包涵体复性研究进展(英文)

用基因工程技术在大肠杆菌高水平表达重组蛋白时 ,通常形成无生物活性的包涵体。包涵体在体外经分离、溶解与重折叠后可实现复性 ,表现为具有生物活性的蛋白。总结了包涵体的相关复性技术 。

人CD226(PTA1)分子胞膜外区的原核表达、复性及免疫反应性的鉴定

目的 构建人CD2 2 6 (PTA1)分子胞膜外区的原核表达载体 ,并进行原核表达和复性 ,为该分子的X线结晶衍射及功能学研究提供充足的蛋白来源。方法 将人CD2 2 6分子的胞膜外区基因克隆入原核表达载体pBV2 2 0 ,测序证实后 ,转化宿主菌MC10 6 1 P3并进行温度诱导表达。产物采用稀释加透析法复性 ,亲和层析柱纯化 ,并通过Westernblot和ELISA对其复性效果进行鉴定。结果 温度诱导 7h ,目的蛋白的表达量达宿主菌总蛋白量的 2 3.8% ,其相对分子质量为 30× 10 3,Westernblot及ELISA证实其重折叠和复性是成功的。结论 成功地获得了人CD2 2 6 (PTA1)分子胞膜外区的原核表达产物 。