光产酸源的新进展

本人已对UV产酸物质、UV产酸过程及UV固化作过综述。在UV产酸固化过程中,光产酸物质(光产酸源)事实上是作为一种酸引发剂,去引发一些物质发生开环聚合、加成聚合或交联反应的。它是一个由小分子变为大分子或由线型高分子变为体型硕大分子的过程。

不同酸源对微生物植酸酶降解饲料中植酸磷的体外研究

通过模拟生长猪消化道环境,以玉米、豆粕和菜粕为植酸磷的载体,考察了不同酸源对微生物植酸酶体外释放植酸磷的影响。结果显示,在体外近似体内条件下(37℃、2.5h、pH值3～6),酸梅粉和植酸酶(500U/kg)联用释放不同饲料中的植酸磷比例最大,其次是柠檬酸,盐酸最低。

科学与混乱:评估比较蛋氨酸源的试验设计

评估饲料原料效价的比较试验是营养师和采购商们作决定的关键。但是 ,只有当人们采用科学合理的方法操作 ,并使用正确的统计模型分析 ,这些试验才能提供有价值的信息。本文回顾近期发表的比较蛋氨酸源的研究论文 ,即 :d ,l -蛋氨酸与蛋氨酸羟基类似物效价比较的田间试验。显然 ,在非等价水平的基础上比较蛋氨酸源 ,没有采用公认的统计学方法分析试验结果 ,这种试验的讨论都是无效的 ,没有意义的。

化学增幅抗蚀剂用光产酸源

对化学增幅抗蚀剂体系的组成及化学增幅作用做了阐述。介绍了化学增幅作用中的关键组分———光产酸源和酸增殖剂的发展概况 ,并对重氮盐、盐、有机多卤化物、磺酸酯类化合物等产酸源的产酸机理、适用光源分别进行了阐述。从目前国际发展的趋势来看 ,硫盐和磺酸酯类的光产酸源占据主要地位 ,有机多卤化物中的三嗪化合物还有少量应用。

神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂在自发性脑出血患者中的表达与作用

目的 探讨自发性脑出血患者神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂(NSP)的表达与其预后的关系。方法 选取发病24 h之内的自发性脑出血住院患者65例,用双抗体夹心酶联免疫分析法测定其入院次日血清NSP水平,收集患者的基线资料,所有患者随访至起病后3个月,并通过改良Rankin量表(mRS)评估神经功能恢复情况,将mRS≥2分者作为预后不良组(n=25),mRS<2分为预后良好组(n=37)。同时选择50例健康体检者为对照组。结果 脑出血组入院时NSP浓度较健康对照组明显升高(P<0.001)。对预后不同两组分析,入院时NIHSS评分、发病时收缩压水平、发病时有无意识障碍、脑出血量、入院时NSP浓度均存在统计学差异(P<0.05),预后良好组入院时NSP浓度高于预后不良组。对两组差异有统计学意义的指标进行Logistic回归分析显示,入院时NIHSS评分、脑出血量是影响自发性脑出血患者预后的独立因素,NSP浓度暂未得统计学意义,可能与样本量较小有一定关系。结论 自发性脑出血患者发病时NSP水平升高,对其预后可能有一定保护作用。

奥氮平介导环磷酸腺苷反应元件结合蛋白/脑源性神经营养因子/酪氨酸蛋白激酶受体B通路对精神分裂模型大鼠的神经修复作用

目的 探讨奥氮平通过对环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)/脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶受体B(TrkB)通路的影响对精神分裂模型大鼠的神经修复作用。方法 将60只大鼠纳入对照组、模型组、奥氮平低、中、高剂量组,各组均10只。模型组、奥氮平低、中、高剂量组大鼠进行MK-801腹腔注射0.2 mg/(kg·d),对照组注射等量生理盐水。模型建立成功24 h后,奥氮平低、中、高剂量组分别以0.5、1.0、1.5 mg/(kg·d)奥氮平溶液灌胃,对照组、模型组同剂量生理盐水灌胃。按照共济失调和刻板行为标准对大鼠行为学进行评分;Morris水迷宫实验评定大鼠认知功能及学习能力;ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平;观察海马组织病理学变化;检测海马区细胞凋亡及CREB/BDNF/TrkB通路相关蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠共济失调、刻板行为评分、TNF-α、IL-6表达、细胞凋亡率极显著增加(P<0.01),奥氮平低、中剂量组显著增加(P<0.05)。与对照组比较,模型组大鼠跨越平台次数、目标象限停留时间、CREB、磷酸化CREB(p-CREB)、磷酸化TrkB(p-TrkB)、TrkB、BDNF蛋白相对表达极显著减少(P<0.01),奥氮平低、中剂量组显著减少(P<0.05)。与模型组比较,奥氮平低、中剂量组跨越平台次数、目标象限停留时间显著增加(P<0.05),奥氮平高剂量组极显著增加(P<0.01)。模型组以及奥氮平低剂量组中海马细胞肿大明显、细胞核破碎分裂、固缩,组织排列杂乱;奥氮平中、高剂量组大鼠海马细胞中少见破碎分裂以及核固缩现象,整体组织与对照组大鼠相似。结论 奥氮平对精神分裂症模型大鼠的神经修复作用机制涉及到改善大鼠认知功能受损、保护大鼠海马神经细胞以及激活CREB/BDNF/TrkB信号通路的表达。

酸增殖源及其在化学增幅抗蚀剂体系中的应用

介绍了酸增殖机理、酸增殖源的种类、典型化合物在化学增幅抗蚀剂体系中的应用及对灵敏度的提高 。

神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂在大鼠小胶质细胞缺氧／复氧模型上的作用

目的探讨神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂(neuroserpin,NSP)是否可以改变组织型纤溶酶原激活物(tissueplasminogen activator,tPA)对于小胶质细胞(microglia,MG)活化的影响。方法体外原代培养的大鼠皮层MG并鉴定。建立缺氧-复氧模型并鉴定。首先,使用ELISA试剂盒测定MG在缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)状态下自身释放tPA的含量,细胞被分为正常组、PBS对照组和OGD3h复氧不同时间组(1、3、5、7、24 h)。其次,研究NSP在MG缺氧/复氧时的作用,本部分实验分3组,分别为缺氧/复氧干预组、tPA干预组及tPA+NSP干预组。以上各组均设3个复孔,实验重复3次。采用倒置相差显微镜直接观察盖玻片上细胞形态学变化,CCK-8法检测各组间细胞增殖率,ELISA试剂盒测定IL-1β和NO含量。结果 MG在H/R时合成tPA,OGD3h复氧3h时释放量最多。H/R时MG激活,炎性因子IL-1β和NO的释放增多。tPA干预MG后,细胞活化并增殖、IL-1β和NO的释放增多。各NSP预处理组细胞活化、增殖和炎性因子的释放增多均没有tPA或H/R干预组明显。结论 MG在H/R时合成tPA。H/R早期即诱发了MG的活化。tPA可以进一步诱发MG的增殖和活化。H/R和tPA的干预均引起IL-1β和NO的释放。NSP可减轻H/R和tPA干预引起的MG活化和增殖,减少MG中IL-1β和NO的释放。

脾源性酪氨酸激酶Syk的抗肿瘤作用

目的探讨脾源性酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase,Syk)的体内外抗肿瘤作用。方法经脂质体介导将全长Syk cDNA转入Syk阴性表达的高侵袭性人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,应用MTT法、Transwell小室法分别检测Syk cDNA体外抗肿瘤细胞增殖及侵袭迁移作用;采用BABL/c(nu/nu)裸鼠皮下移植瘤模型,检测转染及未转染肿瘤细胞的成瘤及肺转移情况。结果转染全长Syk cDNA的MDA-MB-231细胞与转染空载体及未转染MDA-MB-231细胞相比,体外增殖情况未见明显改变,而侵袭及迁移实验中的穿膜细胞数(总迁移细胞数/5HPF)却均明显减少(P<0.05);同样,接种不同肿瘤细胞的裸鼠皮下移植瘤成瘤情况未见明显差异,但接种转染组肿瘤细胞的肺转移率却显著低于未转染组及空载体转染组(P<0.05)。结论Syk通过改变乳腺肿瘤细胞的侵袭迁移能力参与其抗瘤作用。

神经源性丝氨酸蛋白酶抑制物SNP位点rs6797312多态性与进展性缺血性脑卒中相关性研究

目的分析上海崇明地区汉族人群中神经源性丝氨酸蛋白酶抑制物(NSP)基因单核苷酸(SNP)多态性位点rs6797312与进展性缺血性脑卒中相关性。方法以106例2013年4月至2015年1月期间因缺血性脑卒中在我院住院的汉族患者(进展组)和102例同期间在我院经健康体检排除脑卒中的汉族体检者(对照组)为研究对象。入院时采集所有人员性别、年龄、吸烟史和既往病史(包括高血压史、糖尿病史、心绞痛史)等资料。采用Taqman-MGB探针技术检测NSP基因SNP位点rs6797312的多态性,对所有人员进行DNA提取并进行SNP基因型分型。结果进展组与对照组受检者在年龄[(58±8.8)岁vs(57±8.5)岁]和性别比[进展组男女比例(65:41)vs(56:46)]方面比较差异均无统计学意义(P>0.05),而在吸烟史[37.74%(40/106)vs 20.59%(21/102)]、高血压史[48.11%(51/106)vs 28.43%(29/102)]、糖尿病史[21.70%(23/106)vs 4.90%(5/102)]、心绞痛史[14.15%(15/106)vs 43.92%(4/102)]等方面比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。进展组和对照组受检者均出现AA、TT、AT三种基因型[进展组分别为6例(5.7%)、42例(39.6%)、58例(54.7),对照组分别为4例(3.9%)、37例(36.3%)、61例(59.8%)]和A、T两种等位基因[进展组为54例(25.5%)和160例(74.5%),对照组为46例(22.5%)和158例(77.5%)],两组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论上海崇明汉族人群中NSP基因SNP多态性位点rs6797312和进展性缺血性脑卒中不具有相关性。

脾源性酪氨酸激酶基因启动子甲基化与髓母细胞瘤细胞侵袭转移的关系

目的:探讨甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-aza-CdR)抑制脾源性酪氨酸激酶(Syk)基因启动子的甲基化后对髓母细胞瘤Daoy细胞侵袭转移能力的影响。方法:用甲基化转移酶抑制剂5-aza-CdR处理体外培养的髓母细胞瘤Daoy细胞,通过甲基化特异性PCR(MSP)、Real time-PCR、Western blot及Transwell实验方法分别检测不同浓度5-aza-CdR处理后髓母细胞瘤Daoy细胞中脾源性酪氨酸激酶(Syk)基因启动子区甲基化、mRNA表达、蛋白表达及细胞穿膜数的变化。结果:髓母细胞瘤Daoy细胞中Syk基因启动子存在过甲基化,与对照组比较,经不同浓度5-aza-CdR处理后,其Syk基因启动子区甲基化受到不同程度抑制,Syk mRNA的表达量最高上调(3.40±0.24)倍(P<0.01);Syk蛋白的表达量最高上调(3.23±0.19)倍(P<0.01);细胞侵袭及转移能力降低(P<0.05),差异有统计学意义。结论:髓母细胞瘤Daoy细胞中Syk基因启动子甲基化导致其表达下调,可能是髓母细胞瘤发生转移的机制之一;而甲基化转移酶抑制剂5-aza-CdR可抑制其启动子区的甲基化,使Syk的表达水平上调,抑制肿瘤细胞侵袭及转移能力。

急性脑梗死神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂的变化与炎性标志物之间的关系

目的探讨急性脑梗死神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂的变化与炎性标志物之间的关系。方法选择104例发病72 h之内的急性脑梗死住院患者作为研究对象,分别测定其入院时及发病10 d后的神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂(neuroserpin,NSP)含量及肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)、细胞间黏附因子1(ICAM-1)的水平,同时选择30例同期住院的非急性脑梗死住院患者为对照组。结果急性脑梗死组入院时NSP及各炎性标志物的浓度较对照组均升高,差异有统计学意义(P﹤0.05)。发病10 d后的NSP浓度明显下降,与入院时相比差异有统计学意义(P﹤0.05);其下降值与10 d后的IL-6(r=-0.2952,P=0.0022)、IL-1β(r=-0.2354,P=0.0162)、ICAM-1(r-0.2455,P=0.0120)呈负相关。结论急性脑梗死神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂的变化与炎性标志物之间具有相关性。

神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂对大鼠小胶质细胞丝裂原活化蛋白激酶和核转录因子-κB信号通路的作用

目的观察小胶质细胞(MG)在缺氧、缺糖(OGD)模型或组织型纤溶酶原激活剂(tPA)干预下被激活的主要信号通路,探讨神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂(NSP)抑制MG进而产生神经保护作用的可能机制。方法体外原代培养大鼠皮层MG并鉴定,建立OGD模型。将MG随机分为正常组、tPA组(经终浓度为0.05μg/μL的tPA干预24h)、OGD 3h组(经OGD模型干预3h)、NSP+tPA组(经终浓度为0.025μg/μL的NSP预处理0.5h后,再以终浓度为0.05μg/μL的tPA干预24h)和NSP+OGD 3h组(经终浓度为0.025μg/μL的NSP预处理0.5h后,再经OGD模型干预3h)。采用免疫荧光双标染色法检测各干预组丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路磷酸化蛋白的表达情况和核转录因子(NF)-κB的核移位情况。采用免疫印迹法检测各组MAPK通路磷酸化蛋白表达量的变化。结果 MG纯度鉴定结果显示纯度>95%,OGD模型建立成功。免疫组织化学法检测结果显示,MAPK途径的磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)1/2、磷酸化p38(pp38)在正常组MG均有少量表达,且在tPA组和OGD 3h组的表达均显著升高;MAPK途径的磷酸化c-Jun氨基末端激酶(pJNK)在正常组MG有表达,但在tPA组和OGD 3h组的表达无明显变化。Western免疫印迹法检测结果显示,干预组(tPA组和OGD 3h组)pERK1/2、pp38和pJNK的表达量均较正常组显著升高(P值均<0.05)。NSP预处理组(NSP+tPA组和NSP+OGD 3h组)pERK1/2、pp38和pJNK的表达量均较干预组显著降低(P值均<0.05)。免疫荧光双标染色法检测结果显示,正常组MG中可见NF-κB(P65)蛋白主要表达于细胞质,细胞胞突显示清晰。tPA组和OGD 3h组MG中NF-κB发生明显的核移位现象,主要表达于细胞核,且细胞缺少胞突。NSP+tPA组和NSP+OGD 3h组MG中NF-κB的核移位现象明显减轻。结论大鼠肉瘤(Ras)/细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun-氨基末端激酶(JNK)/应激活化蛋白激酶(SAPK)和p38通路对于MG在tPA和OGD干预下的激活均起作用,其中ERK1/2和p38发挥更重要的作用。tPA和OGD干预MG后,NF-κB发生明显的核移位,此通路被激活,经NSP预处理后,各条信号通路均被不同程度抑制。

晚期非小细胞肺癌患者手术标本人源核苷酸平衡转运体1蛋白表达与吉西他滨化疗敏感度的相关性分析

目的 评价非细小细胞肺癌（NSCLC）患者术后人源核苷酸平衡转运体1（hENT1）蛋白表达水平与吉西他滨化疗敏感度的相关性。方法筛选2007—2011年浙江金华广福医院肿瘤内科收治的经病理确诊为NSCLC并行手术切除后患者47例，完全随机分为GP组和NP组，GP组23例选用吉西他滨联合顺铂化疗，顺铂80 mg/m^2，第 1-3 天静脉滴注，吉西他滨 800-1 250 mg/m^2，第1、8天使用；NP组24例选用长春瑞滨联合顺铂化疗，顺铂用法同前，长春瑞滨 25 mg/m^2，第1、8天使用。对47例患者手术切除肺癌组织蜡块标本采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶连结法检测hENT1蛋白表达水平。术后实施2周期以上吉西他滨或长春瑞滨化疗，随访患者的生存期，评价hENT1蛋白表达水平与2种化疗方案疗效相关性。结果GP组hENT1高表达患者13例，无进展生存期为（28±18）个月，中位无进展生存期32个月；NP组hENT1高表达患者14例，无进展生存期为（24±16）个月，中位无进展生存期22个月，差异均有统计学意义（P=0.042，P=0.037）。GP组hENT1低表达患者（10例）中位总生存期35个月,NP组hENT1低表达患者（10例）中位总生存期34个月比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论对于NSCLC患者， hENT1蛋白表达程度与吉西他滨的化疗敏感性相关。

补阳还五汤联合针刺对急性脑梗死脑灌注、血同型半胱氨酸和内脏脂肪组织源性丝氨酸蛋白酶抑制剂水平的影响

目的探讨补阳还五汤联合针刺对急性脑梗死脑灌注、血同型半胱氨酸(Hcy)和内脏脂肪组织源性丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)水平的影响。方法选择2019年10月至2020年7月泰安市中医二院收治的急性脑梗死患者80例进行前瞻性研究,按照随机数字表法分为两组,每组各40例。对照组实施针刺治疗,观察组则联合应用补阳还五汤,比较干预期间患者语言表达能力,两组治疗后脑灌注指标变化,干预前后两组外周血Hcy水平变化,干预前后两组Vaspin水平变化。结果干预1周后和干预1个月后,观察组语言表达能力得分高于对照组(P<0.05),观察组脑血容量比值(rCBV)及脑血流量比值(rCBF)均显著高于对照组(P<0.05),平均达峰时间比值(rTTP)比值显著低于对照组(P<0.05),干预后观察组Hcy水平低于对照组(P<0.05),干预后观察组Vaspin水平高于对照组(P<0.05)。结论针对急性脑梗死联合使用补阳还五汤,能有效的改善患者发病后语言功能恢复,改善脑灌注,降低Hcy,提高Vaspin水平。