一种改进的丛枝菌根染色方法

研究改进了Vierheilig等描述的AM菌根染色法:将根样于20%KOH溶液中60℃水浴透明40-120 min,5%醋酸酸化5min后,用5%醋酸墨水染色液(派克纯黑书写墨水Quink),于60℃水浴染色30 min,清水浸泡脱色(14h)后即可镜检。根皮层细胞内AM真菌的丛枝结构清晰可见,并且能够明确地分辨AM真菌与其它未知真菌。此外,Quink初染后,再经过SudanⅣ复染(60℃、60 min),70%乙醇脱色5min,暗隔真菌的透明菌丝内所积聚的脂类颗粒被SudanⅣ染上鲜红色,在复式显微镜下能够观察到此类透明菌丝在根皮层组织内的存在状况。采用甘油明胶为封固剂制片,根的染色效果可以保存长久。此项技术可以对同一种植物的多个根样进行同步的透明和染色处理,而且操作简便、低毒性、成本低廉、染色效果极佳,适用于野生和栽培草本植物AM菌根的染色和制片观察。

5种染色剂对生姜根系丛枝菌根(AM)真菌的染色效果比较

【目的】建立一种生姜根系内生真菌的最佳染色方法,更好地观察、分析生姜根际土壤丛枝菌根(Arbuscular mycorrhiza,AM)真菌对生姜根系的侵染情况,便于国内学者应用。【方法】在盆栽灭菌条件下,利用AM真菌对生姜进行接种试验,探讨5种染色剂(酸性品红、台酚蓝、苏丹红Ⅳ、苯胺蓝、墨水)对生姜根系丛枝菌根真菌的染色效果。【结果】5%醋酸墨水染色液的染色效果最佳,根皮层细胞内AM真菌的菌丝、泡囊、孢子等结构清晰可见,且能够明确分辨AM真菌与其他未知真菌,根的染色效果可以长久保存。【结论】墨水染色操作简便、毒性低、成本低廉、染色效果极佳,适用于生姜根系AM真菌的染色和制片观察。

同色兜兰菌根真菌染色方法比较

以健康同色兜兰(Paphiopedilum concolor)营养根为材料,探讨同色兜兰菌根脱色条件和酸性品红、台酚蓝、苏丹红Ⅳ、苯胺蓝、墨水等5种染色剂对菌根真菌的染色效果,建立同色兜兰菌根真菌的最佳染色方法。结果表明,在20%KOH溶液中90℃水浴5 h的同色兜兰菌根制片效果最为理想;5%醋酸墨水染色液(派克纯黑书写墨水Quink)染色效果最佳,根皮层兰科真菌的菌丝、泡囊等结构清晰可见,并且能够明确地分辨兰科真菌与其他菌根真菌,根的染色效果可以保存长久。墨水染色法操作简便、低毒性、成本低廉、染色效果极佳,适用于同色兜兰兰科真菌的染色和制片观察。