人血清醇脱氢酶活性及其与肝炎的关系

利用醇脱氢酶在体内的特殊分布，对３５７例人血清醇脱氢酶活性进行测定分析。结果表明：正常人酶活性无地区、性别的显著差异（Ｐ＞０．０５），急慢性病毒性肝炎病人的酶活性明显高于正常人（Ｐ＜０．０５）。提示血清醇脱氢酶活性与肝脏的机能状态有密切关系。

原发性肝癌与非肝病、非癌症病人血清醇脱氢酶活性测定

采用酶促培育法测定了８７例原发性肝癌病人血清醇脱氢酶（ｓＡＤＨ）活性，并与１７６例非肝病、非癌症病人、６６例正常人及７６例肝炎病人进行了比较，结果原发性肝癌病人ｓＡＤＨ活性显著高于非肝病、非癌症病人及正常人（Ｐ＜０．０１）；急、慢性肝炎病人ｓＡＤＨ活性也显著高于非肝病、非癌症病人及正常人（Ｐ＜０．０１）；非肝病、非癌症病人ｓＡＤＨ活性与正常人间无显著差异（Ｐ＞０．０５）。提示ｓＡＤＨ活性测定对于诊断原发性肝癌、肝炎具有器官特异性和疾病特异性。

dhaT基因克隆及其与gldABC基因串联表达载体的构建

以肺炎克雷伯氏菌As1.1736的基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到了目的基因(dhaT)并将该基因克隆至pMD19-T Simple载体。基因的序列分析表明,dhaT基因全长为1164bp,编码387个氨基酸。将含有自身核糖体结合位点的dhaT基因片段插入到pMD19-T Simple/gldABC质粒的gldABC基因下游,形成重组克隆质粒pMD19-T Simple/gldABC-dhaT,并进一步将gldABC与dhaT串联基因亚克隆到表达载体pET28a(+)上。

全反式视黄醇脱氢酶基因单核苷酸多态性连锁不平衡图谱的建立

目的建立全反式视黄醇脱氢酶基因单核苷酸多态性连锁不平衡图谱。方法采用变性高效液相色谱分析技术(DHPLC),在4个汉族人DNA样品池(每个由5个样本组成)中筛查SNP,并在150个汉族人样本中测定基因频率。采用Haploview和EH软件对筛查到的常见SNP进行LD和单倍型分析。结果共筛查到15个SNP,其中10个为新发现SNP,7个为常见SNP,等位基因频率> 0．05。在3′端的4个SNP存在显著的LD(|D′|>0．75且|D′|的置信区间估计提示强LD,r2>0．33, P<0．031),组成一个明显的单倍型区块;5′端3个SNP间的LD则不明确。结论RDH8基因区域的LD分析结果提示,在进行有关RDH8基因的关联分析时,3′端需要一个代表性SNP位点即可(RDH8ESa也许最为合适),而在5′端则至少需要2个SNP(如RDH851)。