SPE-HPLC测定断血流胶囊中醉鱼草皂苷Ⅳb的含量

目的:建立固相萃取-高效液相色谱法测定断血流胶囊中醉鱼草皂苷Ⅳb的含量。方法:色谱柱:Dikma Kromasil C_(18)柱(5 μm,250 mm×4.6 mm);流动相:甲醇-水(80:20);流速:0.8 mL·min^(-1);检测波长:250 nm;柱温:40℃。结果:醉鱼草皂苷Ⅳb在0.15～1.2μg范围内具有良好的线性关系(r=0.9999),总平均加样回收率为98.8%(n=9)。结论:该方法简便、快速、有效、灵敏、准确,具有良好的重复性和回收率,可作为该制剂的定量分析方法。

SPE-HPLC测定断血流片中醉鱼草皂苷Ⅳb的含量

目的:建立固相萃取-高效液相色谱法测定断血流片中醉鱼草皂苷Ⅳb的含量。方法:色谱柱Dikma Kromasil C18柱(5μm,250mm×4.6mm),流动相甲醇–水(80∶20),流速0.8ml/min,检测波长250nm,柱温40℃。结果:醉鱼草皂苷Ⅳb在0.7715～6.136μg范围内具有良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为98.57%,RSD为0.56%(n=9)。结论:该方法简便、快速、有效、灵敏、准确,具有良好的重复性和回收率,可作为该制剂的定量分析方法。

高效液相色谱法测定牙膏中醉鱼草皂苷Ⅳb的含量

目的:建立HPLC(高效液相色谱)法测定含风轮菜牙膏中醉鱼草皂苷Ⅳb质量分数的方法。方法:采用DIKMA Diamonsil C18 (250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱:0 min 20%乙腈,10 min至75%乙腈,12 min至100%,流速为1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长为250 nm;进样量为20μL。结果:醉鱼草皂苷Ⅳb的质量浓度在0.55~11.00μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.99972,平均加标回收率为99.22%,RSD为0.80%。结论:该方法稳定、准确,重现性好,是测定牙膏中醉鱼草皂苷Ⅳb质量分数的可靠方法。

高效液相色谱法测定断血流胶囊中醉鱼草皂苷Ⅳb的含量

目的建立高效液相色谱(HPLC)法测定断血流胶囊中醉鱼草皂苷Ⅳb的含量。方法采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Hypersil BDS-C18(4.6 mm×200 mm,5μm),流动相为甲醇-水(80∶20),检测波长为250 nm,流速为1 ml.min-1。结果醉鱼草皂苷Ⅳb在3.17-31.7μg/ml范围内峰面积与其浓度呈良好的线性关系,平均回收率为99.4%(RSD=1.2%)。结论此法简便、准确,可作为断血流胶囊含量测定的方法。

醉鱼草皂苷Ⅳ激活线粒体抑制αβ整合素在结直肠癌小鼠肝转移中的作用及机制研究

目的 探讨醉鱼草皂苷Ⅳ(BS-Ⅳ)激活线粒体抑制αβ整合素在结直肠癌的肝转移中的作用及机制。方法 将60只BALB/c小鼠分为对照组、模型组和低、中、高剂量实验组(0.1、1、2 mg·kg^(-1 )BS-Ⅳ),除对照组外其余4组小鼠通过尾静脉注射肠癌细胞建立结直肠癌小鼠模型,造模成功后干预2周。观察各组小鼠肝表面的肿瘤结节数量和肝质量。将HT-29细胞培养传代后用1、2、3、4、5、10μmol·L^(-1)BS-Ⅳ培养,检测各组细胞存活率、凋亡率及细胞黏附性,并用蛋白质印迹法检测细胞B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X(Bax)蛋白表达水平。结果 对照组、模型组与低、中、高剂量实验组小鼠的肿瘤结节数量分别为0、(12.33±1.58)、(8.26±0.73)、(5.14±0.91)、(3.33±0.28)个;肝质量分别为(1.63±0.13)、(5.58±0.64)、(4.89±0.51)、(3.74±0.57)、(2.26±0.28)g;模型组与对照组相比,低、中、高剂量实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。经1、2、3、4、5、10μmol·L^(-1)的BS-Ⅳ处理后,HT-29结直肠癌细胞的细胞活性分别为(93.20±1.48)%、(78.02±2.33)%、(39.05±3.46)%、(19.10±4.03)%、(18.41±4.21)%、(18.31±4.98)%,随着剂量增加,HT-29结直肠癌细胞的细胞活性得到显著抑制(均P<0.05)。4、5、10μmol·L^(-1)BS-Ⅳ处理2 h后,HT-29结直肠癌细胞的细胞凋亡率分别为(12.20±1.48)%、(23.02±2.13)%、(37.85±2.56)%;0、4、5、10μmol·L^(-1)BS-Ⅳ组HT-29细胞的黏附细胞数量分别为(18.13±0.46)×10~5、(14.02±0.34)×10~5、(8.09±0.21)×10~5、(2.98±0.08)×10~5,与0μmol·L^(-1) BS-Ⅳ组HT-29细胞相比,BS-Ⅳ干预后HT-29细胞的黏附细胞数量减少(均P<0.01)。HT-29细胞经BS-Ⅳ处理后,α_(2)β_1整合素的表达水平显著下降,对Ⅰ型和Ⅳ型胶原蛋白的黏附力明显下降,与经BS-Ⅳ处理的细胞相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 醉鱼草皂苷Ⅳ可能通过激活线粒体抑制αβ整合素,有效抑制结直肠癌小鼠的肝转移。

风轮菜提取液脱色工艺的研究

目的:优选出风轮菜提取液最佳脱色工艺。方法:以风轮菜提取液中的色素除去率和醉鱼草皂苷Ⅳb的损失率和为考察指标,在对脱色剂用量、脱色温度、脱色时间和搅拌速度进行单因素考察的基础上,采用正交试验设计对工艺参数进行优选。结果:最佳脱色工艺为脱色剂加入量为3. 0%,脱色温度为70℃,脱色时间为30 min,搅拌速度700 rpm。结论:优选得到的提取工艺具有去除色素率高、指标成分损失率低的优点。

苗药细风轮菜的质量标准研究

目的建立细风轮菜的质量标准。方法收集10批细风轮菜药材样品,对其进行外观性状、显微鉴别和薄层鉴别,并对其水分、总灰分、酸不溶性灰分、稀乙醇浸出物进行检查;采用高效液相色谱法测定药材中迷迭香酸的含量。结果细风轮菜药材茎纤细,呈方柱形,被白色绒毛,表面为灰绿色或绿褐色;茎横切面可见表皮细胞、非腺毛、皮层细胞等;粉末可见非腺毛、导管、木纤维、叶肉细胞等。薄层鉴别结果显示,供试品色谱中,在与醉鱼草皂苷Ⅳb对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。10批样品的水分、总灰分、酸不溶性灰分、稀乙醇浸出物、迷迭香酸含量分别为8.69%~12.33%、5.96%~13.33%、0.14%~3.29%、18.57%~32.61%、0.35%~0.82%,平均值分别为10.10%、9.73%、1.06%、23.54%、0.56%。结论所建方法可用于细风轮菜药材的质量控制。初步拟定细风轮菜药材中水分不得过12.0%,总灰分不得过12.0%,酸不溶性灰分不得过1.5%,稀乙醇浸出物不得少于18.0%,迷迭香酸含量不得少于0.45%。

HPLC法测定断血流分散片的溶出度

目的:建立断血流分散片的溶出度测定方法,为评价和控制药品质量提供方法。方法:采用小杯法以纯化水作为溶出介质,转桨转速为100r·min^(-1),用高效液相色谱法测定醉鱼草皂苷Ⅳ b,色谱柱为汉邦C_(18)柱(5μm,4.6mm×250mm);流动相为甲醇-水(80∶20);流速是1.0mL·min^(-1);检测波长为250nm;柱温为30℃。绘制断血流分散片的累积溶出度曲线,并运用电子表格Excel软件处理药物溶出度数据,提取参数(T_d,m),并对参数进行相关性检验。结果:本法线性范围为2.06～22.62μg·mL^(-1),r=0.9999;平均回收率为99.86%,RSD为0.46%(n=9)。对不同批次的断血流分散片进行了溶出度测定,溶出参数差异无显著性意义(P<0.01)。结论:本方法具有灵敏、准确、快速的优点,适用于断血流分散片的质量控制。

HPLC法同时测定不同厂家断血流制剂中3种成分

目的建立HPLC法同时测定断血流软胶囊、胶囊、片剂中香蜂草苷、蒙花苷、醉鱼草皂苷Ⅳb的含量。方法该药物75%乙醇提取液的分析采用Agilent 5 TC-C 18(2)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相甲醇-水,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长250、283、330 nm。结果香蜂草苷、蒙花苷、醉鱼草皂苷Ⅳb分别在10.39~103.9、10.50~105.0、9.985~99.85μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率分别为99.37%、99.73%、100.31%,RSD分别为1.11%、1.20%、1.43%。结论该方法简便准确,重复性好,可用于断血流制剂的质量控制。