富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1、E-Cadherin和EGFR在胃癌中的表达和临床意义

目的探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)、上皮钙黏蛋白(E-Cadherin)和表皮生长因子受体(EGFR)在胃癌中的表达和及其与临床病理特征的相关性。方法选取50例胃癌患者作为研究对象,并选取正常胃黏膜组织50例作为对照。用免疫组化方法检测两组患者卵巢组织中的LRIG1、E-Cadherin和EGFR的表达,分析LRIG1、E-Cadherin和EGFR的阳性表达率在胃癌患者不同临床病理特征中的差异。采用spearson秩相关分析LRIG1,E-Cadherin和EGFR的阳性表达率的相关性。结果胃癌组的LRIG1、E-Cadherin的阳性表达率显著低于正常胃黏膜组,胃癌组的EGFR的阳性表达率显著高于正常胃黏膜组。胃癌中LRIG1、E-Cadherin和EGFR阳性表达率与临床分期、病理分级和淋巴结转移有关(P<0.05),而与年龄、组织学类型无关(P>0.05)。LRIG1、E-Cadherin和EGFR在胃癌患者中的阳性表达率具有相关性,共同调控参与胃癌的发生和发展。结论 LRIG1、E-Cadherin在胃癌中低表达和EGFR在胃癌中高表达,与胃癌的进展和转移相关。

富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1基因特异性RNA干扰表达载体的构建、鉴定和稳定株筛选(英文)

背景:有研究表明富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(leucine-rich repeats and immunoglobulin-like domains1,LRIG1)基因在神经胶质瘤细胞中呈低表达,LRIG1基因过表达后对神经胶质瘤细胞的LRIG1mRNA和蛋白表达均明显增强和抑制其生物学行为,但却很少有研究从阻断LRIG1基因的表达的角度进行论证。目的:构建针对LRIG1基因的特异性RNA干扰质粒,稳定转染人脑胶质瘤GL15细胞系,观察其对目的基因LRIG1表达的影响。方法:根据GenBank提供的LRIG1基因序列设计2条RNA干扰序列,命名为LRIG1-shRNA1和LRIG1-shRNA2,并设计1条非特异性序列作为阴性对照,命名为pGenesil2-negativeshRNA。合成各自的寡核苷酸链,退火后与pGenesil2质粒载体连接,转化扩增后测定序列。用不同浓度的G418作用于GL15细胞确定G418对GL15细胞的筛选浓度。将3种重组表达载体转染GL15细胞,G418筛选后挑单克隆并扩增获得稳定株。Western blot检测LRIG1蛋白的表达。结果与结论:构建的重组pGenesil2-LRIG1-shRNA质粒经限制性酶切及DNA测序分析证明其序列插入正确。转染pGenesil2-LRIG1-shRNA1(LRIG11)细胞和pGenesil2-LRIG1-shRNA2(LRIG12)细胞LRIG1蛋白表达水平较阴性对照组pGenesil2-negativeshRNA分别下降47.9%(P<0.01)和32.8%(P>0.05)。结果证实,实验成功构建了针对LRIG1基因的特异性shRNA表达载体pGenesil2-LRIG1-shRNA1,其转染GL15细胞后可抑制LRIG1的表达。

多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1对U251胶质瘤细胞基因表达的影响

目的运用基因芯片技术研究多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(leucine-rich repeats and immunoglobulin-like domains 1,LRIG1)对U251胶质瘤细胞基因表达的影响。方法提取正常U251细胞和转染了LRIG1的U251细胞的RNA,并反转录为cDNA,加用cy3、cy5染色标记后使用Roche-Nimble Gen人全基因组表达谱芯片检测LRIG1对U251胶质瘤细胞基因表达的影响。结果转染LRIG1的U251细胞相对U251细胞,差异基因为808条,其中上调基因有397条,下调基因有411条,包括细胞骨架、细胞增殖、细胞凋亡、生长代谢等相关基因。结论基因芯片能够高效地初步检测差异基因表达,有助于揭示LRIG1作用于胶质瘤细胞的分子机制。

富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样结构域1(LRIG1)增强顺铂诱导的人垂体瘤细胞凋亡

目的探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白结构域1(LRIG1)在人垂体瘤组织中表达情况,并观察过表达LRIG1后对顺铂(DDP)诱导的垂体瘤细胞增殖、凋亡的影响。方法采用免疫组织化学染色法检测45例垂体瘤患者肿瘤组织及瘤旁组织中的LRIG1表达,分析LRIG1阳性表达与患者临床病理指标的相关性。选取原代分离培养的人垂体瘤细胞,采用脂质体介导的基因转染技术将LRIG1基因过表达质粒p EGFP-N1-LRIG1转染进细胞中,筛选LRIG1过表达的细胞,同时选取转染空质粒p EGFP-N1的细胞作为对照组。两组细胞均经20μg/m L DDP诱导48 h,流式细胞术检测细胞凋亡情况,平板克隆实验检测细胞的增殖能力,Western blot法检测细胞中凋亡相关蛋白BAX、胱天蛋白酶3(caspase-3)和Bcl2的相对表达量。结果垂体瘤患者肿瘤组织中LRIG1阳性率显著低于瘤旁组织,且LRIG1在侵袭性肿瘤表达显著降低。与对照组相比,过表达LRIG1后,DDP诱导的细胞凋亡率显著增加、细胞增殖显著降低、BAX、caspase-3的水平显著增加,而Bcl2水平显著降低。结论过表达LRIG1增加DDP诱导的人垂体瘤细胞凋亡并抑制其增殖。

亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域1、存活蛋白在胶质瘤中的表达及对患者远期预后的影响

目的探讨亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域1(LRIG1)、存活蛋白(survivin)在胶质瘤中的表达及对患者远期预后的影响。方法选取77例胶质瘤患者,取其胶质瘤组织及相应的癌旁组织,采用免疫组化法检测LRIG1、survivin的表达情况。随访3年,记录胶质瘤患者的预后情况,胶质瘤患者预后的影响因素采用多因素Logistic回归分析。结果胶质瘤组织中LRIG1阳性表达率明显低于癌旁组织,survivin阳性表达率明显高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。随访3年,77例胶质瘤患者中死亡25例,生存52例。预后死亡胶质瘤患者胶质瘤组织中LRIG1阳性表达率低于生存患者,survivin阳性表达率高于生存患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。Logistic回归分析结果显示,肿瘤直径≥5 cm、高级别胶质瘤、LRIG1阴性表达、survivin阳性表达均是胶质瘤患者预后的独立危险因素(P﹤0.05)。结论胶质瘤组织中LRIG1呈阴性表达,survivin呈阳性表达,且二者均是胶质瘤患者预后的独立危险因素,临床可通过检测这两种指标为胶质瘤患者的远期预后评估提供参考。

ISLR通过活化PI3K-AKT通路促进上皮-间质转化影响骨肉瘤细胞恶性进展研究

目的 研究含免疫球蛋白超家族亮氨酸丰富重复蛋白(immunoglobulin superfamily containing leucine-rich repeat protein,ISLR)参与骨肉瘤细胞恶性进展的作用及其潜在调节机制。方法 通过实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测骨肉瘤组织和细胞中ISLR mRNA水平。通过转染ISLR短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)序列或阴性对照shRNA(negative-control shRNA,NC shRNA)序列至U2OS细胞,后用磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol3 kinase,PI3K)激活剂740 Y-P处理细胞。通过CCK-8法、Transwell实验和流式细胞术分别检测细胞活力、侵袭能力和细胞凋亡率。蛋白印迹实验(Western blot)检测ISLR蛋白、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白[上皮钙黏蛋白(epitheia-cadherin,E-cadherin)、神经钙黏蛋白(nerve-cadherin,N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin),Snail]、PI3K/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)通路相关蛋白、细胞凋亡相关蛋白[半胱天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate-specific proteinase-3,Caspase-3),B淋巴细胞瘤-2(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X,Bax)]和肿瘤增殖标志物Ki67蛋白表达。采用慢病毒转染的U2OS细胞注射裸鼠构建异种移植瘤模型,监测肿瘤生长情况。结果 与癌旁组织(1.01±0.02)相比,骨肉瘤组织(5.14±1.63)中ISLR mRNA水平显著上调,差异具有统计学意义(t=-14.332,P<0.001)。与正常人成骨细胞hFOB1.19(1.01±0.01)相比,骨肉瘤细胞MG63(3.05±0.57),U2OS(4.55±0.79),HOS(2.46±0.41),Saos-2(2.62±0.44)和143B(3.62±0.51)中ISLR mRNA相对表达均显著升高,差异具有统计学意义(t=4.883,8.473,3.471,3.854,6.247,均P<0.05)。与对照组和NC shRNA组比较沉默ISLR明显抑制了U2OS细胞增殖(t=6.593,6.835)及侵袭(t=8.621,8.448),促进细胞凋亡(t=25.505,25.574),差异具有统计学意义(均P<0.05)。沉默ISLR明显促进U2OS细胞中Caspase-3活性(t=13.489,13.366)及Bax蛋白(t=8.628,8.524)表达,抑制Bcl-2蛋白(t=10.948,10.775)表达,差异具有统计学意义(均P<0.05)。沉默ISLR显著促进EMT相关蛋白E-cadherin(t=15.168,15.087)表达,抑制N-cadherin(t=10.220,10.058),Vimentin(t=8.303,8.164)和Snail(t=9.211,9.384)蛋白表达,降低PI3K/AKT通路关键蛋白PI3K和AKT磷酸化水平(t=17.441,14.452),差异具有统计学意义(均P<0.05)。740 Y-P处理可逆转ISLR沉默对U2OS细胞的影响。裸鼠体内实验显示敲低ISLR显著抑制了肿瘤生长。结论 ISLR可能通过激活PI3K/AKT通路促进骨肉瘤EMT及细胞增殖、侵袭,抑制细胞凋亡,从而促进骨肉瘤进展。

沉默海马LINGO-1对小鼠学习记忆以及有髓神经纤维的影响

目的:研究沉默海马含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白结构域的蛋白-1(LINGO-1)对APP/PS1小鼠空间学习和记忆能力以及海马有髓神经纤维的影响。方法:随机选取18只雄性APP/PS1小鼠,随机分为对照组和rAAV-LINGO-1-shRNA组,通过海马立体定位注射表达LINGO-1-shRNA的重组腺相关病毒rAAV-LINGO-1-shRNA,运用Morris水迷宫方法测试小鼠的空间学习和记忆能力;运用免疫荧光染色和real time RT-PCR分析小鼠海马内LINGO-1表达水平;运用real time RT-PCR分析小鼠海马内LINGO-1下游分子RhoA和ROCK的表达水平;运用无偏体视学方法结合透射电子显微镜技术对小鼠海马(CA1~3和齿状回)的体积,海马内有髓神经纤维的长度、髓鞘体积及其损伤情况进行定量研究。结果:与对照组小鼠相比,rAAV-LINGO-1-shRNA组小鼠的逃避潜伏期显著性缩短,穿台次数显著增多,而目标象限游泳时间及目标象限游泳路程比无显著性改变;与对照组相比,rAAV-LINGO-1-shRNA组海马内LINGO-1显著下调,同时其下游RhoA和ROCK的表达水平降低;对照组和rAAV-LINGO-1-shRNA组海马体积无显著性差异;与对照组相比,rAAV-LINGO-1-shRNA组海马内有髓神经纤维的长度和正常髓鞘的体积显著性增加,受损的有髓神经纤维占比和受损的髓鞘占比均显著降低。结论:沉默海马LINGO-1能够有效改善APP/PS1小鼠海马依赖的空间学习和记忆能力,抑制RhoA/ROCK的表达,减轻海马内有髓神经纤维及其髓鞘的损伤,这将为阿尔茨海默病的发病及治疗提供新的方向。

LRIG1负性调控CTLA-4/PI3K/AKT信号通路影响胶质瘤放疗耐受性的机制研究

探讨LRIG1负性调控CLTL-4/PI3K/AKT信号通路影响胶质瘤放疗耐受性。方法 构建U251R。在U251R中转染pcDNA-LRIG1(pcDNA-LRIG1组)、siRNA-LRIG1(siRNA-LRIG1组)和空白质粒(NC组)。采用RT-PCR和Western blot检测各组细胞CTLA-4、PI3K、AKT mRNA及蛋白表达的表达。分别用CCK-8和Annexin V/PI检测胶质瘤细胞活力及凋亡情况。结果 pcDNA-LRIG1组LRIG1蛋白及mRNA表达相较于NC组升高,PI3K、CTLA-4、AKT 蛋白及mRNA表达相较于NC组降低;siRNA-LRIG1组LRIG1 蛋白及mRNA表达相较于pcDNA-LRIG1组降低,PI3K、CTLA-4、AKT 蛋白及mRNA表达相较于pcDNA-LRIG1组升高。pcDNA-LRIG1组U251R细胞活力低于NC组;siRNA-LRIG1组U251R细胞活性高于pcDNA-LRIG1组。与NC组相比,pcDNA-LRIG1组U251R细胞凋亡增加;与pcDNA-LRIG1组相比,siRNA-LRIG1组U251R细胞凋亡减少。结论 LRIG1可通过负性调控CTLA-4/PI3K/AKT信号通路作用于放疗耐受,可为胶质瘤的放疗治疗提供实验基础和理论依据。

单克隆抗体研究新进展

单克隆抗体技术是现代生命科学研究的重要工具 ,在基因和蛋白质的结构和功能研究方面有着不可或缺的作用。本文全面综述了单克隆抗体研究最新进展。通过构建真核表达载体 ,采用DNA免疫、细胞免疫、消减免疫和多位点重复免疫等现代分子免疫学方法 ,快速制备高亲合力的单克隆抗体 ,改进常规方法制备单抗费时费力且亲合力低的弱点 ,对后基因时代蛋白质组学等基础研究领域的研究具有巨大的推动作用 ;同时在生物芯片。

信号转导和转录激活因子3信号通路在多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1诱导U251细胞凋亡中的作用

目的探讨信号转导和转录激活因子3 （STAT3）信号通路在多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白l（LRIGl）诱导人脑胶质瘤细胞株U251细胞凋亡中的作用及机制。方法传代培养U251细胞，随机分为对照组、空载体组及实验组，应用脂质体介导的基因转染技术分别将磷酸盐缓冲液（PBS）、PEGFP-N1质粒体、PEGFP-LRIG1质粒体转染入各组细胞，应用细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测细胞体外生长活性，膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（Annexin V-FITC）/碘化丙锭（PI）法经流式检测各组细胞凋亡率，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法测定各组细胞中STAT3的mRNA表达，Westernblot法测定各组细胞中STAT3、磷酸化STAT3（p-STAT3）、B淋巴细胞/白血病-2（ bcl-2）、bax的蛋白表达。结果成功转染LRIG1，实验组细胞中LRIG1基因表达明显上调（P〈0.05）;实验组细胞增殖显著受抑，48 h抑制率为（45. 12 ±0. 68）%，72h抑制率为（52. 24 ± 1. 77）%，总凋亡率由（2. 54 土0. 43）%增高至（22. 51 ±2. 12）%（P〈0. 05） ； RT-PCR检测显示实验组细胞中STAT3 mRNA表达明显降低;Western blot检测显示实验组细胞中STAT3蛋白表达及磷酸化水平明显降低，bcl-2表达明显降低，bax表达明显升高。结论LRIG1可促进U251细胞凋亡，其机制可能是通过下调STAT3信号通路，进而抑制STAT3激活的抗凋亡途径。

LRIG1过表达对顺铂诱导的胶质瘤细胞凋亡的影响及其机制

目的研究过表达富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(leucine-rich repeats and immunoglobulin-like do-mains-1,LRIG1)对顺铂(cisplatin,CDDP)诱导的胶质瘤细胞U251凋亡的影响及其机制。方法应用脂质体介导的基因转染技术将对照质粒(EGFP-N1)及LRIG1质粒(EGFP-N1-LRIG1)分别转染胶质瘤细胞系U251,设为对照组和LRIG1过表达组,用Real-time PCR检测转染后LRIG1表达水平;用AnnexinⅤ/7AAD双标流式细胞术检测细胞凋亡;用Western blot检测各目的蛋白表达水平。结果 LRIG1过表达组LRIG1mRNA及蛋白均较对照组明显增高;0、10、20μg/mL CDDP作用下,LRIG1过表达组细胞凋亡率均明显高于对照组(P<0.01);随着CDDP浓度增加,胶质瘤细胞U251磷酸化表皮生长因子受体(P-EGFR)表达增加;不同浓度CDDP作用下,LRIG1过表达组P-EGFR水平均较对照组明显降低,促凋亡蛋白Bax,Caspase-3表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低。结论 LRIG1通过下调P-EGFR水平而促进顺铂诱导的胶质瘤细胞凋亡,增强胶质瘤细胞对顺铂的敏感性。

富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1在垂体瘤中的表达及其预后意义

目的 探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1（LRIGl）在垂体瘤中的表达及意义.方法 应用免疫组织化学链菌素抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）法检测74例垂体瘤、20例正常脑组织中LRIG1的表达,分析其表达与患者预后的关系.结果 LRIG1在正常脑组织中的阳性表达率为100.0％,明显高于垂体瘤中的表达（54.1％）,差异有统计学意义（P＜0.05）.同时,LRIG1在非侵袭性垂体瘤中的阳性表达率为66.7％,明显高于在侵袭性垂体瘤中的表达（20.0％）.Kaplan-Meier生存分析表明LRIG1及垂体瘤类型与患者的预后明显相关（P＜0.05）.Cox多因素生存分析表明LRIGI可作为患者预后评估的独立因素.结论 LRIG1参与了垂体瘤的发生及发展,低表达患者预后较差.

多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1基因表达对体外垂体瘤细胞株RC-4B／C生物学功能的影响

目的观察多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1（LRIGI）基因表达对体外垂体瘤细胞株RC-4B／C的增殖凋亡和生物学功能的影响。方法应用基因转录方法检测LRIG1基因表达射体外垂体瘤细胞株RC-4B／C的抗增殖作用和生物学功能的影响；通过免疫组织化学法和Western blot技术检测LRIGI蛋白在RC-4B／C细胞中的表达水平，反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）测定转染后RC-4B／C细胞中Ras、Raf、蛋白激酶B（Akt）和细胞外信号调节激酶（ERK）mRNA表达变化，并通过噻唑蓝（MTF）法、划痕实验、苏木素-伊红（HE）染色、显微镜等观察比较转染LRIG1基因的RC-4B／C细胞的的迁移能力、增殖凋亡和形态学改变。结果Western blot和免疫组织化学法证实转染后RC-4B／C细胞中LRIG1稳定表达；RT—PCR证实转染后RC-4B／C细胞中Ras、Raf和AktmRNA水平显著降低（P〈0．01），分别为0．87±0．17、0．46±0．11、0．92±0．25。MTT法结果表明随着LRIG1与RC-4B／C细胞效靶比增加及作用时间延长，抑制率明显增强（P〈0．01）。划痕实验结果显示：LRIG1转染的RC-4B／C细胞迁移能力低于正常RC-4B／C细胞。LRIGI作用于垂体瘤细胞24h后，形态学观察垂体瘤细胞发生凋亡或坏死。结论LRIGI基因转染对体外垂体瘤细胞株RC-4B／C细胞具有抑制增殖和促进凋亡作用，其可能是通过抑制表皮生长因子受体（EGFR）和表皮生长因子受体Ⅲ型突变体（EGFRvm）信号传导通路中的磷酸肌醇3激酶（P13K）／Akt和Ras／Rat／ERK两条重要信号通路分子的活性来发挥作用。

多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1与胶质瘤细胞株化疗敏感性之间的关系

目的探讨多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1（LRIG1）与胶质瘤细胞化疗敏感性的相关性。方法替莫唑胺诱导构建多药耐药细胞株U251／TR，细胞计数试剂盒（CCK-8）检测该细胞株的多药耐药性，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法检测LRIG1在U251和U251／TR中的表达变化。转染LRIG1质粒体进入多药耐药细胞株，检测其对化疗药物敏感性变化。结果成功构建多药耐药细胞株U251／TR，替莫唑胺、阿霉素、环磷酰胺、依托泊苷、硫酸长春新碱对U251的抑制率分别为：（19．30±0．04）％、（39．90±0．13）％、（28．10±0．09）％、（66．20±0．02）％、（26．30±0．11）％。而对U251／TR的抑制率分别为：（3．20±0．03）％、（15．30±0．09）％、（4．10±0．03）％、（45．60±0．10）％、（10．80±0．04）％，两者差异有统计学意义（P〈0．05）。其LRIG1的表达明显降低，将LRIG1质粒体转入耐药细胞株后，TMZ、VP16、硫酸长春新碱、环磷酰胺、阿霉素对空白组（耐药细胞株）的抑制率为（2．60±0．02）％、（3．30±0．02）％、（9．50±0．06）％、（2．20±0．05）％、（2．90±0．03）％，而对转染组的抑制率为（19．10±0．34）％、（38．20±0．53）％、（29．10±0．25）％、（15．20±0．55）％、（17．40±0．41）％，耐药性被逆转，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论LRIG1与肿瘤的化疗敏感性相关，LRIG1可能与肿瘤的多药耐药有关。

干扰多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1促进人胶质母细胞瘤U251细胞株侵袭性的机制

目的探讨干扰多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1（LRIG1）基因表达促进人胶质母细胞瘤U251细胞株侵袭性的机制。方法用携带U6启动子的LRIG1特异性短发夹RNA（shRNA）序列的质粒载体pGenesil2-LRIG1-shRNA（siRNA）及含非特异shRNA编码序列的对照质粒pGenesil2-negativeshRNA（neg）转染U251细胞株，通过G418筛选，鉴定得到稳定转染细胞株。采用侵袭实验验证干扰LRIG1对U251侵袭性的影响，通过明胶酶谱实验检测基质金属蛋白激酶（MMP）-2、MMP-9的活性，Westernblot法检测表皮生长因子（EGFR）及其下游丝裂原激活蛋白激酶／细胞外信号调节激酶（MAPK／ERK）、磷脂酰肌醇3激酶／蛋白激酶B（P13K／AKT）信号通路蛋白的表达差异。结果含U6启动子LRIG1shRNA序列的质粒转染干扰组LRIG1mRNA降低至对照组（35．3％～39．2％，P〈0．05）。干扰LRIG1表达组U251细胞侵袭数[（159±15）-（188±9）／视野]，较空白对照组细胞侵袭数[（28±9）／视野]明显增多（P〈0．05）；干扰LRIG1激活EGFR通路传导；干扰LRIG1后干扰组MMP-2较对照组活性增加（1．66±0．11～1．96±0．12，P〈0．01），MMP-9干扰组较对照组活性增加（4．82±0．27～4．47±0．29）。结论LRIG1表达下调后MMP-2、MMP-9活性增强，从而促进U251细胞的侵袭性，可能通过激活EGFR信号通路引起。

非小细胞肺癌患者LRIG1及Fascin-1的表达及其临床意义

目的探讨多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)和成束蛋白1(Fascin-1)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测青海省人民医院2013年2月至2015年12月手术切除的86例癌组织标本和部分配对的42例癌旁正常肺组织中LRIG1及Fascin-1蛋白的表达水平,探讨LRIG1及Fascin-1表达与患者临床病理特征的关系。结果 Fascin-1在癌组织和癌旁组织中阳性表达率分别为73.2%和14.3%,差异有统计学意义(P<0.05);LRIG1在癌组织和癌旁组织中阳性表达率分别为55.8%和86.0%,差异有统计学意义(P<0.05);Fascin-1阳性与阴性患者在肿瘤直径和纵膈淋巴结转移方面比较差异均有统计学意义(P<0.05);LRIG1阳性与阴性患者在病理类型、临床分期和纵膈淋巴结转移方面比较差异也有统计学意义(P<0.05)。结论 LRIG1及Fascin-1在肺癌组织和癌旁正常肺组织存在差异表达,并与NSCLC的发生发展及淋巴转移有关。

LRIG1抑制人脑胶质瘤细胞增殖的研究

目的探讨多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)对人脑胶质瘤细胞增殖的影响。方法分别构建携带LRIG1、LRIG1小干扰RNA、Bcl2和胶质细胞源性生长因子(BDMF)的质粒,将它们分别转染到人脑胶质瘤细胞系U251细胞内,应用细胞计数试剂盒8法检测细胞活性的变化,蛋白印迹法检测LRIG1、Bcl2、拓扑异构酶Ⅱ(topoⅡ)、GDNF的表达变化。结果成功构建携带LRIG1、LRIG1小干扰RNA、Bcl2、GDNF的质粒,并成功转入U251细胞株。过表达LRIG1显著抑制U251细胞增殖。蛋白印迹法结果显示LRIG1的表达和Bcl2、topoⅡ和GDNF的表达呈显著负相关。结论LRIG1通过负性调节Bcl2、topoⅡ和GDNF的表达抑制人脑胶质瘤细胞系U251细胞的增殖。