利福平减弱NAPQI耗竭谷胱甘肽的HPLC分析

目的进一步研究小鼠肝微粒体温孵体系中利福平(RFP)减弱对乙酰氨基酚(APAP)毒性中间产物N-乙酸-对苯醌亚胺(NAPQI)耗竭谷胱甘肽(GSH)的保护作用。方法制备小鼠肝微粒体,体外温孵,HPLC测定APAP、RFP及相关代谢产物浓度变化。结果10.8%APAP(10μg/ml)温孵1h后代谢,分别加入RFP和GSH,23.0%、28.2%的APAP温孵1h代谢。RFP(50μg/ml)温孵1h后没明显变化,而在加入APAP温孵1h后开始减少,醌式利福平(QRFP)大量产生。结论RFP和GSH一样加速了APAP代谢,却减弱了APAP毒性中间产物致GSH耗竭的作用,RFP的结构中有两个酚羟基,很可能具有清除对乙酰氨基酚毒性中间产物的可能。

滴眼用利福平原料中有关杂质的检测

目的:建立滴眼用利福平原料中有关杂质(醌式利福平、3-甲酰利福霉素SV、N-氧化利福平)的高效液相色谱法(HPLC)检测方法。方法:以辛基硅烷键合硅胶为填充剂,采用乙腈-甲醇-磷酸二氢钾溶液(0.075 mol/L)-柠檬酸溶液(1.0 mol/L)(30∶30∶36∶4)为流动相,在波长254 nm处检测,检测流速为1.0 m L/min,分析原料中3种杂质的含量。结果:利福平及3种杂质的对照品在各自的浓度范围内呈现良好的线性关系(r^2=0.999 6~0.999 9,n=5),最低检出限范围介于0.1~0.3μg/m L。结论:该方法的检测灵敏度、精密度和准确度较高,线性关系良好,能够满足对滴眼用利福平原料质量的控制要求。