酸敏感钾离子通道-3基因多态性与高血压患者血浆三酰甘油的关系

目的探讨高血压患者酸敏感钾离子通道-3(TWIK-related acid-sensitive K^+ channel-3, TASK-3)基因rs2615374、rs3808403、rs888345位点单核苷酸多态性对血浆三酰甘油(triacylglycerol, TG)水平的影响。方法 287例高血压患者,血浆TG>1.7 mmol/L 136例为高TG组,TG≤1.7 mmol/L 151例为正常组。采用竞争性等位基因特异性PCR法测定TASK-3基因rs2615374、rs3808403、rs888345位点基因型分布及等位基因频率,多因素logistic回归分析TASK-3基因rs2615374位点多态性对血浆TG的影响。结果高TG组TASK-3基因rs2615374位点加性模型、隐性模型基因型分布及等位基因频率与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05),显性模型基因型分布与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05);rs3808403、rs888345位点加性模型、显性模型、隐性模型基因型分布及等位基因频率与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05);多因素logistic回归分析结果显示,TASK-3基因rs2615374位点AA基因型是血浆TG升高的危险因素(OR=2.47, 95%CI:1.02～6.00,P=0.046)。结论 TASK-3基因rs2615374位点单核苷酸多态性可能与高血压患者血浆TG水平有关,rs2615374位点AA基因型是血浆TG升高的危险因素。

酸敏感离子通道3对肠易激综合征大鼠内脏高敏感性的影响及其机制

目的探讨酸敏感离子通道3(ASIC3)对肠易激综合征(IBS)大鼠内脏敏感性的影响及可能的信号通路调节机制。方法孕龄鼠产后第2天开始,将分娩的6只幼鼠与母鼠继续在原笼中饲养,作为对照组,其余幼鼠采取母婴分离(NMS)法制作IBS模型。待NMS幼鼠生长至成年(8周龄),通过腹部回撤反射(AWR)评分筛选出16只造模成功的大鼠,将其随机分为NMS组(n=8)与NMS+APETx2组(n=8),NMS+APETx2组每日给予ASIC3特异性阻滞剂APETx2100μg/kg腹腔注射,NMS组及对照组腹腔注射等量生理盐水,持续1周。采用AWR评分评估内脏敏感性,墨汁染色法检测肠道传输速率以评估肠道动力,ELISA法检测结肠组织5-羟色胺(5-HT)水平,免疫组化法检测结肠组织5-HT4受体、ASIC3表达水平。结果与对照组比较,NMS组大鼠在结直肠压力为40、60、80 mmHg时的AWR评分明显增加,肠道传输速率降低,5-HT、ASIC3及5-HT4受体表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.01);而与对照组比较,NMS+APETx2组的AWR评分及肠道传输速率无明显变化(P>0.05),但结肠组织5-HT、ASIC3及5-HT4受体表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。与NMS组比较,NMS+APETx2组大鼠AWR评分降低,肠道传输速率增高,5-HT、ASIC3及5-HT4R受体表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论ASIC3参与了IBS大鼠内脏高敏感性的形成,可能与其促进大鼠体内5-HT通路活化有关。

酸敏感离子通道-1a在急性肺损伤大鼠肺组织中的表达及作用初探

目的 探讨酸敏感离子通道-1a(ASIC1a)在急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠肺组织中的表达及可能的作用。方法 SPF级♂SD大鼠32只,随机分为正常组、ALI组、阿米洛利组和阳性药物组。对动脉血进行血气分析,观察肺组织病理学,肺组织称重后计算湿干重比,ELISA检测血清中TNF-α的表达,qPCR和Western blot检测肺组织中ASIC1a的表达。结果 与正常组相比,模型组肺组织损伤明显;肺组织湿干重比明显升高;TNF-α的表达水平明显升高(P<0.01)。阿米洛利组及阳性药物组肺组织损伤明显减轻;肺组织湿干重比较模型组明显下降,TNF-α的表达水平明显降低(P<0.01)。免疫组化、qPCR和Western blot结果显示,与正常组相比,模型组ASIC1a的表达量明显升高(P<0.01),阿米洛利组与模型组相比,ASIC1a的表达量明显减少(P<0.01)。结论 在脂多糖诱导的ALI大鼠肺组织中ASIC1a的表达增加,其可能参与ALI的发生、发展。

酸敏感离子通道3在关节炎疼痛中的作用

疼痛相关的酸敏感离子通道3(Acid-sensingion channels 3,ASIC3)主要分布在周围神经系统,是对pH值改变最敏感的酸受体。最近,越来越多的研究证实,在脊髓背根神经节(DRG)丰富表达的ASIC3,与痛觉及伤害性感受密切相关,在慢性炎性疼痛的病理过程中发挥重要的作用。研究表明在炎性痛模型中可以上调脊髓背角ASIC3在转录和蛋白水平的表达;阻断或敲除ASIC3基因(ASIC3-/-)能明显抑制炎症性关节痛。上述各点提示,在生理或病理情况下,脊髓背角ASIC3对脊髓水平的感觉信息传递特别是痛觉的传导可能发挥着重要作用,这可能是关节炎疼痛的治疗靶点。本文将ASIC3的生物学特征以及它在关节炎疼痛和治疗中的作用作一综述。

酸敏感离子通道3在胃食管反流大鼠中的表达和意义

目的检测酸敏感离子通道3(ASIC3)在胃食管反流大鼠食管黏膜及背根神经节(DRG)中的表达变化,探讨其在胃食管反流病(GERD)发病中的作用。方法将Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为实验组(G组)和对照组(S组)。实验组采用限制幽门及结扎胃底方法建立GERD大鼠模型。于造模后15 d处死两组大鼠,通过HE染色对大鼠食管黏膜进行组织病理学检测,通过蛋白质印迹法(Western blotting)和实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠食管黏膜及DRG中ASIC3蛋白及mRNA表达变化。结果HE染色显示G组大鼠食管黏膜慢性炎症改变,S组大鼠食管黏膜无异常;Western blotting显示G组大鼠DRG中ASIC3蛋白表达高于S组(6.75±0.74 vs 5.07±0.72)(P<0.05),食管黏膜中ASIC3蛋白表达高于S组(8.04±0.67 vs 7.31±0.740)(P<0.05);RT-PCR同样显示,G组大鼠DRG中ASIC3 mRNA表达高于S组(0.00030±0.00003 vs 0.00013±0.00002)(P<0.05),食管黏膜中ASIC3 mRNA表达高于S组(0.01073±0.00231 vs 0.00088±0.0007)(P<0.05)。结论 ASIC3在DRG及食管黏膜上表达上调可能是导致GERD食管内脏高敏感的原因之一。

酸敏感离子通道1a阻断剂对大鼠全脑缺血-再灌注损伤的保护作用

目的探讨酸敏感离子通道（ASIC）1a的阻断剂对大鼠全脑缺血-再灌注损伤的保护作用。方法成年雄性SD大鼠72只，体重250～300g，随机均分为四组：假手术组（S组）、全脑缺血-再灌注组（IR组）、溶剂组（V组）和ASIC1a特异性阻断剂组（P组）。IR组、V组和P组参照四血管阻断法建立大鼠脑缺血-再灌注模型，缺血15rain后恢复灌注。V组和P组分别于再灌注即刻侧脑室注射6肛l双蒸水和狼蛛毒素（PcTX1）6μl（500ng／ml）。再灌注6h后处死大鼠取海马组织。每组取其中12只分别采用Western blotting法测定海马钙／钙调蛋白依赖型蛋白激酶II磷酸化水平（P-CaMKⅡ）和RT-PCR法检测脑源性神经营养因子（BDNF）及其受体酪氨酸激酶B（TrKB）mRNA的水平。其余6只于再灌注24h后，采用HE染色法观察海马神经元形态学变化。结果与S组比较，其他三组海马P-CaMKⅡ、BDNF mRNA和TrKB mRNA的表达明显上调（P〈0.05）；与IR组比较，P组P-CaMKⅡ表达明显下调、BDNFmRNA及TrKB mRNA的表达明显上调（P〈0.05）。IR组和V组海马CA1区锥体细胞稀疏；P组海马CA1区组织破坏和细胞损伤程度减轻，细胞层次基本恢复。结论ASIC1a的阻断剂减轻大鼠全脑缺血一再灌注损伤，其机制可能与P-CaMKⅡ表达下调、BDNF及TrKB mRNA的表达上调有关。

补肾方骨青颗粒对佐剂性关节炎大鼠的干预和影响软骨表达酸敏感离子通道3的实验研究

目的:观察补肾方骨青颗粒对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠的干预作用及对软骨酸敏感离子通道3(acid-sensitive ion channel 3,ASIC3)表达的影响。方法:将大鼠随机分成空白对照组、AA模型组、阳性对照药组(阿司匹林50mg/kg)、骨青颗粒治疗剂量组(8.4 g生药/kg)、骨青颗粒高剂量组(16.8 g生药/kg)。除空白对照组外其余各组大鼠左后足趾皮内注射完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)诱导AA,致炎后第10天起各组灌胃给予相应药物,连续给药10 d。记录大鼠体重足趾容积和关节炎评分,实验结束后,光学显微镜观察大鼠踝关节病理变化,用RT-PCR和Western blot分析大鼠膝关节软骨细胞中ASIC3 mRNA及蛋白表达。结果:经治疗后,骨青颗粒能明显抑制AA大鼠踝关节的肿胀,显著降低AA大鼠关节软骨细胞ASIC3 mRNA及蛋白的表达,效果与阳性对照药物阿司匹林无显著性差异。结论:骨青颗粒可减轻佐剂性关节炎大鼠的关节炎症,保护关节软骨,并能下调软骨ASIC3的表达。

内皮祖细胞移植对百草枯中毒致急性肺损伤小鼠酸敏感离子通道-1a的影响

目的探讨内皮祖细胞(EPCs)移植对百草枯(PQ)中毒所致的急性肺损伤(ALI)小鼠的作用机制。方法采用密度梯度离心联合贴壁培养法分离培养小鼠外周血EPC,为后期移植提供供体细胞。应用腹腔注射法建立百草枯所致的急性肺损伤(PQ-ALI)小鼠模型,建模成功后小鼠分为四组:正常对照组、模型组、PQ损伤组、EPCs治疗组(每组9只),移植后48 h处死小鼠并取肺组织,检测肺组织湿干质量(W/D)比值、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)含量及肺组织中酸敏感离子通道-l a(ASICla)的表达。结果①正常对照组与模型组比较小鼠肺W/D无明显变化(两者W/D比值分别为3.72、3.67),差异无统计学意义(P>0.05);PQ损伤组小鼠肺组织W/D比值为9.80,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);尾静脉E PC移植后(EPCs组)可以明显降低小鼠肺组织W/D比值,其值为4.91,与P Q损伤组比较差异有统计学意义(P<0.05)。②正常对照组及模型组中TNF-a分别为226 n g/L和204 n g/L,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);PQ损伤组小鼠肺组织中TNF-a为382 ng/L明显增高,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);EPCs治疗组小鼠肺组织TNF-a为276 n g/L呈下降趋势,与P Q损伤组比较差异有统计学意义(P<0.05)。③PQ损伤组和EPCs治疗组小鼠肺组织中ASICU的表达量分别为1.73和1.12,均较正常对照组ASICla的表达量(0.56)明显增多,差异有统计学意义(P<0.05);EPCs治疗组小鼠肺组织中ASICla的表达量低于PQ损伤组(P<0.05);模型组小鼠ASICla的表达量为0.54和治疗对照组小鼠肺组织中ASICla的表达量最少,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论PQ-ALI小鼠模型机制可能和ASICla激活有关,EPC移植可改善PQ中毒所致ALI小鼠状态,可能和下调ASIC1a的表达相关,但具体机制尚未清楚。

强筋壮骨祛风合剂对髓核致炎大鼠背根神经节中3型酸敏感离子通道的影响

目的:观察强筋壮骨祛风合剂对髓核致炎大鼠背根神经节中3型酸敏感离子通道(acid-sensing ion channel 3,ASIC3)的影响。方法:选取40只清洁级成年雄性SD大鼠,随机分为空白组、假手术组、模型组、阿米洛利组和中药组,每组8只。除空白组外,其余各组大鼠均手术暴露L5背根神经节。假手术组暴露L5背根神经节后直接缝合切口;模型组和中药组取出大鼠尾部的髓核组织置于暴露的L5背根神经节上,缝合切口;阿米洛利组将取自大鼠尾部的髓核组织置于暴露的L5背根神经节上,并在暴露的L5背根神经节周围滴入含0.1 mg盐酸的阿米洛利药液1 m L,缝合切口。自造模后第1天开始,中药组按5 m L·kg-1以强筋壮骨祛风合剂灌胃,每天2次,连续30 d;空白组、假手术组、模型组不进行药物干预。分别于造模前1 d及造模后3、5、9、15、23、29 d,采用Up-Down法测定大鼠左后足50%机械刺激缩足阈值(50%paw withdrawal threshold,50%PWT)。中药组药物干预结束后,处死所有大鼠,取出L5背根神经节分成2份,一份采用免疫组织化学法计算ASIC3阳性面积,另一份采用Western Blot技术检测ASIC3蛋白表达量。结果:造模后3 d内,模型组、阿米洛利组和中药组均有部分大鼠出现左后足外翻以及足趾背伸现象。造模前后不同时间50%PWT的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=50.132,P=0.000)。5组50%PWT总体上比较,组间差异有统计学意义,即存在分组效应(F=288.219,P=0.000)。除造模前1 d时外(F=0.332,P=0.854),造模后各时点5组大鼠50%PWT比较,组间差异均有统计学意义(F=288.015,P=0.000;F=308.588,P=0.000;F=374.945,P=0.000;F=560.713,P=0.000;F=343.043,P=0.000;F=459.914,P=0.000);造模后各时点模型组的50%PWT均低于空白组、假手术组、阿米洛利组和中药组(P=0.010,P=0.011,P=0.001,P=0.001;P=0.023,P=0.022,P=0.000,P=0.004;P=0.013,P=0.013,P=0.003,P=0.001;P=0.012,P=0.002,P=0.002,P=0.002;P=0.004,P=0.000,P=0.000,P=0.000;P=0.003,P=0.005,P=0.003,P=0.013);造模后各时点空白组和假手术组50%PWT比较,差异均无统计学意义(P=0.640,P=0.710,P=0.590,P=0.480,P=0.330,P=0.390);造模后各时点阿米洛利组50%PWT均高于中药组(P=0.021,P=0.011,P=0.013,P=0.002,P=0.001,P=0.005)。时间因素与分组因素存在交互效应(F=2.358,P=0.002)。5组大鼠背根神经节中ASIC3阳性面积和ASIC3蛋白表达量比较,组间差异均有统计学意义(F=205.890,P=0.030;F=101.740,P=0.001);空白组、假手术组、阿米洛利组和中药组背根神经节中ASIC3阳性面积和ASIC3蛋白表达量均小于模型组(P=0.004,P=0.003,P=0.001,P=0.007;P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000);阿米洛利组背根神经节中ASIC3阳性面积和ASIC3蛋白表达量均大于中药组(P=0.001;P=0.000)。结论:强筋壮骨祛风合剂可以降低髓核致炎大鼠病变的背根神经节中ASIC3的水平,提高大鼠的疼痛阈值,但其作用效果不及盐酸阿米洛利。

大鼠食道扩张内脏痛模型的建立及酸敏感离子通道3的功能变化及意义

目的:通过建立大鼠食道扩张(Esophageal distensions,ED)内脏痛动物模型并研究其脊髓背根神经元(DRG)中酸敏感性离子通道3(ASIC3)的表达及功能的改变,探讨ASIC3参与ED内脏痛模型中DRG神经元高敏感性发生的可能机制。方法:50只SD大鼠随机分成2组:ED动物模型组30只,对照组20只;免疫荧光检测DRG神经元ASIC3的表达,膜片钳分析技术记录ED刺激后DRG神经元兴奋性改变及ASIC3电流变化,并与对照组比较。结果:免疫荧光检测发现,ASIC3在DRG细胞中表达定位于细胞膜及细胞质;在给予大鼠1h的重复ED刺激之后,相应节段的DRG神经元受到去极化刺激时产生的动作电位数量明显增多,且ED大鼠ASIC3通道离子电流也明显增加。结论:食道球囊扩张可成功建立食道内脏痛动物模型,DRG神经元中ASIC3表达与功能的改变可能是导致GERD食管内脏高敏感发生的原因之一。

TWIK相关酸敏感钾离子通道在呼吸与睡眠调节中的研究进展

TWIK相关酸敏感钾离子通道(TASK)-1和TASK-3是双孔钾离子通道家族的重要成员,广泛表达于中枢神经系统和外周组织,对缺氧和细胞外液p H值变化极为敏感。TASK参与呼吸中枢的表达及呼吸运动的调节,同时在睡眠调节中也可发挥一定作用,本文总结了TASK在呼吸与睡眠调节中的相关研究进展。

背根神经节内代谢型谷氨酸受体2与酸敏感性离子通道3和辣椒素受体1的共存研究(英文)

代谢型谷氨酸受体(mGluR)2/3在伤害性信息从外周向脊髓传递的过程中发挥着重要作用。以往研究证明在大鼠中mGluR2参与了机械性超敏和热超敏的形成,因此本研究拟采用免疫荧光组织化学染色技术揭示背根节(DRG)中mGluR2和酸敏感性离子通道3(ASIC3),一个多觉机械性感受器,或者和热伤害性感受器辣椒素受体(TRPV1)的共存情况。结果显示:mGluR2主要存在于DRG神经元的胞浆中。计数结果显示DRG中35.85%的神经元呈mGluR2免疫阳性。在这些阳性神经元中,82.61%为小细胞(直径小于30μm);5.79%为中等细胞(直径为30～50μm);11.59%为大细胞(直径大于50μm)。进一步在免疫荧光双重标记切片上可观察到分别有42.45%和79.78%的小型mGluR2阳性神经元同时表达ASIC3或TRPV1免疫阳性。以上结果提示mGluR2主要存在于DRG中的小神经元中,这些神经元通常被认为是外周Aδ-或C-纤维传入的伤害性感觉神经元,在这类神经元中mGluR2与ASIC3或TRPV1均有大量共存,提示这些共存可能与机械性或热超敏的产生或者维持有着重要的联系。

APETx2对应激性胃黏膜损伤大鼠脊髓背根神经节酸敏感离子通道3表达的影响

目的:观察酸敏感离子通道3(ASIC3)特异性拮抗剂APETx2对应激性胃黏膜损伤大鼠脊髓背根神经节(DRG)神经元上ASIC3表达的影响。方法:24只雄性Wistar大鼠随机等分为对照组(NC组)、应激模型组(WIRS组)及APETx2处理组(AT组,腹腔内注射APETx2 25μg/kg)。采用浸水束缚应激(WIRS)法复制应激性胃黏膜损伤模型,于应激6 h后留取标本测定胃液p H值;HE染色观察胃组织病理学改变;免疫组化和实时定量PCR法测定DRG神经元上ASIC3蛋白及m RNA表达。结果:与NC组比较,WIRS组胃p H值明显降低(P<0.05),胃黏膜损伤程度严重,DRG神经元上ASIC3表达明显上调(P<0.05);与WIRS组比较,AT组胃液p H值明显升高(P<0.05),胃黏膜损伤程度减轻,DRG神经元上ASIC3表达明显减少(P<0.05)。结论 :浸水束缚应激所致胃黏膜损伤大鼠DRG神经元上ASIC3被激活,与胃液p H下降、胃黏膜损伤严重程度密切相关,APETx2可特异性拮抗ASIC3表达,对应激性胃黏膜损伤可能起保护作用。

酸敏感离子通道3及其基因敲除小鼠特性的研究进展

酸敏感离子通道3(acid-sensing ion channels 3,ASIC3)是对p H值改变最敏感的酸受体。在对ASIC3及其基因敲除小鼠(ASIC3-/-小鼠)的研究中发现,ASIC3参与痛觉、酸味觉、感受伤害性刺激、心肌缺血等多种生理和病理过程,并发挥重要作用。这些成果为在分子水平研究针刺治疗疾病的机制提供条件和基础。

酸敏感离子通道3参与NERD内脏高敏感机制的研究进展

非糜烂性反流病(Non-erosive reflux disase,NERD)的发病机制目前尚不明确,可能与内脏高敏感相关。内脏高敏感的外周致敏和中枢致敏形成过程中,酸敏感离子通道(Acid-sensing ion channels,ASICs)均起到重要作用。其中酸敏感离子通道3(Acid-sensing ion channel 3,ASIC3)作为与NERD内脏高敏感性关联最强的ASICs,其可在酸性环境下活化,并受炎症介质等多种物质调控表达水平和空间结构。NERD患者酸暴露时多脑区激活,ASIC3在中枢致敏环节的研究对于内脏高敏感机制的完善是不可或缺的一部分。

酸敏感离子通道1a在酸诱导的大鼠关节软骨细胞自噬的作用及其机制研究

目的研究酸敏感离子通道1a(acid-sensing ion chan-nel 1a)在体外培养的酸诱导的大鼠关节软骨细胞自噬的作用及其可能机制。方法Ⅱ型胶原酶消化法分离大鼠关节软骨细胞,鉴定后传代培养,观察在不同pH条件下诱导的细胞自噬情况以确定胞外酸化条件;将软骨细胞分为pH7.4环境下培养的正常组、pH 6.0的酸化组、以及经ASIC1a非特异性阻断剂Amiloride和特异性阻断剂PcTX1处理的酸化组,RT-PCR法检测细胞自噬基因Beclin-1 mRNA的表达,Western blot法检测自噬蛋白LC3及ERK1/2、p38MAPK磷酸化蛋白的表达,透射电子显微镜法(TEM)观察自噬小体数量的变化;通过使用ERK1/2、p38MAPK磷酸化抑制剂(PD98059、SB203580),采用RT-PCR和Western blot法观察ERK1/2及p38MAPK对酸诱导的软骨细胞自噬的影响。结果 pH 5.5和pH 6.0胞外酸化刺激均能明显升高软骨细胞自噬水平(P<0.01);与pH 7.4组比较,酸化组软骨细胞Beclin-1 mRNA及LC3、磷酸化的ERK1/2和p38MAPK蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),且自噬小体数量增多,ASIC1a阻断剂组自噬水平及ERK1/2、p38磷酸化蛋白表达水平较酸化组明显降低(P<0.01),且自噬体数量减少;与pH 6.0组相比,ERK1/2磷酸化抑制剂处理后,Beclin-1 mR-NA和LC3蛋白的表达均下调(P<0.05,P<0.01),而p38磷酸化抑制剂组自噬水平则无明显变化。结论胞外酸化环境下能诱发软骨细胞自噬,阻断ASIC1a能明显减弱酸化诱导的软骨细胞自噬,其机制可能与抑制ERK1/2磷酸化有关。

3型酸敏感离子通道在髓核致炎大鼠背根神经节中的表达研究

目的通过观察3型酸敏感离子通道(ASIC3)信号通路阻断剂阿米洛利对髓核致炎大鼠背根神经节(DRG)中ASIC3表达的影响,探索ASIC3在髓核组织诱导发生根性疼痛过程中的可能机制。方法 48只大鼠采用随机数字表法分为对照组、模型组和阿米洛利组3组,每组16只。对照组在暴露L5DRG后直接缝合。模型组取出大鼠尾部的髓核组织置于暴露的L5DRG上,缝合切口。阿米洛利组在模型组的基础上,于术后2周内每天腹腔内注射20μg/kg阿米洛利。对照组和模型组不进行药物干预。造模成功后分别于术后2、4、6、8、10、12d检测大鼠后足的机械刺激缩足阈值(PWT)。采用RT-PCR法和Western blot法测定ASIC3、TNF-α和IL-6 m RNA和蛋白表达水平。术后1、3、7和14d采用ELISA法检测外周血及DRG上清液中的TNF-α和IL-6水平,并检测一氧化氮(NO)水平。结果与对照组比较,术后12d时模型组大鼠后足的PWT显著下降(P<0.01),术后14d模型组大鼠DRG中ASIC3的m RNA和蛋白水平上调(均P<0.01),外周血和DRG中NO、TNF-α、IL-6水平均上调(均P<0.01)。与模型组比较,阿米洛利组大鼠后足的PWT在8d内下降,之后逐渐增加,术后10和12d大鼠后足的PWT明显高于模型组(均P<0.01),术后14d DRG中ASIC3的m RNA和蛋白水平下降(均P<0.05),外周血和DRG中NO、TNF-α、IL-6水平均显著降低(均P<0.01)。结论ASIC3可能在由髓核突出引起的神经根性疼痛中起重要作用。ASIC3可能通过上调NO及细胞炎性因子(TNF-α和IL-6)的表达并增强这些介质的疼痛加强作用,诱导痛觉过敏从而引起神经根性疼痛。

ATP敏感性钾通道、酪氨酸激酶和NF-κB参与高铁血红素诱导的大鼠心肌保护作用

通过诱导血红素氧化酶1(Hemeoxygenase1,HO1)可增强大鼠对抗心肌缺血复灌损伤。本文探讨线粒体ATP敏感性钾通道(MitochondrialATPsensitivepotassiumchannel,mitoKATP)、酪氨酸激酶(Proteintyrosinekinases,PTK)和核因子κB(NuclearfactorkappaB,NFκB)是否参与其中。SD大鼠腹腔注射HO1的诱导剂高铁血红素(hemin)50mg/kg,24h后取离体心脏给予30min缺血和120min复灌。结果发现,hemin可改善缺血-复灌(Ischemiareperfusion,IS)心脏的收缩功能,缩小心肌梗死面积;而HO1的抑制剂ZnPP可抑制hemin引起的HO1活性增加,并抵消hemin诱导的心肌保护作用。在腹腔注射hemin前给予mitoKATP通道阻断剂5HD(5mg/kg),与hemin+IS组相比,心脏的收缩功能明显下降,心肌梗死面积增大,LDH和CK释放增加。而在hemin预处理后24h,30min缺血前给予5HD灌流(100μmol/L)同样可阻断hemin诱导的心肌保护作用。hemin诱导的心肌保护作用亦可被PTK抑制剂genistein(10μmol/L)或NFκB抑制剂PDTC(100μmol/L)所取消。结果提示:hemin可诱导心肌HO1增加,保护心肌缺血-复灌性损伤,其作用可能与PTK和NFκB的激活有关,而mitoKATP通道在hemin诱导的心肌保护作用中可能扮演了启动因子和终末效应器双重角色。

三磷酸腺苷敏感性钾通道开放剂对大鼠脑缺血再灌注后神经元凋亡及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-8表达的影响

目的 研究三磷酸腺苷敏感性钾通道(KATP)开放剂对大鼠脑缺血再灌注后神经元凋亡和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase)-8 表达的影响.方法 200只Wistar雄性大鼠随机分为假手术组、对照组、KATP开放剂预处理组(开放剂组)及KATP开放剂+阻断剂预处理组(阻断剂组).应用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,应用原位末端标记法(TUNEL)、免疫组化染色、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测脑缺血再灌注后各组脑组织凋亡细胞数和caspase-8 mRNA及蛋白的表达.结果 (1)缺血再灌注12 h、24 h、48 h、72 h各时间点凋亡细胞数,开放剂组较对照组和阻断剂组显著减少(P＜0.05～0.01),阻断剂组与对照组间各时间点差异无统计学意义.(2)缺血再灌注12 h、24 h、48 h、72 h各时间点caspase-8蛋白表达,开放剂组显著低于对照组和阻断剂组(P＜0.05～0.01),阻断剂组与对照组间各时间点差异无统计学意义.(3)缺血再灌注各时间点caspase-8 mRNA表达,开放剂组均显著低于对照组和阻断剂组(均P＜0.01), 阻断剂组与对照组各时间点相比差异无统计学意义.结论 KATP开放剂能显著减少脑缺血再灌注后神经元凋亡和caspase-8 mRNA及蛋白的表达;KATP开放剂可能通过抑制死亡受体通路发挥脑保护作用.

酸敏感离子通道对大电导钙激活钾通道的抑制及其相互作用

酸敏感离子通道（acid—sensing ion channels，ASICs）是神经细胞的非电压门控阳离子通道，广泛分布于中枢及外周神经系统，参与痛觉、触觉、酸味觉的形成。在突触可塑性、学习记忆功能、炎症及瞌缺血等生理病理过程中发挥重要作用。ASICs分别由5个亚基：ASIC1a、ASIC1b、ASIC2a、ASIC2b和ASIC3通过形成同聚体或异聚体构成。每个亚基都有2个跨膜区．1个大的富含半胱氨酸的胞外域和均位于胞内的N端与C端构成：ASICs属于NaC／DEG（epithelial Na’channel/degenerin）超家族。随着神经元的活动，或在许多病理状态下，细胞外pH会下降：当H＋浓度上升时，ASICs被激活，其离子通道开放形成内向电流，导致细胞膜去极化而产生兴奋性效应。