环氧化物水解酶Tyr113His多态性与中国北方人群食管鳞状细胞癌易感性的研究

目的 :研究微粒体环氧化物水解酶Tyr113His多态性与中国北方人群食管鳞状细胞癌 (esophagealsquamouscellcarcinoma ,ESCC)易感性的关系。方法 :采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应 (polymerasechainreaction re strictionfragmentlengthpolymorphism ,PCR RFLP)方法分析 2 5 7例食管癌患者和 2 5 2名健康对照组人群mEHTyr113His基因型分布。结果 :Tyr和His等位基因频率在食管癌患者和健康对照组中分别为 44 2 %、5 5 8%和 44 0 %、5 6 0 %。等位基因分布在两组之间差异无统计学意义 ,χ2 =0 0 0 8,P =0 92 9;基因型分布在病例组与对照组之间差异也无统计学意义 ,χ2=2 116,P =0 3 47。相对于Tyr/Tyr基因型 ,His/His基因型或His/His与Tyr/His基因型相加均未增加ESCC的发病风险。它们的危险度分别为 1 0 76( 95 %可信区间 =0 85 0～ 1 3 61)和 0 75 6( 95 %可信区间 =0 493～ 1 15 7)。如按性别、年龄、吸烟状态及是否具有上消化道肿瘤家族史进行分类 ,His/His基因型或His/His与Tyr/His基因型相加也未对ESCC的发病风险造成明显影响。结论 :mEH的Tyr113His多态性不能作为筛查ESCC患病风险的独立因素。

中年人中环氧化物水解酶2基因遗传多态G860A与原发性高血压相关性的研究

目的探讨环氧化物水解酶（EPHX）2基因遗传多态G860A与中年人原发性高血压的相关性。方法在原发性高血压患者100人及年龄、性别匹配的正常对照300人中，采用real-timePCR技术（TAQMAN技术）分析EPHX2基因遗传多态G860A的基因型及等位基因频率分布，并采用多因素非条件logistic回归分析分析EPHX2G860A基因多态的人群高血压易感性。结果EPHX2基因遗传变异G860A基因型频率在高血压与对照中的分布差异有统计学意义（P=0．01）；携带GA变异基因型个体发生高血压的危险性是GG基因型携带者的1．98倍（adjustedOR=1．98；95％CI：1．19—3．51），携带GG变异基因型个体的危险性为2．84倍（adjusted OR=2．84；95％CI=1．01—6．11），且存在显著的等位基因剂量一效应关联（Ptrend=0．03）。结论EPHX2基因的860A变异基因型升高了我国中年人高血压的发病风险，遗传变异G860A可作为高血压人群易感性的生物标志。

肺癌中FH IT基因缺失和p53蛋白表达的研究

目的:探讨肺癌组织中FH IT(frag ile h istid ine triad gene)基因缺失和p53蛋白表达及其与临床病理因素的关系。方法:采用逆转录-巢式聚合酶链反应方法及免疫组织化学ABC法分别检测42例肺癌组织中FH IT基因缺失和p53蛋白表达。结果:肺癌组织中FH IT基因缺失和p53蛋白表达阳性率分别为66.7%(28/42)和76.2%(32/42),FH IT基因缺失肺癌的p53蛋白阳性率明显高于FH IT基因正常表达的肺癌(P<0.01)。FH IT基因缺失与肺癌的淋巴结转移有关,p53蛋白表达与临床分期、淋巴结转移密切相关。结论:FH IT基因缺失和p53蛋白异常表达与肺癌发生、发展密切相关,二者相互促进,呈明显正相关。

PTEN基因在人和树鼠句肝细胞癌组织中低表达

目的:研究人和树鼠句肝癌和癌旁组织中PTEN基因的表达情况以及与肝癌侵袭转移的关系。方法:用RT-PCR和免疫组织化学方法分别检测人肝癌、癌旁组织和正常组织以及树鼠句肝癌和癌旁组织中PTEN mRNA和PTEN蛋白的表达情况。结果:PTEN mRNA在人的正常组织、癌旁组织、肝癌组织中的表达依次降低,差异有统计学意义,t值分别为-0.955和-10.065,P值均<0.001;树鼠句肝癌组织中PTEN mRNA的表达显著低于癌旁组织中的表达,t=-3.25,P=0.004。PTEN蛋白的表达在人的癌旁组织显著高于肝癌组织,t=-2.163,P=0.038;在树鼠句则无差别,t=0.757,P=0.459。结论:PTEN基因的表达缺失可能与肝癌的发生有关;用树鼠句进行肝癌发病学的研究基本上是可行的。

肺神经内分泌癌FHIT蛋白表达及其临床病理意义的研究

目的:探讨脆性三联组氨酸(FHIT)蛋白在肺神经内分泌癌中的表达及其临床病理意义。方法:采用二步法非生物素免疫组化技术检测90例肺神经内分泌癌组织中FHIT蛋白表达并分析其与各临床病理指标的关系。结果:FHIT蛋白表达定位于癌细胞质;并与组织学类型(P=0.006)、临床分期(P=0.003)、性别(P=0.031)、肿瘤大小(P=0.010)、淋巴结转移(P=0.000)以及预后(P=0.000)相关;与患者年龄(P=0.408)、大体类型无关,P=0.528;FHIT表达为肺神经内分泌癌的独立预后因子,P=0.000。结论:FHIT蛋白在肺神经内分泌癌的发生、演进过程中起着重要作用,并可作为分子指标检测患者预后。

有机磷神经毒剂降解酶研究进展

综述了参与有机磷神经毒剂降解的多种A类和B类酯酶的结构、酶学性质和作用机理,以及这些酶在洗消、人员防护和救治等方面的应用,通过比较得出降解有机磷神经毒剂的A类酯酶是研究的重点,最后对该领域的研究进行了展望。

两种ErbB2/Neu阳性-PTEN缺失乳腺癌基因工程小鼠模型的建立及其生物学特征比较

目的：建立两种ErbB2／Neu阳性-PTEN缺失的乳腺癌基因工程小鼠模型并比较其生物学特征。方法：利用先前建立的由鼠乳腺肿瘤病毒（MMTV）启动子同时驱动活化型ErbB2／Neu基因和重组酶Cre表达的FVB／N—MMTV—NIC小鼠与Flox-PTEN小鼠交配；或将由内源性启动子驱动活化型ErbB2／Neu基因表达的FVB／N-ErbB2^KI、FVB／N—MMTV—Cre及Flox—PTEN三种基因工程小鼠交配；PCR分别扩增Neu、Cre和PTEN基因，对其子代小鼠进行基因型鉴定；免疫组织化学法检测乳腺组织ErbB2／Neu和PTEN蛋白表达。对两种模型的成瘤时间、肿瘤数目、肺转移等生物学特征进行比较，观察肿瘤组织病理学形态，免疫组织化学法检测肿瘤细胞Ki-67表达，TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡水平。结果：经基因型鉴定和组织蛋白表达分析，获得了两种ErbB2／Neu阳性-PTEN纯合型缺失的乳腺癌基因工程小鼠模型；一是由MMTV外源性启动子同时驱动活化型ErbB2／Neu和Cre表达，抑癌基因PTEN条件性敲除的NIC／PTEN^-/-模型；二是由MMTV-Cre使内源性启动子驱动ErbB2／Neu基因表达，PTEN条件性敲除的ErhB2^KI／PTEN^-/-模型。NIC／PTEN^-/-模型的平均成瘤时间低于ErbB2^KI／PTEN^-/-模型（30d与368d，P〈0．01）；肿瘤数目、肺转移率均高于ErbB2^KI／PTEN^-/-模型（分别为10个与1～2个，75．0％与37．5％，均P〈0．01）；两种模型肿瘤呈现不同的组织病理形态，肿瘤细胞凋亡水平相当（P〉0．05）；NIC／PTEN^-/-模型Ki-67阳性细胞百分率高于ErhB2^KI／PTEN^-/-模型（86．9％±2．8％与37．4％±7．2％，P〈0．01）。结论：两种不同表型的ErbB2／Neu阳性-PTEN缺失的乳腺癌基因工程小鼠为探索ErbB2／HER2阳性乳腺癌的发生、发展规律及更有效的防治方案提供了理想的动物模型。

去神经对大鼠骨骼肌碳酸酐酶Ⅲ表达和磷酸酶活性的影响

目的 观察去神经对骨骼肌碳酸酐酶Ⅲ（carbonic anhydrase Ⅲ,CAⅢ）表达及其磷酸酶（phosphatase）活性的影响,探讨神经冲动受阻是否为重症肌无力（myasthenia gravis,MG）骨骼肌CAⅢ减少的原因.方法 定向切断支配大鼠趾长伸肌（extensor digitorum longus,EDL）和比目鱼肌（soleus,Sol）的神经纤维,术后第7、14、28和56天用Western blot分析EDL和Sol的CAⅢ水平,用固相膜上原位酶活性染色方法评估CAⅢ的磷酸酶活性.结果 （1）正常侧（即去神经对侧）Sol的CAⅢ水平远高于EDL,并且两者都表现出随时间增加（动物年龄增长）而增加的趋势.去神经后,EDL的CAⅢ水平随时间的延长而逐渐增加;Sol的CAⅢ水平则以14 d为分界先增加后降低.（2）正常侧Sol的CAⅢ的磷酸酶活性[随时间增加（动物年龄增长）呈逐渐增加的趋势]均高于EDL（变化不明显）.去神经后,Sol的CAⅢ磷酸酶活性（第14、28、56天分别为14.39±1.93、11.48±1.46、9.04±1.46）明显低于正常侧（22.75±1.80、25.26±3.15、25.82±2.97,t=0.002、0.005、0.002,均P＜0.05）,EDL的CAⅢ磷酸酶活性与正常侧相比亦是降低,但差异无统计学意义.（3）正常侧EDL和Sol的CAⅢ蛋白表达水平和CAⅢ的磷酸酶活性相一致;去神经后CAⅢ蛋白表达水平和CAⅢ的磷酸酶活性发生了背离,即CAⅢ蛋白表达水平增加,但其磷酸酶活性却降低.结论 去神经所致的神经冲动传递障碍与MG自身抗体所致的神经冲动传递障碍对骨骼肌CAⅢ表达水平的影响不同,MG骨骼肌CAⅢ表达水平减少并非是其自身抗体所致的神经冲动传递障碍造成.

不同分期结直肠癌组织中CA1基因表达与临床病理的相关性探讨

目的 探讨碳酸酐酶1（CA1）在不同临床分期结直肠癌组织中的表达模式及其与结直肠癌患者临床病理特征的相关性.方法 采用实时定量PCR检测基因水平CA1的表达.分别采用蛋白免疫印迹和免疫组织化学染色法检测蛋白水平CA1的表达.结果 在62例冰冻组织样本中,基因水平及蛋白水平的CA1在癌远端正常结直肠黏膜中的表达显著高于癌组织（P＜0.01）,不同临床分期结直肠癌组织中CA1表达呈折线模式,基因水平CA1的表达模式与蛋白水平相似,且均在进展期（Ⅲ期＋Ⅳ期）结直肠癌组织中下调更为明显.免疫组化在103例石蜡包埋组织中检测发现,CA1在癌远端正常上皮细胞中阳性表达率90.29％,显著高于癌组织中的阳性表达率（62.14％,P＜0.01）.CA1在高分化、中分化及低分化结直肠癌组织中的阳性表达率分别为90％、62.79％和5％,两两比较差异具有统计学意义（P＜0.01）.在存在淋巴结及远端转移的结直肠癌组织中CA1表达显著低于无转移组（37.14％vs 75％,P＜0.01）.CA1表达缺失与结直肠癌患者预后差相关,CA1阴性表达组5年生存率仅为8％,而阳性表达组患者5年生存率为92.86％,两者比较差异具有统计学意义（P＜0.01）.结论 CA1在基因水平和蛋白水平具有相似的表达模式.在结直肠癌组织中表达下调甚至缺失.CA1的表达下调与患者存在淋巴结转移或远处转移有关.癌组织分化程度越低,CA1表达下调越明显,越易发生转移,预后越差.

FHIT在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的观察脆性组氨酸三联体(FHIT)在子宫内膜异位症中的表达。方法应用免疫组化SP法检测30例子宫内膜异位症异位内膜和在位内膜及30例同期单纯子宫肌瘤患者子宫内膜为对照组中FHIT蛋白的表达情况。结果 FHIT在正常子宫内膜、在位子宫内膜、异位子宫内膜中的阳性表达率逐渐降低(χ2=28.865,P<0.000 1),在内异症r-AFS分期中比较,在位子宫内膜FHIT的表达差异无统计学意义(χ2=2.337,P=0.341);而异位内膜中的FHIT表达差异有统计学意义,Ⅰ～Ⅱ期高于Ⅲ～Ⅳ期(χ2=6.816,P=0.019)。结论 FHIT与内异症的发生、发展关系密切。

FHIT和HIF-1α与子宫内膜异位症相关研究进展

子宫内膜异位症（内异症）是指子宫内膜组织出现在子宫腔被覆黏膜以外的身体其他部位。内异症虽然是一种良性病变，却具有类似恶性肿瘤的生物学特性，许多与肿瘤发生相关的细胞因子已被证实与内异症有密切关系。其发病机制至今尚未完全阐明，有研究表明FHIT和HIF-1α与子宫内膜异位症关系密切，FHIT和HIF—lα均参与子宫内膜异位症的发生、发展。且FHIT和HIF一1α在子宫内膜异位症的发病机制中有相关性。