酸解离HBsAg免疫复合物法对检测乙肝血清标志物的意义

乙型肝炎是危害人类健康的一种常见传染病.随着研究的深入,人们对HBV感染人体后出现的血清学标志物及其演变规律有了较明确的认识,并建立起相应的血清学标志物模式[1].但是,我们在工作中也偶然发现与常见模式不符的结果[2].对此我们参见林晨氏报道的酸解HBsAg免疫复合物法对这些样本进行了分析[3],现报告如下.

滋阴解毒化瘀法治疗系统性红斑狼疮的研究进展

系统性红斑狼疮（SLE）是一种以免疫系统的高度异常为特征．以自身抗体的产生和免疫复合物的沉积为特点的慢性炎症疾病。此病与中医古籍中所记载的“蝴蝶丹”、“日晒疮”、“鬼脸疮”、“温毒发斑”、“蝴蝶斑”等病症相近似。1997年出版的《中医临床诊疗术语》将SLE统一命名为“蝶疮流注”。关于本病的病机目前大多数学者认为多为先天禀赋不足，

小儿解表口服液体外抗流感病毒作用的研究

目的:研究小儿解表口服液对感染H1N1的A549细胞的疗效及可能的药效机制。方法:通过不同浓度的小儿解表口服液对A549细胞的毒性实验及抗病毒实验,并采用MTT法结合CPE法得出药物的半数细胞毒性浓度(TC_(50))、半数细胞抑制浓度(IC_(50))及治疗指数(TI)。应用间接免疫荧光法检测小儿解表口服液作用于感染H1N1的A549细胞神经氨酸酶的变化。利用酶联免疫吸附试验检测小儿解表口服液对A549病毒模型干扰素-α(IFN-α)、IFN-β表达的影响。结果:小儿解表口服液TC_(50)=2.31 g/L,IC_(50)=0.49 g/L,TI=4.71。与模型组比较,小儿解表口服液组在24 h、48 h、72 h均减少流感病毒神经氨酸酶的表达。在24 h、48 h、72 h3个时间点中,与模型组比较,小儿解表口服液组均减少A549 IFN-α、IFN-β的释放,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:小儿解表口服液对感染H1N1的A549有疗效,并且其降低IFN-α、IFN-β的表达,可能是产生疗效的作用机制。

夹心ABC-ELISA检测包虫病人体内循环抗原方法的评价

本文评价了夹心 ABC-ELISA 对包虫病人体内循环抗原(HcAg)的检测方法。实验证实,用半饱和硫酸铵盐析的羊源细粒棘球蚴囊液(EgCF)免疫兔产生的抗血清测 HcAg 基木无非特异性反应。用生物素标记抗血清时,其抗体滴度不降,而使夹心 ABC-ELISA 比常规夹心 ELISA 更为优越。在对50例囊型包虫病人体内 HcAg 检测时发现,用酸解血清中循环免疫复合物比末解血清的 HcAg 检出率高一倍(分别为32%、16％)。酸解组及未解组分别检测的 HcAg 为结合型及游离型,二组综合检出率达40％。在对25例猪囊虫病人检测 HcAg 时全为阴性,说明两种蠕虫病间在测抗体时的严重交叉反应在测循环抗原时可完全排除。

酸解桥式酶联免疫吸附分析法对食蟹猴血清中治疗性单克隆抗体奥法木单抗的免疫原性研究

目的以抗CD20全人单克隆抗体(Arzerra^(TM))为载体,建立并验证酸解桥式酶联免疫吸附分析法(Bridging ELISA),研究食蟹猴血清中该药物的抗药抗体(anti-drug antibodies,ADAs),了解该药物在猴体内的免疫原性。方法预先包被Arzerra^(TM)的酶标板,先后加入生物素标记的Arzerra^(TM)和酸解待测样品,包被药物(Arzerra^(TM))和生物素标记药物(Biotin-Arzerra^(TM))与样品中ADAs形成"药物-ADAs-生物素标记药物"桥接复合物并显色。结果验证方法灵敏度为7.4 ng·mL^(-1),阳性对照批内、批间精密度不大于17.6%,筛选阈值(sereening cut point,SCP)为1.23,确证实验阈值(confirmatory cut point,CCP)为42.8%;同时,方法具有20倍药物耐受性[Drug-ADAs(40.0μg·mL^(-1);2.0μg·mL^(-1))]及3.2~100 000.0 ng·mL^(-1)内无钩状效应等特性。利用该桥式酶联免疫吸附分析法测定食蟹猴血清中抗药抗体(抗Arzerra^(TM)抗体),于给药后21 d检测到ADAs的产生。结论针对治疗性单克隆抗体的ADAs检测,Bridging ELISA法具有较高的灵敏度及较好的耐药性等特征,故不失为该类药物ADA检测的理想方法之一。

循环间歇性低氧对大鼠肾上腺β淀粉样前体蛋白裂解酶1表达的影响

目的观察β淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)在大鼠肾上腺的表达和定位,检测循环间歇性低氧(CIH)对BACE1表达的影响。方法采用Western blotting和免疫组织化学法检测BACE1在大鼠肾上腺的表达及定位;16只雄性SD大鼠随机分为2组,常氧对照组(control组)和CIH模型组,每组8只。模型制作2周,Western blotting检测各组大鼠肾上腺髓质BACE1和酪氨酸羟化酶(TH)蛋白的表达量。结果BACE1主要定位于大鼠肾上腺髓质神经纤维;与control组相比,CIH组大鼠肾上腺髓质BACE1蛋白水平下降,TH蛋白水平升高(P<0.05)。结论BACE1定位于大鼠肾上腺髓质神经纤维;BACE1水平下调可能参与减缓CIH引起的交感神经活性过度增强。

基于质谱的银屑病免疫复合物鉴定技术的建立

目的建立基于质谱的血清免疫复合物(IC)鉴定技术,研究机体自身免疫病的发生机制。方法以银屑病为模式,采用自身配对设计,用protein A/G beads与血清及组织裂解液混合物进行孵育,免疫沉淀抗原抗体复合物,并用质谱鉴定。结果对实验中关键参数进行了摸索和优化,建立了鉴定IC的方法。利用建立的方法测定48份银屑病患者的混合血清样本,鉴定出360个IC自身抗原,为过去鉴定的8倍。结论建立了银屑病血清IC鉴定技术,为今后开展银屑病的分子机制和临床诊治研究提供了依据。

乙型肝炎患者外周血IL-18水平与肝功能指标的相关性分析及其意义

目的 探讨乙型肝炎患者外周血白细胞介素-18(IL-18)水平与肝功能的相关性及其临床意义。方法 根据微粒子酶免疫法(MEIA)检测乙型肝炎病毒(HBV)感染血清学标志的结果分为:A组,HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性;B组,HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性;对照组,单独HBsAb阳性。用酶联免疫吸附试验(ELISA)测血清IL-18水平,常规方法测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBil)、γ- 谷氨酰转移酶(GGT)浓度。结果 乙型肝炎患者IL-18水平明显高于对照组(P<0. 01),以A组水平最高,IL-18与ALT、TBil呈正相关,与GGT无相关性。结论 IL-18可能参与了病毒性肝炎肝脏的炎性损伤过程。

补体C1q及抗C1q抗体在狼疮肾炎发病机制中的作用

目的探讨狼疮肾炎患者血清补体C1q及抗C1q自身抗体(C1qAb)水平与狼疮肾炎患者肾脏病理的相关性,以及补体C1q及C1qAb在狼疮肾炎发病机制中的可能作用。方法应用单向免疫扩散法检测狼疮肾炎患者40例及非狼疮肾炎患者40例血清C1q,应用酶联免疫吸附法检测血清C1qAb。应用肾活体组织检查和原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶标记法检测肾脏中凋亡细胞及凋亡小体的沉积。结果血清补体C1q水平,狼疮肾炎患者为(130±50)mg/L,非狼疮肾炎患者为(170±70)mg/L;血清C1qAb水平(P/N值),狼疮肾炎患者为7±4,非狼疮肾炎患者为4±3。狼疮肾炎患者血清C1qAb与补体C1q之间呈显著负相关(PearsonR=-0.567,P<0.01)。血清C1q水平的降低及C1qAb水平的升高与肾脏中补体C1q、IgG及C3的沉积显著正相关,与肾脏组织中有明显凋亡细胞及凋亡小体沉积显著正相关。结论血清C1qAb及C1q的异常可能参与了狼疮肾炎的发病,其可能机制为,促进补体C1q介导的免疫复合物在肾脏组织中沉积;促进凋亡细胞及凋亡小体在肾脏组织中沉积。