酸水解—索氏分析系统测定乳制品中总脂肪研究应用

目的：建立一种用FOSS的酸水解-索氏总脂肪分析系统对液体乳制品中总脂肪的测定方法。方法：样品经soxcap杯式酸水解仪用盐酸水解处理，然后经soxtee^TM2050索氏提取仪用石油醚／乙醇混合溶剂提取脂肪，直接提取出来的脂肪获得结果。结果：此方法相对标准差（RSD）为1．1％～3．2％。样品的重复性好，SD为0、037-0．096。结论：此方法特别适合于罗兹法等首选方法很难胜任的含有其它类型油脂的花色奶的总脂肪的测定，特别适合大批量的分析液体奶、奶粉及其制品。

盐酸水解系统-索氏提取仪测定食品中总脂肪的研究

目的:采用酸水解系统-索氏提取仪(仪器法)测定食品中的总脂肪含量,并与国家标准方法对比。方法:样品包裹在滤袋中,并置于酸水解系统,加入盐酸按照程序设定进行酸水解,烘干后进行索氏提取,干燥称重获得结果。结果:经优化实验条件后,仪器法测定食品总脂肪的重复性相对标准偏差(n=6)为0.57%~3.86%,经配对样本t检验,仪器法与国家标准方法测定结果无显著性差异t=1.221,P=0.253(P>0.05),测定结果基本一致。结论:应用酸水解系统-索氏提取仪检测食品中总脂肪的自动化程度高,操作简便,工作效率高,方法的准确度和精确度高,安全性高,值得推广应用。

酸水解法测定食品中脂肪含量与索氏抽提法的比较

本文采用酸水解法和索氏抽提法同时测定了豆乳粉，乳粉等样品中脂肪含量，对两法测定结果进行比较发现：酸水解法具有提出脂肪率高，快速，不受特殊器材限制等优点，可适用于各类食品的脂肪测定，而且是豆乳粉，乳粉等喷雾加工制品脂肪测定的首选方法。

肠内营养添加二十碳五烯酸、γ-亚麻酸和抗氧化剂对脓毒症患者预后影响的系统评价

目的评价实施肠内营养时加入二十碳五烯酸(EPA)、γ-亚麻酸(GLA)和抗氧化剂对脓毒症的治疗效果。方法系统检索Cochrane图书馆、PubMed、EMbase、CBM、CNKI和VIP数据库,检索时间截至2012年4月。收集肠内营养添加EPA、GLA和抗氧化剂对脓毒症患者预后影响的临床随机对照试验,采用Cochrane协作网系统评价法评价纳入文献的质量,结果采用Revman 5.0软件进行统计分析。结果最终纳入3项研究,共350例患者进行分析,其中试验饮食组173例,对照饮食组177例。与对照饮食相比,加入EPA、GLA和抗氧化剂的试验饮食能缩短脓毒症患者的住ICU时间(MD=6.21,95%CI:4.61～8.19;P<0.00001)和住院时间(P<0.0001),降低新发器官功能衰竭的几率,无明显不良反应,但不能降低脓毒症患者的28 d死亡率(RR=0.83,95%CI:0.60～1.16,P=0.27),对机械通气时间的影响存有争议。结论肠内营养添加EPA、GLA和抗氧化剂安全性好,有利于脓毒症患者的转归。

血清3,5,3’-三碘甲腺原氨酸酶联免疫分析试剂盒的研制

以辣根过氧化物酶标记链亲合素（SA）,T3抗体包被微孔,T3生物素化,四甲基联苯胺（TMB）为底物,建立了3,5,3’-三碘甲腺原氨酸（T3）生物素-亲合素酶联免疫分析（T3-BA-EL1SA）方法。结果显示,本方法分析灵敏度为0.2μg/L,批内、批间变异系数分别为7.1%－8.3%和6.5%－10.5%,回收率为98.1%－107.2%;高浓度T3血清样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为0.995 7。本试剂盒操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。

快速色氨酸耗竭试验对SSRIs药物治疗后抑郁症患者的心境和睡眠脑电图影响的系统评价和Meta分析

目的通过系统评价和Meta分析方法对比不同研究中快速色氨酸耗竭(TD)试验对经选择性5-羟色胺(5-HT)再摄取抑制剂(SSRIs)药物治疗后抑郁症患者的心境和睡眠脑电图的影响,以研究TD试验在该类抑郁症患者中作用的有效性。方法计算机检索PubMed、Cochrane图书馆、Web of Science、Embase、CBM、CNKI等相关国内外数据库,全面搜集将TD试验用于经SSRIs药物治疗后抑郁症患者研究的所有临床随机对照研究(RCT),按照Jadad标准对纳入文献进行质量分析,并使用RevMan4.2软件进行Meta分析,对不能合并的数据结果进行系统评价。结果最终纳入2篇高质量RCT研究,Jadad评分均在3分以上。系统评价结果显示,TD组研究对象体内色氨酸浓度明显降低,达到了色氨酸耗竭的标准。Meta分析结果显示,TD组患者在汉密尔顿焦虑量表-19(HRSA-19)评分[WMD 1.37、95%CI(0.76,1.99)、P<0.001]、心境量表(POMS)中的迷惑评分[WMD1.179、5%CI(0.44,1.91)、P=0.002]、睡眠相关分析中的TST值[WMD 127、95%CI(1.5,23.9)、P=0.03]、SL值[WMD-8.11、95%CI(-12.24,-3.98)、P=0.01]、RD值[WMD 0.17、95%CI(0.04,0.31)、P=0.01]以及S1值[WMD 2.52、95%CI(-0.02,5.07)、P=0.05]与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论本研究结果证明TD试验能够诱导经SSRIs药物治疗后的抑郁症患者出现抑郁情绪及迷惑情绪,同时能影响该类患者的睡眠周期相关参数,包括缩短快动眼潜时、增加快动眼期比例、增加快动眼期内动眼频率等。而对于其他检测指标,目前尚没有足够的证据能够证明其组间差异性。受纳入研究质量限制,上述结果还有待开展更多高质量的临床RCT试验来进一步证实。

ε-多聚赖氨酸产生菌的筛选及16SrDNA测序鉴定

利用ε-多聚赖氨酸(ε-PL)与亚甲基蓝在静电排斥的作用下能够形成透明圈的性质,初步筛选出10株产ε-PL的菌。然后摇瓶发酵复筛,根据发酵上清液与DR(dragendorff)试剂反应和纸层析两者均成阳性反应,以及参照Itzhaki方法计算发酵产物中ε-PL产量,从而筛选出编号为4#、8#、Y#的三株产量较高的菌株,其ε-PL产量分别达到0.757、0.751、0.808g/L。再采用基于16S rDNA序列分析和系统发育分析的方法,对4#、8#、Y#三株菌进行分子生物学鉴定,最终确定4#可能是Delftia acidovorans,8#可能是Stenotrophomonas maltophilias,Y#可能是Streptomyces griseolus。

基于完全酸水解组成糖特征的几种法定基源麻黄多糖鉴别研究

草麻黄多糖具有重要的免疫抑制作用,因此对几种法定基源麻黄属多糖进行鉴别是一项重要的工作。本研究采用PMP柱前衍生超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)技术分析草麻黄、中麻黄、木贼麻黄和麻黄根多糖的完全酸水解单糖组成,考察其组成糖种类和含量变化,运用主成分分析多元统计分析方法,对源自草麻黄、中麻黄、木贼麻黄和麻黄根的二十批几种法定基源麻黄多糖实现了区分和辨别。甘露糖(1)、氨基葡萄糖(2)、半乳糖醛酸(8)和葡萄糖(9)在区分草麻黄多糖与麻黄根、中麻黄和木贼麻黄等三种麻黄多糖中起到了重要作用,半乳糖(10)在区分木贼麻黄多糖与草麻黄、中麻黄和麻黄根等三种麻黄多糖中起到了重要作用。PMP柱前衍生UPLC-MS/MS技术结合多元统计学分析方法,通过完全酸水解组成糖种类和含量的变化规律进行草麻黄、中麻黄、木贼麻黄和麻黄根多糖鉴别研究,该方法稳定可行,且重现性好,可为麻黄属多糖的质量评价提供有力参考。

嗜酸硫杆菌属硫氧化系统研究进展

硫化矿的酸溶解和化学氧化过程中(H+和Fe3+作用下,金属硫化矿中分解),伴随着硫元素转变成多聚硫S8或硫代硫酸盐的过程。对嗜酸硫杆菌属硫氧化过程的研究表明,胞外环状多聚硫S8可能通过细胞外膜蛋白巯基活化成线状-SnH后,被转运到细胞周质区域,进而被硫加双氧酶氧化成SO32-,活化过程中同时生成少量H2S;这些酶促反应不需要辅助因子参与,不释放电子。胞外硫代硫酸盐通过未知途径进入细胞周质。细胞周质中的SO32-主要经由亚硫酸-受体氧化还原酶氧化成SO42-,S2O32-可能经由硫代硫酸盐-辅酶Q氧化还原酶、硫代硫酸盐脱氢酶、连四硫酸盐水解酶等氧化为硫酸,少量H2S则经由硫化物-辅酶Q氧化还原酶氧化为多聚硫,后者再经由SO32-和S2O32-氧化生成最后产物SO42-。这些生物氧化过程释放的电子进入呼吸链参与产生细菌生长代谢所需的能量。然而,关于A.ferrooxidans硫氧化系统中各种硫化合物的酶催化氧化机制的研究仍很缺乏,胞内外硫化合物的转运机制、是否存在胞外酶催化氧化等仍然有待解决。另外,硫的型态和价态、酶催化反应的细胞微区域以及硫氧化系统中一些关键酶的分离及其表达基因的鉴定等问题都还有待进一步研究。基于对这些事实的分析,提出了一个嗜酸硫杆菌属硫氧化系统的模型。

元素分析-碳同位素比值质谱法在酿造酱油掺假鉴别中的应用

为了加强对酱油的品质监管,采用元素分析-同位素比值质谱法(EA-IRMS)对国内酱油掺假情况进行了研究。基于来自国内各地区、各种类的86个纯正酿造酱油的碳同位素比值(δ13 C值)数据库,提出了纯正酿造酱油中氨基酸δ13 C值应不大于-21.50‰。依据这个判定准则,对58个日常样本进行检测,发现其中15个酿造酱油样品被掺入了酸水解蛋白调味液。实验结果表明,采用元素分析-碳同位素比值质谱法能够评估酱油的品质,可以作为酿造酱油品质保障和掺假鉴定的有效手段。

转基因高γ-亚麻酸大豆油抗肿瘤作用的研究

γ-亚麻酸(GLA)是人体和动物饮食中具有营养作用的重要的多烯不饱和脂肪酸,在大多数油料作物种子中不含有GLA,而含有其前体物亚油酸。△6-脂肪酸脱氢酶可将亚油酸转化为γ-亚麻酸,为了能够在传统的油料作物大豆中产生GLA,将从深黄被孢霉中克隆的△6-脂肪酸脱氢酶基因,与植物表达载体pBIl21连接,构建了重组质粒pBIM16,采用农杆菌介导的大豆子叶节转化系统,成功地将该基因导入到栽培大豆吉林47品种中,获得一批转基因植株。经PCR检测和Southern杂交分析,证明外源基因已导入并整合到大豆的基因组中。通过气相色谱(GC)对大豆种子进行脂肪酸成分分析,结果表明,产生了GLA,其含量最高可达36.585%。将高GLA的转基因大豆油口服给药,结果表明,其对小鼠S180肉瘤、肝癌H22和Ehrlich癌实体型的抑瘤率分别为32.63%、31.91%和34.34%。其肿瘤抑制率均>30%,与对照组比较有显著差异(p<0.01),表现初步的抗肿瘤作用。

酸水解法快速测定肉和肉制品中脂肪

建立酸水解法快速测定富含结合态脂肪的肉及肉制品中脂肪含量的方法。样品与盐酸一同在75℃水浴中加热进行水解,结合或包藏在组织里的脂肪可游离出来,然后用乙醚和石油醚提取3次,除去溶剂即得样品中总脂肪含量。该方法测定结果同食品安全国家标准GB5009.6—2016规定方法相比无显著差异,测定结果的相对标准偏差为0.38%(n=20),测定时间由食品安全国家标准GB5009.6—2016方法的13h缩短至4h,且不需要专门的索氏抽提仪器。该方法适用于肉及肉制品中脂肪的批量测定。

酸水解—索氏分析系统测定月饼中总脂肪的方法探讨

目的建立一种采用酸水解—索氏分析系统测定食品中总脂肪的方法。方法选取6种不同种类月饼样品,在3种不同的提取条件下,按照说明书的操作步骤进行测定,然后将3种条件下的实验结果与国标法结果进行比较。结果在105℃/石油醚的提取条件下,仪器法结果与国标法结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论该仪器法操作简便,省时省力,消耗有机溶剂少,安全环保,在食品中脂肪的检测上具有一定的实用意义。

甘蔗中蛋白质及氨基酸含量的测定方法及相关性研究

采用凯氏定氮法测定甘蔗中蛋白质含量,同时采用酸水解-全自动氨基酸分析仪法测定了甘蔗中氨基酸含量。研究发现:甘蔗中含有丰富的氨基酸,氨基酸的含量基本在0.1%~0.6%之间,且各氨基酸所占比例基本相近;甘蔗中蛋白质与氨基酸含量呈一定相关性,蛋白质基本是氨基酸含量的1.3~1.7倍。

槲皮素对急性心肌缺血大鼠心肌caspase-3基因蛋白表达的影响

为观察槲皮素对急性心肌缺血大鼠心肌细胞半胱氨酸蛋白酶 3 (caspase 3 )基因蛋白表达的影响 ,采用大鼠急性心肌缺血模型 ,应用免疫组织化学PAP法检测caspase 3基因蛋白的表达 ,并用图像分析系统进行定量分析。发现 :大鼠急性心肌缺血后心肌细胞caspase 3基因蛋白表达明显增强 ,槲皮素预保护可降低caspase 3基因蛋白的表达。提示 :槲皮素对急性心肌缺血损伤有保护作用 ,这种保护作用可能是通过抑制心肌细胞caspase 3基因蛋白的表达实现的。

大林姬鼠中汉坦病毒的分离及其S片段的序列分析

目的分析吉林省大林姬鼠携带的汉坦病毒(HV)在进化过程中的系统发生关系。方法采用病毒分离技术、逆转录聚合酶链反应(RT PCR)、克隆以及测序技术对中国大林姬鼠携带的HV进行研究。结果从4只大林姬鼠HV抗原阳性的肺组织标本中分离到2株HV(CJI89和CJI93),对其中CJI93病毒株的S片段进行克隆、测序以及分析,基因分型结果为汉滩型(HTN)汉坦病毒。根据S片段的核苷酸序列同源性分析,CJI93与Aa2499核苷酸序列的同源性最高(94.3%),而与Ap61、Ap63的同源性最小(83.3%,82.9%)。由全S片段构建的HTN型汉坦病毒的系统发生树表明CJI93与Aa2499等俄罗斯黑线姬鼠携带的HV的亲缘关系最近,其次为中国的HTN型病毒,然后才是Ap61、Ap63等俄罗斯大林姬鼠携带的HV。结论从我国吉林省大林姬鼠分离到的CJI93株是HTN型汉坦病毒的新亚型。

^(153)Sm-EDTMP-纳米羟基磷灰石的生物学性能

目的 研究1 53Sm 乙二胺四甲撑膦酸(EDTMP) 纳米羟基磷灰石(HA)的体内外生物学性能。方法 采用溶胶凝胶法合成纳米HA并用电镜和X线衍射进行鉴定,采用独立变数法研究1 53Sm EDTMP 纳米HA的最佳标记条件并对产物进行体外稳定性分析,进行1 53Sm EDTMP 纳米HA新西兰兔显像,比较纳米HA、1 53Sm EDTMP和1 53Sm EDTMP 纳米HA对肝癌SMMC 772 1和乳腺癌MCF 7细胞的体外抑制作用。结果 ①纳米HA为针状结晶,结晶度较好,径向10～30nm ,轴向70～10 0nm ,X线衍射证明产物为HA。②1 53Sm EDTMP 纳米HA的标记率均在95 %以上。体外稳定性好,在生理盐水中放置4 8h后放化纯仍大于95 %。③正常新西兰兔1 53Sm EDTMP 纳米HA显像对比度较好,骨骼系统显示清晰,肾脏显影,血清中放射性下降较快。④1 53Sm EDTMP 纳米HA对肝癌SMMC 772 1和乳腺癌MCF 7细胞的半抑制率质量浓度分别为1 98mg L和0 0 75mg L ,而纳米HA分别为3 31mg L和0 5 2mg L ,1 53Sm EDTMP分别为4 32mg L和0 6 7mg L ,1 53Sm EDTMP 纳米HA对肿瘤生长的抑制率明显高于纳米HA和1 53Sm EDTMP。结论 1 53Sm EDTMP 纳米HA的骨组织摄取好。

基于响应面分析法的微波-过氧化氢-碱预处理污泥水解酸化优化研究

为进一步优化微波-过氧化氢-碱(MW-H2O2-OH)预处理污泥的水解酸化操作参数,在前期单因素试验研究的基础上,采用3因素3水平的响应面分析法,建立了水解温度、水解酸化时间和蛋白酶投加量分别对总VFA浓度和SCOD浓度影响的回归模型,并进行了碳源组成及其可利用性的评估.结果表明,模型极显著,拟合度、可信度和精确度高,数据合理,试验误差小.通过对回归模型的求解及综合考虑,得到优化的工艺条件为水解温度53.13℃、水解酸化时间4 d、蛋白酶投加量30.14 mg·g-1(蛋白酶/总固体浓度(TS),下同).验证结果表明,总VFA浓度和SCOD浓度的相对误差均在3%以内,说明该模型能很好地优化微波-过氧化氢-碱预处理后污泥的水解酸化操作条件和预测总VFA浓度和SCOD浓度.在碳源组成方面,优化工艺条件下SCOD占TCOD(混合液总COD)的44.56%,总VFA、溶解性蛋白质、溶解性糖类分别占SCOD的66.42%、19.34%和6.89%,碳源以总VFA为主,其中,VFA以乙酸(35.11%)、异戊酸(20.14%)、正丁酸(19.94%)、丙酸(16.90%)为主.三维荧光光谱的分析结果表明,污泥上清液中以溶解性微生物产物类酪氨酸和类色氨酸为主.优化组的污泥上清液作为碳源时的反硝化速率(0.184g·g-1·d-1,以每g VSS每天反硝化的NO-3-N量(g)计,下同)远远高于未优化组(0.065 g·g-1·d-1),碳源可利用性介于甲醇和乙酸钠之间,碳源可利用性较好.

标记（放射）免疫分析的临床意义及其进展

下丘脑-垂体-甲状腺轴已经建立了较为系统的标记免疫分析(LIA)，现已能测定的物质为一碘酪氨酸(T1)，二碘酪氨酸(T2)，三碘甲状腺原氨酸(T3)，甲状腺素(T4)，甲状旁腺激素(PTH)，