忆功能、炎症及瞌缺血等生理病理过程中发挥重要作用。AS...酸敏感离子通道(acid—sensing ion channels,ASICs)是神经细胞的非电压门控阳离子通道,广泛分布于中枢及外周神经系统,参与痛觉、触觉、酸味觉的形成。在突触可塑性、学习记忆功能、炎症及瞌缺血等生理病理过程中发挥重要作用。ASICs分别由5个亚基:ASIC1a、ASIC1b、ASIC2a、ASIC2b和ASIC3通过形成同聚体或异聚体构成。每个亚基都有2个跨膜区.1个大的富含半胱氨酸的胞外域和均位于胞内的N端与C端构成:ASICs属于NaC/DEG(epithelial Na’channel/degenerin)超家族。随着神经元的活动,或在许多病理状态下,细胞外pH会下降:当H+浓度上升时,ASICs被激活,其离子通道开放形成内向电流,导致细胞膜去极化而产生兴奋性效应。展开更多
文摘目的检测酸敏感离子通道3(ASIC3)在胃食管反流大鼠食管黏膜及背根神经节(DRG)中的表达变化,探讨其在胃食管反流病(GERD)发病中的作用。方法将Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为实验组(G组)和对照组(S组)。实验组采用限制幽门及结扎胃底方法建立GERD大鼠模型。于造模后15 d处死两组大鼠,通过HE染色对大鼠食管黏膜进行组织病理学检测,通过蛋白质印迹法(Western blotting)和实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠食管黏膜及DRG中ASIC3蛋白及mRNA表达变化。结果HE染色显示G组大鼠食管黏膜慢性炎症改变,S组大鼠食管黏膜无异常;Western blotting显示G组大鼠DRG中ASIC3蛋白表达高于S组(6.75±0.74 vs 5.07±0.72)(P<0.05),食管黏膜中ASIC3蛋白表达高于S组(8.04±0.67 vs 7.31±0.740)(P<0.05);RT-PCR同样显示,G组大鼠DRG中ASIC3 mRNA表达高于S组(0.00030±0.00003 vs 0.00013±0.00002)(P<0.05),食管黏膜中ASIC3 mRNA表达高于S组(0.01073±0.00231 vs 0.00088±0.0007)(P<0.05)。结论 ASIC3在DRG及食管黏膜上表达上调可能是导致GERD食管内脏高敏感的原因之一。
文摘目的探讨内皮祖细胞(EPCs)移植对百草枯(PQ)中毒所致的急性肺损伤(ALI)小鼠的作用机制。方法采用密度梯度离心联合贴壁培养法分离培养小鼠外周血EPC,为后期移植提供供体细胞。应用腹腔注射法建立百草枯所致的急性肺损伤(PQ-ALI)小鼠模型,建模成功后小鼠分为四组:正常对照组、模型组、PQ损伤组、EPCs治疗组(每组9只),移植后48 h处死小鼠并取肺组织,检测肺组织湿干质量(W/D)比值、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)含量及肺组织中酸敏感离子通道-l a(ASICla)的表达。结果①正常对照组与模型组比较小鼠肺W/D无明显变化(两者W/D比值分别为3.72、3.67),差异无统计学意义(P>0.05);PQ损伤组小鼠肺组织W/D比值为9.80,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);尾静脉E PC移植后(EPCs组)可以明显降低小鼠肺组织W/D比值,其值为4.91,与P Q损伤组比较差异有统计学意义(P<0.05)。②正常对照组及模型组中TNF-a分别为226 n g/L和204 n g/L,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);PQ损伤组小鼠肺组织中TNF-a为382 ng/L明显增高,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);EPCs治疗组小鼠肺组织TNF-a为276 n g/L呈下降趋势,与P Q损伤组比较差异有统计学意义(P<0.05)。③PQ损伤组和EPCs治疗组小鼠肺组织中ASICU的表达量分别为1.73和1.12,均较正常对照组ASICla的表达量(0.56)明显增多,差异有统计学意义(P<0.05);EPCs治疗组小鼠肺组织中ASICla的表达量低于PQ损伤组(P<0.05);模型组小鼠ASICla的表达量为0.54和治疗对照组小鼠肺组织中ASICla的表达量最少,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论PQ-ALI小鼠模型机制可能和ASICla激活有关,EPC移植可改善PQ中毒所致ALI小鼠状态,可能和下调ASIC1a的表达相关,但具体机制尚未清楚。
文摘酸敏感离子通道3(acid-sensing ion channels 3,ASIC3)是对p H值改变最敏感的酸受体。在对ASIC3及其基因敲除小鼠(ASIC3-/-小鼠)的研究中发现,ASIC3参与痛觉、酸味觉、感受伤害性刺激、心肌缺血等多种生理和病理过程,并发挥重要作用。这些成果为在分子水平研究针刺治疗疾病的机制提供条件和基础。
文摘非糜烂性反流病(Non-erosive reflux disase,NERD)的发病机制目前尚不明确,可能与内脏高敏感相关。内脏高敏感的外周致敏和中枢致敏形成过程中,酸敏感离子通道(Acid-sensing ion channels,ASICs)均起到重要作用。其中酸敏感离子通道3(Acid-sensing ion channel 3,ASIC3)作为与NERD内脏高敏感性关联最强的ASICs,其可在酸性环境下活化,并受炎症介质等多种物质调控表达水平和空间结构。NERD患者酸暴露时多脑区激活,ASIC3在中枢致敏环节的研究对于内脏高敏感机制的完善是不可或缺的一部分。
文摘酸敏感离子通道(acid—sensing ion channels,ASICs)是神经细胞的非电压门控阳离子通道,广泛分布于中枢及外周神经系统,参与痛觉、触觉、酸味觉的形成。在突触可塑性、学习记忆功能、炎症及瞌缺血等生理病理过程中发挥重要作用。ASICs分别由5个亚基:ASIC1a、ASIC1b、ASIC2a、ASIC2b和ASIC3通过形成同聚体或异聚体构成。每个亚基都有2个跨膜区.1个大的富含半胱氨酸的胞外域和均位于胞内的N端与C端构成:ASICs属于NaC/DEG(epithelial Na’channel/degenerin)超家族。随着神经元的活动,或在许多病理状态下,细胞外pH会下降:当H+浓度上升时,ASICs被激活,其离子通道开放形成内向电流,导致细胞膜去极化而产生兴奋性效应。