重复片段PCR检测葡萄球菌DNA指纹在医院感染中的分析

目的 应用重复片段PCR ,对凝固酶阴性葡萄球菌 (CNS)进行基因分型 ,用于医院感染中分子流行病学研究。方法 选择REP1+REP2和ERIC1+ERIC2两对引物 ,对临床分离的 6 8株 (CNS)菌株进行重复片段PCR ,根据扩增产物的电泳模式编制菌株间的相似矩阵 ,并利用RAPD、PHYLIP及TREEVIEW等软件 ,绘制各株间的遗传聚类图。结果 两对引物的扩增带型均比较丰富 ,对于实验CNS菌株具有较好的分辨率 ,根据聚类结果 ,可以确定某些菌株之间的同源性 ,为感染源的确认等分子流行病学研究提供依据。结论 重复片段PCR分辨率高 ,根据聚类结果确定菌株的同源性 ,为医院感染确认感染源提供了分子流行病学的依据。

重复片段的荧光定量PCR技术在快速检测胎儿染色体非整倍体异常中的应用

目的探讨SD-QF-PCR技术在常见染色体非整倍体异常中的应用价值和临床应用前景。方法选择670例产前诊断的羊水标本,每例标本分成两份,一份样本进行常规染色体核型分析,另一份标本采用我们开发的SD-QF-PCR技术进行胎儿常见染色体非整倍体的分析,并比较两种方法的检测结果以验证SD-QF-PCR的可行性。结果在670例样本中,应用SDQF-PCR方法检测出了21三体综合征20例;18三体综合征2例;13三体综合征,45,X,47,XXX和48,XXYY各1例,SD-QF-PCR的检测结果与传统染色体核型分析方法的结果一致。结论 SD-QF-PCR对13、18、21、X和Y非整倍异常的检测具有操作简单、检测速度快、敏感性高和特异性强的特点,在临床上有广阔的应用前景。

苹果树根际高效解钾菌的筛选及鉴定

为探明苹果树根际解钾菌的种群特征和解钾性能,从苹果树根际土壤中分离获得解钾能力较强的高效解钾菌。本研究以钾长石为唯一钾源,分离获得118株具有解钾活性的菌株,重复片段PCR基因指纹分析(Repetitive-element PCR,rep-PCR)聚为29个类群。利用火焰分光光度法测定菌株解钾能力,获得5株高效解钾菌,平均解钾活性达到41.47mg·L-1,其中K105的解钾能力最强,有效态钾增长23.09%。采用H2O2消煮后测得的K+浓度升高,有效态钾增长最高达31.22%。采用形态特征观察、生理生化特性检测和基于16S r RNA基因序列的系统发育分析对高效解钾菌株进行鉴定。结果表明:K1为不动杆菌属(Acinetobacter sp.)、K98、K105和K115为假单胞菌属(Pseudomonas sp.)、K168为芽孢杆菌属(Bacillus sp.)。研究结果可为开辟新型高效解钾菌,为连作土壤的改良和苹果专用微生物菌肥的开发提供依据。