实验教学中醋酸纤维素薄膜电泳的条件优化

醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白是生物化学实验课中的一项基础实验技术。目前,诸多医学院校基础医学及生物学专业均开设了此项实验。但是由于实验方法的不同,且实验过程中的影响因素较多,学生获得的实验结果也存在多种问题。经过多年实验教学探索,西安交通大学医学部基础医学院生物化学与分子生物系实验教学团队优化了醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白的实验方案,增强了实验教学内容的互动性,确保了实验结果的稳定性,使学生更好地掌握了水平电泳分离蛋白质的理论知识并获得了成功的实验验证。

优化血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳实验教学

在生物化学实验项目“血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳”教学中发现电泳结果往往不佳,山东农业大学生物化学教学团队通过不断地教学实践和吸收总结前人经验对此进行了一系列优化处理,包括血清样品的选择、电极缓冲液的使用、增加点样练习、电泳参数的设置、染色及漂洗等方面,最后得到了分离效果较好的电泳图谱,从而提高了生化实验教学质量,学生的理论知识和实验技能掌握更扎实,科技创新能力和综合素质都得到了提升。

污染肝素中多硫酸化硫酸软骨素的分步醋酸纤维素薄膜电泳分析

采用离子交换色谱法从污染肝素原料中分离出多硫酸化硫酸软骨素(OSCS),建立了分步醋酸纤维素薄膜电泳法分析污染肝素中OSCS含量的方法。结果表明,先以0.05mol/L醋酸钡缓冲液(pH5.0)电泳,再以0.15mol/L醋酸锌缓冲液(pH6.3)电泳,可以将肝素和OSCS完全分开,检出限为0.1g/L;通过灰度积分建立定量校准曲线,相关系数为0.9934,平均回收率为102.1%～106.1%;RSD为4.1%～6.0%。

血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳实验教学的优化设计

醋酸纤维素薄膜电泳(PAME)由于其微量、快速、简便、分辨力高等优点,目前已成为高校生化实验常规项目之一,并被广泛应用于血清蛋白、糖蛋白等生物大分子的临床分离与检测。但它也是在生化实验中影响因素较多、较为复杂并难以取得理想效果的实验。实验采用鸡血清蛋白代替价格昂贵的人血清蛋白进行PAME实验教学,并采取措施优化实验条件和程序,从而较好地调控了实验进程,有效地提高了教学的质量和效率。

几种动物肝脏糖胺聚糖的醋酸纤维素薄膜电泳分析

采用酶解和离子交换色谱的方法,从兔、鸡、猪和羊肝组织中提取和纯化得到了糖胺聚糖(GAGs).通过比较透明质酸(HA)、硫酸软骨素A(CS-A)、硫酸软骨素C(CS-C)、硫酸皮肤素(DS)、肝素(HP)、硫酸乙酰肝素(HS)等标准品在醋酸钡、醋酸锌、吡啶-甲酸等几种不同缓冲体系下的醋酸纤维素薄膜电泳行为,结合灰度积分建立了适合于微量GAGs定性和定量分析的电泳方法.将从不同动物肝脏组织中提取的GAGs运用该方法进行分析,发现不同动物肝脏组织中,GAG含量和组成均有较大差异:羊肝中GAGs含量最高(0.52 mg/g组织干粉),种类也最丰富,含有HA、HS、DS和CS,其中HA所占比例最高;鸡肝中GAGs含量最少(0.18 mg/g组织干粉),主要含有HA和DS;兔肝GAGs种类与猪肝相似,均含有HA、HS和DS,但HS是猪肝GAGs的主要成分,DS是兔肝GAGs的主要成分.

图示教学法在生物化学实验《血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳—微量法》中的应用

生物化学是一门实验科学,生物化学实验对于学生深刻理解生物化学理论知识具有重要的意义。为了提高教学质量,我们在生物化学实验《血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳—微量法》的实验教学中实践了图示教学法,将授课中的重点难点简明扼要地用9个图概括出来,成功激发了学生的学习兴趣,促进教学效果的提升。

提高醋酸纤维薄膜电泳实验成功率的探讨

针对人血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳学生实验中薄膜选择和处理不当、点样不均匀,血清蛋白分离不良、搭桥不规范,产生斜泳、电泳条件掌握不好,区带分离不开、漂洗时膜重叠,造成血清蛋白粘连、染色不好,背景和区带不清晰等6个容易出现问题的环节,收集、展示了上述原因而导致实验失败的图谱,并与实验成功的图谱作对照。对实验的各个操作环节进行了深入探讨、提出了具体改进的措施,使学生一次成功率达到90以上。该文提高教学质量具有重要意义。

醋酸纤维素薄膜电泳常见差错和失败原因分析

目的 分析醋酸纤维素薄膜电泳失败的原因。方法 通过观察学生的操作过程 ,同正常电泳结果做对照并进行分析。结果 电泳过程中一个或多个环节操作不当 ,均可引起实验失败。结论 在学生操作容易出错的诸环节 ,应认真指导 。

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的影响因素分析

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳常因多种因素影响而出现区带分离不清晰、拖尾、区带歪斜、区带呈锯齿状或弯曲等现象。该文结合教学实践,对造成不理想电泳图谱常见影响因素进行分析,提出相应的解决方法,有助于改进实验教学效果。

单克隆抗体及醋酸纤维薄膜电泳法在肺癌血清学诊断上的应用

肺癌是我国最常见的恶性肿瘤之一。为提高肺癌的诊治率，我们对肺癌血清学的诊断方法不断进行研究、改进，以期建立一种操作简便，结果可信、肺癌检出率高的检查方法。本文采用组合单克隆抗体，经醋酸纤维薄膜电泳法，对７０例肺癌患者血清及１００例正常人血清进行了检测。结果显示，肺癌血清中癌相关抗原的检出率为８３％，正常人血清组的假阳性率为１０％，误诊率小于３０％，故此方法有诊断应用价值。

硼酸缓冲液用于醋酸纤维薄膜电泳的分离效果以及在实验教学中的应用

目的比较硼酸缓冲液和巴比妥缓冲液在醋酸纤维薄膜电泳中的分离效果,评定硼酸缓冲液是否可以替代巴比妥缓冲液用于实验教学。方法选取健康家兔血清,分别在两种缓冲液环境中进行醋酸纤维薄膜电泳。巴比妥缓冲液:pH 8.6,电压110 V,电泳时间60 min;硼酸缓冲液:pH 8.6,电压120 V,电泳时间70 min。比较两种缓冲液的分离效果。结果两种缓冲液的电泳分离血清蛋白效果相当。结论硼酸缓冲液可替代巴比妥缓冲液用于实验教学。

醋酸纤维素薄膜电泳实验成绩量化评定模式的设计

通过对实验教学量化评定的内容、类型、考核形式及各部分内容占总成绩的权重,各部分内容中的详细考核项目,各详细考察项目的项目系数等多方面的综合权衡,建立了醋酸纤维素薄膜电泳实验成绩量化评定模式,其使用简便、合理、易行,能科学正确的量化评定学生实验成绩,有效地改进实验教学效果。

醋酸纤维素薄膜电泳实验教学方法的优化

醋酸纤维素薄膜电泳是生物化学相关专业实验室为本科生和研究生开设的一项常规实验项目,它可以用于蛋白质、多糖、糖蛋白、腺苷酸等多种生物分子的分离纯化与鉴定。随着高等学校“宽口径,重基础”等教育教学改革的推进,单门课程的总学时越来越少,导致耗时长的实验项目无法开出,甚至全部实验课程取消,影响了学生实验技能及综合素质的提高。为了在有限的学时内使学生掌握醋酸纤维素薄膜电泳的实验原理与操作,对其教学方法进行了优化,取得了较好的教学效果。

高原地区行血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳时出现的若干问题及解决对策

目的:了解醋酸纤维素薄膜电泳分离血清的基本原理。方法:用醋酸纤维素薄膜为支持物将人血清在pH8.6的缓冲液中电泳1小时左右,使血清得到分离。结果:实验中出现图谱不清、出现条纹、区带扭曲等问题。结论:通过采取相应的对策使醋酸纤维素薄膜电泳的成功率得到了提高。

醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白质实验方法优化

目的:由于醋酸纤维素薄膜电泳实验教学中影响因素较多,难以取得理想的图谱,对醋酸纤维素薄膜电泳的实验方法进行了优化。方法:采取薄膜过夜浸泡、充分浸透;自制点样器;透明时薄膜与玻璃之间贴合紧密,并稍微倾斜;110 V电压电泳1h等措施。结果:经过实验方法优化,可以得到条带分离较好的电泳图谱。结论:优化后的醋酸纤维素薄膜电泳实验有效提高了实验教学的质量和效率。

利用醋酸纤维素薄膜电泳显示金针菇酯酶同工酶

[目的]利用醋酸纤维素薄膜电泳分析金针菇酯酶同工酶。[方法]以6种金针菇为材料,采用醋酸纤维素薄膜电泳对其酯酶同工酶进行分析,并与利用PAGE法得到的针菇酯酶同工酶图谱进行对比。[结果]6种金针菇共电泳得到20条酯酶同工酶带,其中相对迁移率不同的共有8条,大小分别为0.580、0.613、0.645、0.709、0.806、0.839、0.871、0.934;6种金针菇中,①号和②号有3条相同的带,④号和⑤号条带完全相同,③号与④号、⑤号有2条相同的带,⑥号与其他5种菌株间相同的条带较少。[结论]该试验结果与PAGE法显示的金针菇酯酶同工酶图谱基本一致,为实现利用醋酸纤维素薄膜电泳技术快速检测各类食用菌酯酶同工酶提供了可能。

醋酸纤维薄膜电泳缓冲系统置换及缓冲条件优化

醋酸纤维薄膜电泳具有操作简便、分辨率较高等优点,在科研、临床和生产中应用广泛,但是常用电极缓冲液组分巴比妥和巴比妥钠具有毒性,不易大量购置,需要用一种常规缓冲系统替代。试验结果表明,硼酸-四硼酸钠能够替代巴比妥-巴比妥钠缓冲系统完成醋酸纤维薄膜电泳,电泳效果相同,其适宜的离子强度为0.22~0.26 mol/L,pH值为8.7~8.8,重复应用6次不影响电泳效果。

醋酸纤维薄膜电泳法分离测定鸡血清蛋白质

应用醋酸纤维薄膜电泳法分离测定了鸡血清中不同蛋白质。对电流强度、电泳时间和点样量等影响分离效果的条件进行了选择。并用光度计和薄层扫描仪对样品进行了定量测定。

信息化教学《醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白》实验中的应用

随着信息时代的高速发展,信息化技术融入课堂教学已成为现代课堂教学的重要手段,本文以《醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白》为例,分析生物化学实验教学过程中存在的问题,将信息化教学手段和实验教学相结合,构建超星学习通网络教学平台,实现课前线上学习、课中线上线下结合、课后线上拓展的混合教学模式,提高学生自主学习能力,优化教学信息化设计,推动教学改革,从而提升实验教学效果。实践结果和学生反馈均表明,将信息化学习环境下的自主学习和实验学习环境下的合作学习相互结合,能有效地达到教学目标,实现以学生为主体完成了知识、理论、实践一体化的教学,为进一步完善在线课程的建设和教学模式的改革提供借鉴。