醋酸钙梯度法制备阿魏酸脂质体的研究及体外评价

目的采用醋酸钙梯度法制备阿魏酸脂质体,考察其制备工艺及理化性质,进行体外释放度及稳定性评价。方法以包封率为指标,考察阿魏酸脂质体胆固醇含量、脂药比、孵育时间、孵育温度、钙离子浓度等因素对包封率的影响。评价其粒径、Zeta电位、体外释放、稳定性。采用冷冻蚀刻电镜观察其显微结构。结果磷脂-胆固醇比例为0.5,脂药比为26,钙离子浓度120 mol.L-1,孵育条件为37℃,30 min制备的脂质体包封率达80.2%,粒径152 nm。荷电脂质体粒径增加,Zeta电位升高。载药脂质体Zeta电位降低,粒径无变化。体外5 h释放80%。30 d内包封率及粒径均无显著变化。结论通过工艺和处方考察优选出最佳制备条件,制得的阿魏酸脂质体为单室结构,包封率高,稳定性好。

醋酸钙梯度法制备维A酸脂质体

目的:评价醋酸钙梯度法制备维A酸脂质体的可行性,并与薄膜法、逆相蒸发法进行质量比较。方法:采用薄膜法、逆相蒸发法和醋酸钙梯度法分别制备维A酸脂质体,用G-50葡聚糖凝胶柱分离,以紫外分光光度法和纳米激光粒度仪分别测定维A酸脂质体的包封率和粒径,以电子显微镜观察维A酸脂质体的形态。结果:以醋酸钙梯度法制备的维A酸脂质体包封率最高,达90.48%;其外观圆整均匀,平均粒径为35.8nm,4℃放置3mo质量稳定。结论:采用醋酸钙梯度法制备维A酸脂质体包封率较高,方法可行。

醋酸钙梯度主动载药法制备芦丁纳米脂质体

目的:采用主动载药法制备芦丁纳米脂质体,提高包封率,增加药物在体外的释放。方法:利用醋酸钙梯度造成主动载药的驱动力,HPLC测定芦丁含量,离心超滤法测定脂质体包封率,激光粒度仪测定粒径分布和电位,考察单因素对包封率及粒径的影响,并进一步研究芦丁纳米脂质体在4℃的稳定性和体外释放。结果:空白脂质体10倍体积的30 g/L蔗糖、透析3次可高效建立醋酸钙梯度,20 g/L PVP作为溶解介质可有效增加芦丁的包封率和稳定性,在最佳制备工艺条件(磷脂浓度40 g/L、磷脂∶胆固醇质量比为5∶1、药脂质量比1∶30、50℃孵育15 min,包封率达80.3%)下成品脂质体平均粒径为185 nm,电位-1.2 m V,28 d稳定性良好,体外释放较完全。结论:醋酸钙梯度主动载药法可制备高包封率、释药较完全的芦丁纳米脂质体。

阿魏酸脂质体的制备及其体外抗氧化活性评价

采用醋酸钙梯度法制备阿魏酸脂质体,考察不同因素对包封率的影响。制备的脂质体包封率可达到(80.2±5.2)%,粒径约150 nm。空白脂质体和载药脂质体的zeta电位分别为(13.14±1.67)mV和(4.12±0.05)mV。冷冻蚀刻电镜观察结果为单室脂质体。建立了U937细胞株氧化损伤模型,采用MTT法、荧光显微镜及光学显微镜考察了细胞活度、线粒体膜电位及细胞的形态学变化,评价阿魏酸脂质体对U937细胞株氧化损伤的保护作用。结果表明,阿魏酸脂质体组体外抗氧化活性强于阿魏酸溶液。

主动载药法制备双氯芬酸钠脂质体及其体外释放

目的:采用主动载药法制备双氯芬酸钠脂质体,考察包封率的影响因素,并对其体外释放进行评价。方法:利用醋酸钙梯度法制备双氯酚酸钠脂质体,考察不同因素对包封率的影响,并对药物体外释放行为进行研究。结果:脂质体包封率随温度和醋酸钙浓度的升高而增加、随药脂比的增大而降低。与混悬剂相比,其体外释放较完全。结论:醋酸钙梯度法适于制备双氯芬酸钠脂质体,后者的体外释放具有明显缓释特征。

双氯芬酸钠脂质体凝胶的制备及其药动学和刺激性评价

目的制备双氯芬酸钠(DS)脂质体凝胶,考察其肌注后家兔体内的血药浓度经-时过程及对肌肉的刺激性。方法醋酸钙梯度法制备DS脂质体,再以泊洛沙姆407为基质制成脂质体凝胶剂;家兔分别肌注DS溶液、DS凝胶、DS脂质体及DS脂质体凝胶后,HPLC检测血药浓度;并以血浆肌酸激酶(CPK)变化和给药部位的组织病理改变对肌肉刺激性进行评价。结果制得DS脂质体粒径为40.2nm,平均包封率为81.2%;与DS溶液剂相比,肌注DS凝胶、DS脂质体及DS脂质体凝胶后tmax推迟,ρmax降低,MRT,t1/2延长,AUC增加,其中肌注DS脂质体凝胶后的tmax,MRT,t1/2和AUC相应延长了11.76,3.86,3.02和1.40倍,而ρmax仅为溶液组的36.2%,且该制剂能显著降低DS肌注后所致的CPK活性升高和病理性损伤。结论脂质体凝胶制剂是DS肌注给药的优良载体。

γ-氨基丁酸脂质体制备工艺的研究

采用醋酸钙梯度法制备γ-氨基丁酸脂质体,利用Berthelot分光光度法来检测γ-氨基丁酸(GABA)含量,通过正交实验确定优化的制备工艺条件为:药脂比为1∶20,卵磷脂与胆固醇的质量比为4∶1,醋酸钙浓度为0.12mol/L,孵育温度为50℃。所制备的脂质体平均包封率为91.4%。

盐酸法舒地尔脂质体的制备

目的:制备盐酸法舒地尔脂质体,探讨制备盐酸法舒地尔脂质体的最优处方及最佳制备工艺。方法:采用醋酸钙梯度法制备盐酸法舒地尔脂质体。以包封率为考察指标,在单因素实验基础上,通过正交试验优化最优处方及最佳制备工艺,采用紫外分光光度法对盐酸法舒地尔脂质体包封率进行测定。结果:最终确定制备盐酸法舒地尔脂质体的最优处方及最佳制备工艺为药脂比1:20、孵育时间1.5h、醋酸钙浓度100mmol/L、孵育温度45℃,所制备的盐酸法舒地尔脂质体包封率达80.94%。结论:醋酸钙梯度法制备盐酸法舒地尔脂质体方法可行,所制得载药脂质体包封率达到制剂学要求,且重现性好。

脂质体主动载药及其研究进展

脂质体主动载药法是在制备脂质体的传统方法上引入pH梯度法等而形成的一种新的制备方法,使得制备高包封率脂质体成为可能,较好地改变了难以制备水溶性药物脂质体的局面。本文主要对主动载药法的分类、起源及研究进展作一综述。

抗坏血酸有机锗倍半氧化物脂质体的制备及其质量评价

采用主动载药法制备抗坏血酸有机锗倍半氧化物脂质体,通过四因素三水平L9(34)正交试验优化制备工艺,评价其质量。采用醋酸钙梯度法考察影响抗坏血酸有机锗倍半氧化物脂质体包封率的不同因素,观察其形态并测定粒径。在4和25℃进行初步稳定性考察。确定最佳处方为60℃孵育3.5 h,磷脂与胆固醇比例12∶1,药物与磷脂质量比1∶20,有机相与水相体积比6∶1。以此最佳处方制得包封率高、性质较稳定的脂质体。脂质体的平均包封率为84.12%,平均粒径为111.6 nm。脂质体于4℃贮存时,渗漏率无显著变化,即4℃为脂质体较理想的储存条件。

青蒿琥酯脂质体的制备及抗肿瘤作用研究

目的制备青蒿琥酯脂质体,对其抗肿瘤作用进行研究。方法通过醋酸钙梯度法制备青蒿琥酯脂质体,考察制备的脂质体的粒径、物理稳定性、体外释放、体内药动学及药效学。结果制备的青蒿琥酯脂质体呈类球形,粒径为(134.8±2.654) nm,PDI为7.8×10-2±5.1×10-2,zeta电位为(-19.4±1.57) mV,包封率在95%左右。在4℃条件下放置40 d稳定性良好,体外释放实验表明青蒿琥酯脂质体具有缓释作用,药动学实验证明青蒿琥酯脂质体的体内消除半衰期(t1/2)和药时曲线下面积(AUC0-t)分别是青蒿琥酯溶液剂组的4.6倍和9.2倍。药效学实验表明与青蒿琥酯溶液剂组相比,青蒿琥酯脂质体组具有显著的抗肿瘤效果,且安全性良好。结论青蒿琥酯脂质体能显著延长青蒿琥酯的体内半衰期,提高生物利用度,增强青蒿琥酯的抗肿瘤效果。

阿魏酸载脂质体壳聚糖缓释微球的制备及体外研究

目的:将脂质体与壳聚糖微球两种载体结合,研究一种新的载脂质体壳聚糖微球口服缓释给药系统。方法:以阿魏酸为模型药物,醋酸钙梯度法制备脂质体后与壳聚糖溶液混合,离子凝聚法制备微球,分别对脂质体和微球进行表征,研究其体外释放性质。结果:脂质体的平均包封率为(79.97±0.54)%,平均粒径为(187.6±11.9)nm,Zeta电位为-12.67±1.78,4 h释药80%。再制备成壳聚糖微球后,药物以无定型态包于脂质体中,再完整地分散于壳聚糖微球中,平均包封率为(57.89±1.72)%,平均粒径为(1.17±0.15)mm。12 h时,脂质体自微球中释放出80.97%,药物释放出32.33%,明显低于壳聚糖微球78.98%的药物释放率。结论:载脂质体壳聚糖微球具有良好的体外缓释性能。

主动包载维替泊芬阳离子脂质体用于新生血管和肿瘤靶向光动力治疗

本研究设计了一种主动稳定包载维替泊芬(verteporfin,BPD)的新生血管及肿瘤靶向阳离子脂质体(cationic liposome with drug active-loaded in lumen,CLL),并对其体内外理化性质进行探究。采用醋酸钙梯度法对光敏剂BPD进行主动包载,并通过后插法加入阳离子脂质(2,3-二油酰基-丙基)-三甲胺[(2,3-dioleoy-loxy-propyl)-trimethylammonium,DOTAP]成功制备CLL。体外表征结果显示,CLL粒径约100 nm,电位在28 mV左右,体外稳定性较被动载药制剂显著增强。此外,包载于脂质体内腔的BPD通过分子间荧光共振能量转移(homo-FRET)可在递送过程中关闭光敏效应,使光毒性降低。细胞摄取及毒性实验结果证明,正电荷靶向可显著提高血管内皮细胞及肿瘤细胞中药物摄取量,CLL光动力药效显著增强。体内实验结果显示,相比于被动载药制剂,CLL血浆清除速率降低且在肿瘤中特异性蓄积增强。离体组织定量结果显示,CLL在正常组织中分布少,有利于提高其体内安全性。动物实验均按照北京大学医学部实验动物伦理委员会及国际动物实验的指导原则进行。上述实验结果说明,本研究成功构建了新型阳离子靶向脂质体,克服了被动载药制剂在肿瘤治疗中的局限性,使其光动力疗效显著提高。