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小鼠釉基质丝氨酸蛋白酶基因打靶载体的构建及鉴定
1
作者
姜秋
聂代邦
+2 位作者
欧阳红生
谢艳林
孙宏晨
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期977-980,共4页
目的:对牙釉质丝氨酸蛋白酶(EMSP1)基因进行体外扩增,构建基因打靶载体,利用基因打靶技术建立转基因动物模型,研究EMSP1生理功能和病理学意义。方法:根据EMSP1的DNA序列,采用Oligo6.0软件设计两对引物,以129品系小鼠基因组DNA为模板,分...
目的:对牙釉质丝氨酸蛋白酶(EMSP1)基因进行体外扩增,构建基因打靶载体,利用基因打靶技术建立转基因动物模型,研究EMSP1生理功能和病理学意义。方法:根据EMSP1的DNA序列,采用Oligo6.0软件设计两对引物,以129品系小鼠基因组DNA为模板,分别扩增长为5 000 bp和1 700 bp片段作为同源长短臂。将其分别插入通用型基因敲除载体pSSC-9的正向筛选基因neo两侧,用PCR方法、限制性酶切和DNA序列分析进行鉴定。结果:采用双酶切鉴定,阳性重组克隆分别切出5000 bp和1700 bp片段,表明长短臂已克隆于载体中。DNA序列分析表明,成功构建EMSP1基因打靶载体pSSC-9-EMSP1。结论:成功构建小鼠EMSP1基因打靶载体。
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关键词
釉质丝氨酸蛋白酶
小鼠
基因敲除
打靶载体
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职称材料
题名
小鼠釉基质丝氨酸蛋白酶基因打靶载体的构建及鉴定
1
作者
姜秋
聂代邦
欧阳红生
谢艳林
孙宏晨
机构
吉林大学口腔医院儿童牙病科
吉林大学畜牧兽医学院动物生物技术系
重庆市石柱县石柱中学
出处
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期977-980,共4页
基金
吉林大学创新基金资助课题(419070200083)
文摘
目的:对牙釉质丝氨酸蛋白酶(EMSP1)基因进行体外扩增,构建基因打靶载体,利用基因打靶技术建立转基因动物模型,研究EMSP1生理功能和病理学意义。方法:根据EMSP1的DNA序列,采用Oligo6.0软件设计两对引物,以129品系小鼠基因组DNA为模板,分别扩增长为5 000 bp和1 700 bp片段作为同源长短臂。将其分别插入通用型基因敲除载体pSSC-9的正向筛选基因neo两侧,用PCR方法、限制性酶切和DNA序列分析进行鉴定。结果:采用双酶切鉴定,阳性重组克隆分别切出5000 bp和1700 bp片段,表明长短臂已克隆于载体中。DNA序列分析表明,成功构建EMSP1基因打靶载体pSSC-9-EMSP1。结论:成功构建小鼠EMSP1基因打靶载体。
关键词
釉质丝氨酸蛋白酶
小鼠
基因敲除
打靶载体
Keywords
enamel matrix serine proteins
mice gene knockout
targeting vector
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
小鼠釉基质丝氨酸蛋白酶基因打靶载体的构建及鉴定
姜秋
聂代邦
欧阳红生
谢艳林
孙宏晨
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2006
0
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