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法尔皮有孢汉生酵母(Hanseniaspora valbyensis)醇乙酰基转移酶的分离纯化及特性
被引量:
3
1
作者
范丽
徐岩
王栋
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期49-53,共5页
乙酸苯乙酯是苹果酒里的重要香气物质之一,是在醇乙酰基转移酶(AATase)的催化下由乙酰辅酶A和苯乙醇缩合而成。从法尔皮有孢汉生酵母(Hanseniasporavalbyensis)中收集细胞膜片段,然后经过DEAESepharose、SephadexG-75、OctylSepharose...
乙酸苯乙酯是苹果酒里的重要香气物质之一,是在醇乙酰基转移酶(AATase)的催化下由乙酰辅酶A和苯乙醇缩合而成。从法尔皮有孢汉生酵母(Hanseniasporavalbyensis)中收集细胞膜片段,然后经过DEAESepharose、SephadexG-75、OctylSepharose三步层析分离得到纯酶。纯化后的酶经SDS-PAGE电泳,得到一条明显的条带,分子量在37kD左右。此酶的最适反应条件是在30℃、pH7.0,在10℃以下酶比较稳定,pH稳定在7.0~8.0。重金属离子Hg2+、Zn2+、Pb2+对酶活有明显的抑制,EDTA、Mn2+对酶活没有太大的影响,Mg2+能激活此酶。此酶也能催化其它重要乙酸酯的合成,但对乙酸苯乙酯的合成具有特异性。
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关键词
法尔皮有孢汉生酵母
纯化
醇乙酰基转移酶
乙酸苯乙酯
固相微萃取
下载PDF
职称材料
乙酰辅酶A含量对酿酒酵母乙酸乙酯合成的影响
被引量:
13
2
作者
郑楠
郭庆焕
+5 位作者
何亚辉
钱泓
赵东
陈叶福
郭学武
肖冬光
《中国酿造》
CAS
北大核心
2018年第5期150-156,共7页
通过缺失乙酰辅酶A水解酶(ACH)基因和过表达乙酰辅酶A合成酶(ACS)基因技术提高酿酒酵母合成乙酰辅酶A(acetylCo A)能力的同时,过表达醇酰基转移酶(ATF)基因,提高乙酸乙酯合成能力,并考察acetyl-Co A含量对酿酒酵母合成乙酸乙酯能力的影...
通过缺失乙酰辅酶A水解酶(ACH)基因和过表达乙酰辅酶A合成酶(ACS)基因技术提高酿酒酵母合成乙酰辅酶A(acetylCo A)能力的同时,过表达醇酰基转移酶(ATF)基因,提高乙酸乙酯合成能力,并考察acetyl-Co A含量对酿酒酵母合成乙酸乙酯能力的影响。结果表明,敲除ACH1基因、且在敲除ACH1基因基础上过表达ACS1、ACS2基因均能提高酿酒酵母Acetyl-Co A含量,进而提高乙酸乙酯含量。较亲本菌株α5,缺失突变株α5ΔACH1、重组菌株α5-A1、α5-A2的Acetyl-Co A的含量均分别提高了52.5%、80.33%、52.79%,乙酸乙酯含量分别提高10.59%、26.12%、23.70%。在敲除ACH1基因、过表达ACS1和ACS2基因的基础上同时过表达ATF1基因,得到工程菌株A1-ATF1和A2-ATF1,较亲本菌株α5,乙酸乙酯含量分别提高226.09%、530.43%、289.57%,工程菌株A1-ATF1乙酸乙酯产量最高,为72.52 mg/L。研究表明,提高乙酰辅酶A含量能够促进乙酸乙酯的合成,为提高乙酸乙酯生成量提供了新思路。
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关键词
乙酰辅
酶
A
乙酸乙酯
醇乙酰基转移酶
基因敲出
基因过表达
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职称材料
题名
法尔皮有孢汉生酵母(Hanseniaspora valbyensis)醇乙酰基转移酶的分离纯化及特性
被引量:
3
1
作者
范丽
徐岩
王栋
机构
江南大学生物工程学院
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期49-53,共5页
基金
国家十五攻关项目(2001BA501A07)
文摘
乙酸苯乙酯是苹果酒里的重要香气物质之一,是在醇乙酰基转移酶(AATase)的催化下由乙酰辅酶A和苯乙醇缩合而成。从法尔皮有孢汉生酵母(Hanseniasporavalbyensis)中收集细胞膜片段,然后经过DEAESepharose、SephadexG-75、OctylSepharose三步层析分离得到纯酶。纯化后的酶经SDS-PAGE电泳,得到一条明显的条带,分子量在37kD左右。此酶的最适反应条件是在30℃、pH7.0,在10℃以下酶比较稳定,pH稳定在7.0~8.0。重金属离子Hg2+、Zn2+、Pb2+对酶活有明显的抑制,EDTA、Mn2+对酶活没有太大的影响,Mg2+能激活此酶。此酶也能催化其它重要乙酸酯的合成,但对乙酸苯乙酯的合成具有特异性。
关键词
法尔皮有孢汉生酵母
纯化
醇乙酰基转移酶
乙酸苯乙酯
固相微萃取
Keywords
Hanseniaspora valbyensis, purification
alcohol acetyltransferase
phenethyl acetate
solid-phase microextraction
分类号
TQ655 [化学工程—精细化工]
Q555.3 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
乙酰辅酶A含量对酿酒酵母乙酸乙酯合成的影响
被引量:
13
2
作者
郑楠
郭庆焕
何亚辉
钱泓
赵东
陈叶福
郭学武
肖冬光
机构
天津科技大学生物工程学院工业发酵微生物教育部重点实验室
中国轻工业浓香型白酒固态发酵重点实验室
出处
《中国酿造》
CAS
北大核心
2018年第5期150-156,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(31671843)
中国轻工业浓香型白酒固态发酵重点实验室开放基金项目(2017JJ003)
文摘
通过缺失乙酰辅酶A水解酶(ACH)基因和过表达乙酰辅酶A合成酶(ACS)基因技术提高酿酒酵母合成乙酰辅酶A(acetylCo A)能力的同时,过表达醇酰基转移酶(ATF)基因,提高乙酸乙酯合成能力,并考察acetyl-Co A含量对酿酒酵母合成乙酸乙酯能力的影响。结果表明,敲除ACH1基因、且在敲除ACH1基因基础上过表达ACS1、ACS2基因均能提高酿酒酵母Acetyl-Co A含量,进而提高乙酸乙酯含量。较亲本菌株α5,缺失突变株α5ΔACH1、重组菌株α5-A1、α5-A2的Acetyl-Co A的含量均分别提高了52.5%、80.33%、52.79%,乙酸乙酯含量分别提高10.59%、26.12%、23.70%。在敲除ACH1基因、过表达ACS1和ACS2基因的基础上同时过表达ATF1基因,得到工程菌株A1-ATF1和A2-ATF1,较亲本菌株α5,乙酸乙酯含量分别提高226.09%、530.43%、289.57%,工程菌株A1-ATF1乙酸乙酯产量最高,为72.52 mg/L。研究表明,提高乙酰辅酶A含量能够促进乙酸乙酯的合成,为提高乙酸乙酯生成量提供了新思路。
关键词
乙酰辅
酶
A
乙酸乙酯
醇乙酰基转移酶
基因敲出
基因过表达
Keywords
acetyl-CoA
ethyl acetate
alcohol acetyltransferase
gene deletion
gene overexpression
分类号
Q552 [生物学—生物化学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
法尔皮有孢汉生酵母(Hanseniaspora valbyensis)醇乙酰基转移酶的分离纯化及特性
范丽
徐岩
王栋
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2006
3
下载PDF
职称材料
2
乙酰辅酶A含量对酿酒酵母乙酸乙酯合成的影响
郑楠
郭庆焕
何亚辉
钱泓
赵东
陈叶福
郭学武
肖冬光
《中国酿造》
CAS
北大核心
2018
13
下载PDF
职称材料
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