醛酮还原酶家族1成员B10过表达的宫颈癌细胞株Hela增殖、周期、侵袭和迁移观察

目的观察醛酮还原酶家族1成员B10(AKR1B10)过表达的宫颈癌细胞增殖、周期侵袭和迁移情况。方法将Hela细胞分为观察组和对照组,观察组用慢病毒系统转染AKR1B10过表达质粒,对照组转染空质粒。采用Western blotting法检测两组细胞AKR1B10、p53、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、波形蛋白(Vimentin)蛋白;采用MTT法、克隆形成实验观察两组细胞增殖情况,结果分别用OD570、形成细胞克隆数量表示;采用流式细胞术检测两组细胞周期分布;采用划痕实验观察两组细胞迁移情况,结果以划痕愈合百分比表示;采用Transwell小室实验观察两组细胞侵袭情况,结果以穿膜细胞数表示。结果观察组细胞AKR1B10蛋白相对表达量高于对照组(P<0.05)。MTT法测得继续培养24、48、72 h观察组细胞OD570均低于对照组(P均<0.05),克隆形成实验观察组克隆数量少于对照组(P<0.05)。与对照组相比,观察组G0~G1期细胞比例上升(P<0.05),G2~M期和S期细胞比例下降(P均<0.05)。观察组划痕愈合百分比低于对照组(P<0.05)。观察组穿膜细胞数低于对照组(P<0.05)。观察组p53蛋白相对表达量高于对照组(P<0.05),MMP-2和Vimentin蛋白相对表达量均低于对照组(P均<0.05)。结论 AKR1B10过表达可抑制宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭和迁移,阻滞细胞周期于G0~G1期,p53、MMP-2和Vimentin途径可能在其中发挥作用。

醛酮还原酶家族1成员B10的功能及在肿瘤中的作用研究进展

醛酮还原酶家族1成员B10(AKR1B10)是一种醛酮还原酶,主要功能是还原醛酮类羰基化合物、促进脂质合成和调节视黄酸代谢。AKR1B10主要在小肠和结肠中表达,在其他正常组织中低表达或不表达。近年来研究表明AKR1B10与肿瘤关系密切,在肿瘤的发生发展过程中发挥重要的作用,并且AKR1B10可能成为肿瘤诊断非常有价值的分子标记物以及靶向治疗肿瘤的新靶点。本文就AKR1B10的分子结构、功能、与肿瘤的关系以及在临床的应用等相关最新研究作一综述。

醛酮还原酶家族1成员B10(AKR1B10)通过激活Wnt/β-catenin通路促进乳腺癌细胞增殖

目的探讨醛酮还原酶家族1成员B10(AKR1B10)对乳腺癌细胞增殖的影响及其机制。方法在乳腺癌MCF-7细胞过表达AKR1B10、在BT-20细胞敲低AKR1B10,分别建立过表达以及敲低细胞系。利用CCK-8增殖实验检测过表达与敲低AKR1B10对乳腺癌细胞增殖的影响。实时荧光定量PCR检测乳腺癌组织及配对正常组织AKR1B10 mRNA水平,Western blot法检测乳腺癌组织、过表达及敲低AKRB10的乳腺癌细胞AKR1B10、β联蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、存活蛋白(survivin)、c-Myc的蛋白水平。结果乳腺癌组织AKR1B10表达增加。过表达AKR1B10后,MCF-7乳腺癌细胞增殖加快,β-catenin、cyclin D1、c-Myc、survivin蛋白表达增加;敲低AKR1B10后,BT-20乳腺癌细胞增殖变慢,β-catenin、cyclin D1、c-Myc、survivin蛋白表达下降。结论AKR1B10在乳腺癌中高表达并通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进乳腺癌细胞增殖。

兔抗醛-酮还原酶家族1成员B10(AKR1B10)多克隆抗体的制备及鉴定

目的制备兔抗醛-酮还原酶家族1成员B10(AKR1B10)多克隆抗体,并鉴定其特异性。方法应用逆转录PCR法扩增AKR1B10全基因,将扩增产物连接到原核表达载体p ET-15b上,构建重组质粒p ET-15b-AKR1B10,将其转化至大肠杆菌E.coli DH5α中。用异丙基硫代β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导其表达,表达产物经SDS-PAGE分析鉴定出阳性者进行克隆,扩大培养,提取重组蛋白,用His-tag纯化柱纯化重组蛋白。将纯化的重组蛋白皮下注射到新西兰白兔,加强免疫得到抗血清。用AKR1B10重组蛋白制备抗体纯化柱,从抗血清中纯化出抗AKR1B10多克隆抗体,并进行SDS-PAGE、ELISA、Western blot法鉴定。结果成功构建了重组质粒p ET-15b-AKR1B10,并获得高纯度的重组蛋白His-Tag-AKR1B10,制备的多克隆抗体相对特异性地识别AKR1B10。结论兔抗AKR1B10多克隆抗体制备成功,特异性较好。

桂枝茯苓胶囊联合戈舍瑞林对子宫肌瘤大鼠模型醛酮还原酶1C3和内分泌的影响

目的观察桂枝茯苓胶囊联合戈舍瑞林对子宫肌瘤大鼠模型醛酮还原酶1C3(AKR1C3)和内分泌的影响。方法将36只7周龄雌性白细胞介素-2受体共同Υ链(IL2RG)大鼠随机分为空白对照组、模型对照组和联合治疗组,每组各12只。模型对照组和联合治疗组通过雌孕激素药物建立子宫肌瘤模型。造模结束后第2天,空白对照组和模型对照组予蒸馏水5 mL灌胃,联合治疗组予桂枝茯苓胶囊混悬液0.70 g/(kg·d)+戈舍瑞林1.25 mg/(kg·d)灌胃,连续6周。采用酶联免疫吸附法测定各组大鼠血清雌二醇、孕酮和催乳素水平,实时荧光定量聚合酶链式反应法检测AKR1C3 mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测Ⅰ型胶原、转化生长因子β(TGF-β)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。结果与空白对照组相比,模型对照组雌二醇、孕酮和催乳素含量均升高(P<0.05);与模型对照组相比,联合治疗组雌二醇、孕酮和催乳素含量降低(P<0.05)。与空白对照组相比,模型对照组AKR1C3 mRNA表达含量升高(P<0.05);与模型对照组相比,联合治疗组AKR1C3 mRNA表达含量降低(P<0.05)。与空白对照组相比,模型对照组Ⅰ型胶原、PAI-1和TGF-β蛋白表达均升高(P<0.05);与模型对照组相比,联合治疗组Ⅰ型胶原、PAI-1和TGF-β蛋白表达均降低(P<0.05)。与空白对照组相比,模型对照组Caspase-3和Bax蛋白表达降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05);与模型对照组相比,联合治疗组Caspase-3和Bax蛋白表达升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。结论桂枝茯苓胶囊联合戈舍瑞林能降低子宫肌瘤大鼠雌二醇、孕酮和催乳素水平,抑制AKR1C3表达,具有抗增殖和促凋亡的作用,可抑制子宫肌瘤生长。

醛酮还原酶家族1成员B10通过p27/p-Rb信号通路参与肝癌细胞周期调控

目的醛酮还原酶家族1成员B10(AKR1B10)与肝癌的发病机制、早期诊断和预后密切相关,故探讨AKR1B10在肝癌细胞中对细胞周期的影响及其作用机制。方法采用慢病毒LV-AKR1B10-shRNA感染HepG2细胞,或AKR1B10抑制剂依帕司他处理HepG2细胞,蛋白质印迹法(Western blot)及实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)检测AKR1B10的表达水平;通过测定还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸在340 nm处吸光度值的下降检测AKR1B10的活性;CCK-8法及流式细胞术检测AKR1B10低表达及不同浓度依帕司他处理HepG2细胞后对细胞增殖和细胞周期的影响;Western blot检测HepG2细胞中p-Rb,细胞周期蛋白D1、E1,p27的蛋白表达水平;两样本均数采用独立样本t检验。结果AKR1B10在肝癌细胞中表达显著升高,与正常肝细胞相比,HepG2细胞中AKR1B10蛋白相对表达水平为6.71±1.11(P=0.012)。依帕司他对AKR1B10的酶活性有明显抑制作用,呈剂量依赖性特点。HepG2细胞中AKR1B10基因被有效沉默,不同浓度AKR1B10抑制剂依帕司他处理HepG2细胞24、48、72 h后均可抑制细胞增殖,促进G0/G1细胞周期阻滞,使p-Rb、周期蛋白D1、E1表达降低,周期素依赖性激酶抑制蛋白p27表达升高。结论抑制AKR1B10表达和活性可通过p27/p-Rb通路,促进HepG2细胞G0/G1细胞周期阻滞。

醛酮还原酶1成员B1(AKR1B1)激活NF-κB通路诱导小鼠BV-2小胶质细胞活化抑制视网膜神经节细胞活性

目的探讨醛酮还原酶1成员B1(AKR1B1)在调控小胶质细胞极化中的机制及其对视网膜神经节细胞(RGC)活性的影响。方法利用脂多糖(LPS)诱导BV-2小胶质细胞极化,分别利用AKR1B1小干涉RNA(siRNA)和抑制剂泊那司他(ponalrestat/Statil)作用BV-2细胞;实时定量PCR检测BV-2小胶质细胞AKR1B1、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、环加氧酶2(COX2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA表达,ELISA检测BV-2小胶质细胞培养上清液TNF-α、IL-1β含量。采用BV-2条件培养基处理原代RGC,免疫荧光细胞化学染色检测RGC脑特异性同源盒蛋白3a(Brn-3a)的表达以确定RGC活性,TUNEL染色检测RGC凋亡;Western blot法检测RGC核因子κBp65(NF-κBp65)、核因子κB抑制物激酶(IKK)蛋白磷酸化情况。结果LPS诱导BV-2细胞中TNF-α、IL-1β、COX2和iNOS的mRNA表达增加,培养液上清中TNF-α、IL-1β含量增加。BV-2细胞条件培养基导致RGC活力降低、凋亡增加;敲低AKR1B1后,可阻断BV-2细胞M1型极化,恢复RGC活力;敲低AKR1B1可阻断LPS诱导的IKK磷酸化和NF-κBp65的入核。结论AKR1B1可通过激活NF-κB通路诱导小胶质细胞的活化,进而降低RGC的活力并促进其凋亡。

醛酮还原酶1B10与肿瘤发展的研究进展

醛酮还原酶1B10(AKR1B10)是醛酮还原酶(AKR)超家族的成员之一,参与了多种肿瘤的发生及发展,是一种新型的肿瘤标志物。近年来,关于AKR1B10抑制剂的研究也越来越多,并有望成为新型的抗癌药物。本文主要就AKR1B10的结构及功能、促进不同肿瘤发生发展的机制、作为血清肿瘤标志物的应用、耐药性及其抑制剂的应用等方面进行综述。

miR-568通过下调AKR1B10表达影响胶质母细胞瘤细胞的增殖和凋亡

目的 探讨微小RNA-568(miR-568)对胶质母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法 培养正常星形胶质细胞HA1800及胶质母细胞瘤细胞系(U251、T98G和SHG44)购自中国科学院上海细胞库,qRT-PCR检测细胞中miR-568和醛酮还原酶家族1成员B10(AKR1B10)mRNA表达,蛋白质印迹法(Western blotting)检测AKR1B10蛋白表达。以U251细胞为研究对象,构建上调miR-568或下调AKR1B10的U251细胞,MTT、流式细胞仪和Western blotting实验检测细胞增殖、凋亡及细胞中CyclinD1、p21、Bcl-2和Bax蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-568与AKR1B10调控关系。结果 胶质母细胞瘤细胞系(U251、T98G和SHG44)及HA1800细胞中miR-568表达分别为(1.01±0.09)、(0.39±0.03)、(0.58±0.05)及(0.46±0.04),AKR1B10 mRNA表达分别为(0.98±0.08)、(2.45±0.2)、(2.16±0.21)及(2.37±0.23),AKR1B10蛋白表达分别为(0.12±0.03)、(0.61±0.05)、(0.51±0.04)及(0.59±0.05),胶质母细胞瘤细胞系(U251、T98G和SHG44)中miR-568表达低于HA1800细胞(P<0.05),AKR1B10 mRNA和蛋白表达高于HA1800细胞(P<0.05)。上调miR-568或下调AKR1B10后,U251细胞增殖活性[(0.61±0.06)、(0.69±0.06)]、CyclinD1[(0.32±0.03)、(0.35±0.03)]和Bcl-2蛋白表达[(0.29±0.03)、(0.32±0.03)]降低(P<0.05),U251细胞凋亡率[(22.41±2.15)%、(21.26±2.14)%]、p21[(0.58±0.05)、(0.56±0.05)]和Bax蛋白表达[(0.72±0.07)、(0.67±0.07)]升高(P<0.05)。miR-568靶向结合并负调控AKR1B10。上调AKR1B10逆转了上调miR-568对U251细胞增殖和凋亡的影响。结论 上调miR-568通过靶向负调控AKR1B10抑制胶质母细胞瘤细胞增殖,并促进其凋亡。

AKR1B10基因沉默对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探索肝细胞癌(HCC)中醛酮还原酶家族1成员B10(AKR1B10)的生物学功能和相关的病理机制。方法通过CCLE数据库分析正常肝细胞与HCC细胞系中AKR1B10 mRNA的表达,UALCAN以及Oncomine数据库分析癌旁组织与HCC组织中AKR1B10 mRNA的表达,Western Blot法验证HCC患者癌组织与癌旁组织中AKR1B10蛋白表达差异。使用慢病毒分别敲减HepG2及Huh7细胞中的AKR1B10,分为对照组和AKR1B10敲减组(shAKR1B101#、shAKR1B102#)。采用AnnexinV-APC/PI双染法、细胞克隆实验、皮下移植肿瘤的方法检测敲减AKR1B10后HCC细胞凋亡、克隆形成、皮下成瘤体积的变化。过氧化物敏感性荧光探针DCFH-DA以及Western Blot检测敲减AKR1B10后HCC细胞内活性氧(ROS)以及p-ATMser1981、γ-H2AX、c-Caspase-3和c-RARP等蛋白的变化。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验。结果CCLE数据库提示AKR1B10 mRNA在HCC细胞中的表达明显高于正常肝细胞;Oncomine数据库显示,与癌旁组织相比,HCC组织中AKR1B10 mRNA的表达增加了10倍以上;UALCAN数据库提示AKR1B10基因在HCC组织中高表达;本研究的6例HCC患者中AKR1B10在HCC组织中的表达高于癌旁组织。与对照组相比,AKR1B10敲减组中HCC细胞的克隆形成能力明显下降(P值均<0.001),细胞凋亡率明显增加(P值均<0.001)。与对照组相比,AKR1B10敲减组ROS的水平升高,DNA损伤指标p-ATMser1981、γ-H2AX蛋白,细胞凋亡指标c-Caspase-3和c-RARP蛋白增加。此外,在BALB-c/Nude小鼠模型中,从异体移植后第13天开始,与对照组相比,AKR1B10敲减组肿瘤体积明显缩小(P值均<0.05)。结论AKR1B10可能是治疗HCC的有效治疗靶标。

AKR1B10联合GPC-3在肝细胞癌免疫组化诊断中的应用

目的探讨AKR1B10和GPC-3联合应用对提高肝细胞癌(HCC)免疫组化诊断敏感性和特异性的价值。方法制备75例HCC组织芯片作为训练集,进行AKR1B10和GPC-3免疫组化检测,建立Logistic回归诊断模型,以此构建ROC曲线(受试者工作特征曲线),利用其曲线下面积(AUC)对单个指标和联合指标的敏感性和特异性进行评估。将Logistic回归诊断模型用于200例HCC的测试集中,检测其有效性。结果训练集中,AKR1B10和GPC-3的AUC分别为0.773和0.800,联合诊断后的AUC提高至0.931;AKR1B10和GPC-3的敏感性分别为56%和61.3%,特异性均为98.7%,两者联合后的敏感性提高至88.0%,特异性为97.3%。测试集中,AKR1B10联合GPC-3对HCC诊断的敏感性和特异性分别为97.0%和96.5%。结论AKR1B10联合GPC-3明显提高HCC免疫组化诊断的敏感性和特异性,可在常规病理检查中合理组合使用。

AKR1B10表达与乳腺癌新辅助化疗的关系

目的检测AKR1B10在乳腺癌新辅助化疗前后的表达情况,分析其表达水平与新辅助化疗疗效的相关性,探讨AKR1B10蛋白是否与阿霉素类化疗药物耐药性相关,评价AKR1B10是否可以作为乳腺癌个体化化疗方案制定的预测指标。方法回顾性分析在郴州市第一人民医院确诊为乳腺癌并接受阿霉素类药物新辅助化疗的71例乳腺癌患者的临床资料。免疫组化检测新辅助化疗前、后AKR1B10蛋白的表达情况。对比分析AKR1B10与乳腺患者临床病理资料、新辅助化疗疗效的关系,MTT法检测阿霉素类药物处理对MCF-7/Vector和MCF-7/AKR1B10细胞增殖的抑制率。结果 (1)在71例乳腺癌患者新辅助化疗前组织样本中,AKR1B10的阳性表达率达到90.1%。化疗前AKR1B10的表达水平与肿块大小、淋巴结转移存在相关性(P<0.05),与年龄、远处转移之间不存在相关性(P>0.05);(2)盐酸吡柔比星对稳定表达AKR1B10的乳腺癌细胞系MCF-7/AKR1B10与对照组细胞增殖的抑制作用无显著差异。结论乳腺癌患者的AKR1B10表达水平与肿瘤大小、淋巴结转移存在相关性,与乳腺癌患者接受阿霉素类药物新辅助化疗的疗效之间无相关性。

AKR1B10蛋白在口腔癌中的研究进展

醛酮还原酶家族1成员B10 (AKR1B10)是一种在口腔癌组织中高表达,且与其不良预后相关的氧化还原酶。AKR1B10在正常胃肠道上皮组织中高表达,在其他正常组织中低表达,生理状态下具有解毒作用。有研究发现AKR1B10在乳腺癌、鼻咽癌、肝癌中表达上调,而在结直肠癌、胃癌中表达下调,且与其不良预后相关。口腔癌是全球最流行的恶性肿瘤之一,其预后差。局部晚期口腔癌极易发生局部复发及远处转移。该文就AKR1B10蛋白在口腔癌中作用的研究进展做一综述。

醛酮还原家族1B10蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的:研究醛酮还原家族1B10(AKR1B10)蛋白在非小细胞肺癌中的表达情况及其与患者临床病理特征间的关系。方法:应用免疫组化法检测90例非小细胞肺癌组织及其配对的癌旁组织中AKR1B10的表达。结果:AKR1B10在肺鳞状细胞癌(鳞癌)组织中的阳性表达率为60.5%(23/38),在腺癌组织中阳性表达率为4.3%(2/46),而在癌旁非肿瘤组织中无表达。肿瘤组织中,AKR1B10蛋白表达情况与患者的性别及肿瘤病理类型有关(P<0.05),而与患者的年龄、肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移及肿瘤分期等临床病理特征间无相关性(P>0.05)。结论:AKR1B10蛋白在肺鳞癌组织中呈高表达,考虑其可能在肺鳞癌的发生和发展中起重要作用,可作为支气管肺鳞癌潜在的诊断标志物及治疗靶点。

HCV核心蛋白调控miR-486-5p/AKR1B10促进肝癌细胞生长的实验研究

目的:探讨丙型肝炎病毒核心蛋白(HCVc)对肝癌HepG2细胞增殖凋亡和miR-486-5p以及醛酮还原家族1B10(AKR1B10)蛋白表达的影响。方法:以重组腺病毒Ad-GFP-HCVc感染HepG2细胞,采用RT-PCR和Western blot检测HepG2细胞HCVc表达,MTT法和流式细胞术分别检测HepG2细胞增殖和凋亡情况,qRT-PCR检测HepG2细胞中miR-486-5p表达,Western blot检测AKR1B10蛋白表达;以miR-486-5p抑制剂转染HepG2细胞,qRT-PCR和Western blot分别检测HepG2细胞中miR-486-5p和AKR1B10蛋白表达;采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-486-5p和AKR1B10的靶向关系。结果:Ad-GFP-HCVc感染后,HepG2细胞中HCVc表达升高;与阴性对照组相比,HCVc组细胞增殖活力和AKR1B10蛋白表达明显升高,而细胞凋亡率和miR-486-5p表达明显降低(P<0.05);与anti-miR-NC组相比,转染miR-486-5p抑制剂的HepG2细胞miR-486-5p表达明显降低,而AKR1B10蛋白表达明显升高(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实miR-486-5p可与AKR1B10靶向结合。结论:HCVc可能通过下调miR-486-5p表达引起其靶基因AKR1B10表达升高,促进HepG2细胞异常生长。

EBV阳性与阴性NPC细胞中AKR1B10的差异表达及生物学意义

研究EB病毒(Epstein⁃Barr virus,EBV)阳性与阴性鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞中醛酮还原酶家族1成员B10(AKR1B10)的差异表达及生物学意义。收集NPC组织并检测EBV感染情况及AKR1B10表达水平,比较EBV阳性与阴性NPC组织中AKR1B10表达水平的差异;培养EBV阳性的NPC细胞株HK⁃1和C666⁃1、EBV阴性的NPC细胞株CNE⁃1及CNE⁃2,检测AKR1B10的表达水平。HK⁃1和C666⁃1进行分组,给予10μmol/L、20μmol/L AKR1B10抑制剂处理,20μmol/L AKR1B10抑制剂联合对照溶剂或20μmol/Lβ⁃catenin激动剂处理,检测细胞增殖水平、侵袭数目及c⁃myc、MMP2、MMP9的mRNA表达水平,AKR1B10、总β⁃连环蛋白(β⁃catenin)、核β⁃catenin的蛋白表达水平。结果显示HK⁃1和C666⁃1细胞中AKR1B10的蛋白表达水平高于CNE⁃1及CNE⁃2;10μmol/L、20μmol/L AKR1B10抑制剂组HK⁃1和C666⁃1细胞的增殖水平、侵袭数目、c⁃myc、MMP2、MMP9的mRNA表达水平、核β⁃catenin的蛋白表达水平低于对照组(P<0.05),总β⁃catenin的蛋白表达水平与对照组比较无差异(P>0.05);β⁃catenin激动剂+AKR1B10抑制剂组HK⁃1和C666⁃1细胞的增殖水平、侵袭数目、c⁃myc、MMP2、MMP9的mRNA表达水平、总β⁃catenin及核β⁃catenin的蛋白表达水平高于溶剂+AKR1B10抑制剂组(P<0.05)。可以得出结论,EBV阳性NPC细胞中AKR1B10表达水平增加通过激活β⁃catenin入核的方式促进细胞增殖和侵袭。

老年鼻咽癌EB病毒感染及其对癌组织MUC16和AKR1B10表达的影响

目的探究老年鼻咽癌EB病毒(EBV)感染及其对癌组织黏蛋白16(MUC16)和醛酮还原酶家族1成员B10(AKR1B10)表达的影响。方法选择中南大学湘雅医学院附属海口医院2019年9月-2021年9月收治的老年鼻咽癌患者89例为研究组,另随机选择同期因慢性鼻咽炎进行活检的老年患者70例为对照组。采用荧光定量聚合酶链反应检测两组患者全血EB病毒核酸载量,采用免疫组织化学法检测两组患者组织标本中MUC16、AKR1B10蛋白表达情况,比较两组检测结果差异和研究组中不同EBV载量患者检测结果差异。结果研究组与对照组EBV感染率分别为49.44%和5.71%,研究组EBV阳性患者中EBV核酸载量主要集中于500~4999 copies/ml(65.91%);研究组组织标本中MUC16高表达率低于对照组,而AKR1B10高表达率高于对照组(P<0.05);研究组患者组织标本中AKR1B10高表达率为92.13%,高于对照组的12.86%(P<0.05);研究组EBV阳性患者组织标本MUC16表达率低于EBV阴性患者,而AKR1B10高表达率高于EBV阴性患者(P<0.05)。结论MUC16表达下调和AKR1B10表达上调可能与老年鼻咽癌的发生有关,且EBV感染可能导致老年鼻咽癌患者MUC16、AKR1B10表达水平进一步下调或上调。

miR-185-5p靶向AKR1C1抑制肺癌细胞的迁移和侵袭

目的观察miR-185-5p对肺癌细胞迁移、侵袭的影响,分析酮还原酶1家族成员C1(AKR1C1)在miR-185-5p调控肺癌细胞迁移和侵袭中的作用。方法RT-qPCR检测miR-185-5p在组织样本(人肺癌及对应癌旁组织)、细胞系(人肺上皮细胞系BEAS-2B和肺癌细胞系A549、H460)中的表达。按照处理方式不同将A549细胞分为miR-NC组(转染miR-NC)、miR-185-5p组(转染miR-185-5p)、miR-185-5p+pcDNA组(共转染miR-185-5p和pcDNA)、miR-185-5p+pcDNA-AKR1C1组(共转染miR-185-5p和pcDNA-AKR1C1);Transwell和划痕实验检测各组A549细胞迁移和侵袭;在线预测网站Starbase预测miR-185-5p的下游靶基因;双荧光素酶报告基因实验检测A549细胞荧光素酶活性;蛋白免疫印迹实验检测各组A549细胞中AKR1C1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的蛋白表达。结果与癌旁组织比较,肺癌组织中miR-185-5p的表达显著降低(P<0.001);与BEAS-2B细胞比较,A549和H460细胞中miR-185-5p的表达亦显著降低(均P<0.001);与miR-NC组比较,miR-185-5p组A549细胞的miR-185-5p表达显著升高,迁移和侵袭细胞数及划痕愈合率均显著降低(均P<0.001),MMP-2、MMP-9蛋白的表达均显著降低(均P<0.001)。Starbase预测显示miR-185-5p与AKR1C1之间存在连续的互补结合序列;与miR-NC组比较,miR-185-5p组AKR1C1-WT细胞的荧光素活性显著降低(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-185-5p组细胞中AKR1C1蛋白表达显著降低(P<0.05);与anti-miR-NC组比较,anti-miR-185-5p组细胞中AKR1C1蛋白表达显著升高(P<0.05)。与癌旁组织比较,肺癌组织中AKR1C1 mRNA和蛋白表达均显著升高(均P<0.001);与BEAS-2B细胞比较,A549细胞中AKR1C1 mRNA和蛋白表达均显著升高(均P<0.001)。与miR-185-5p+pcDNA组比较,miR-185-5p+pcDNA-AKR1C1组miR-185-5p表达显著降低(P<0.001)、迁移和侵袭细胞数及划痕愈合率均显著升高(均P<0.001)、MMP-2和MMP-9的蛋白表达均显著升高(均P<0.001)。结论miR-185-5p可抑制肺癌细胞的迁移、侵袭,该作用与miR-185-5p靶向负性调控AKR1C1有关。

AKR1B10抑制剂增强索拉非尼对小鼠肝癌异种移植瘤的抑制作用

目的探讨AKR1B10抑制剂联合索拉非尼对小鼠肝癌异种移植瘤生长的抑制作用。方法建立裸鼠HepG2肝癌细胞异种移植瘤模型,随机分为4组:对照组、依帕司他单药组、索拉非尼单药组、联合治疗组;比较各组瘤体体积、瘤体质量、给病组和对照组瘤体平均质量比值、裸鼠体质量变化情况评价疗效,免疫组织化学法检测瘤体组织中Ki-67的表达评估肿瘤细胞增殖情况。多组间比较采用单因素方差分析,两样本均数用t检验,多样本率用χ^2检验。结果治疗前后移植瘤体积差值在对照组、依帕司他单药、索拉非尼单药、联合治疗组分别为(238.940±39.813)mm^3、(124.991±84.670)mm^3、(-26.111±11.518)mm^3、(-54.072±17.673)mm^3,F=37.048,P<0.001;瘤体质量分别为(0.273±0.140)g、(0.158±0.078)g、(0.079±0.054)g、(0.045±0.024)g,F=16.594,P<0.001,差异均有统计学意义。给药组与对照组肿瘤平均质量比值分别为100%、57.9%、28.9%、16.5%。Ki-67阳性率分别为23.295%±6.218%、13.503%±3.392%、7.325%±2.257%、4.664%±1.189%,(χ^2=822.203,P<0.001),差异有统计学意义。依帕司他单药组治疗前后瘤体体积差值(t=-3.579,P=0.002)、Ki-67阳性率比较(t=-10.003,P<0.001)明显低于对照组,差异均有统计学意义。联合治疗组治疗前后瘤体体积差值(t=2.056,P=0.025)、瘤体质量(t=2.101,P=0.043)、Ki-67阳性率(t=-2.850,P=0.005)明显低于索拉非尼单药组,差异均有统计学意义。给药组与对照组相比,裸鼠体质量均有一定下降,但依帕司他组与对照组(t=-1.599,P=0.262)、联合治疗与索拉非尼组(t=-0.051,P=0.96)相比,体质量下降均无统计学意义。结论AKR1B10抑制剂可增强索拉非尼对肝癌异种移植瘤的抑制作用。

利用TCGA数据库分析AKR1B10在肝癌中的表达及临床意义

目的研究醛酮还原酶家族1成员B10(AKR1B10)在肝癌中的表达情况及临床价值,并探讨AKR1B10参与肝癌发生、发展的机制。方法自2019年10月从肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库中下载肝癌数据集,获取AKR1B10基因表达谱及临床信息。分析424例样本中AKR1B10的表达与肝癌预后及临床病理特征之间的相关性。采用基因富集化分析(GSEA)方法预测AKR1B10在肝癌中的调控通路。使用SPSS22.0进行统计分析。肝癌组织与癌旁组织表达差异采用t检验。临床病理参数相关性分析,组间比较采用χ^(2)检验。单因素和多因素分析采用Cox回归模型。P<0.05差异有统计学意义。结果在TCGA数据库中,AKR1B10在肝癌组织中高表达,高表达AKR1B10患者总体生存期明显低于AKR1B10低表达患者(P=0.006)。多因素分析进一步显示AKR1B10表达状态是影响肝癌预后的独立危险因素(P=0.003)。AKR1B10表达富集到Toll样受体信号通路、NOD样受体信号通路、氨酰tRNA生物合成、谷胱甘肽代谢等基因集。结论肝癌组织AKR1B10 mRNA高表达是一种预后不良的危险因素。RT-PCR可快速检测肝癌组织中其表达情况来评估患者预后,是预测肝癌患者预后较好的新指标。