肿瘤细胞中的c-myc与p16启动子重新甲基化

目的探讨基因启动子区重新甲基化对肿瘤细胞生长的影响,寻找肿瘤防治新靶点。方法用S-腺苷甲硫氨酸使c-myc和p16启动子甲基化,MTT法测定肿瘤细胞生长状态;免疫荧光染色检测基因表达的变化。结果药物处理后,c-myc表达显著降低(P<0.05),而p16表达无明显变化(P>0.05);肿瘤细胞的生长受到抑制。结论SAM能够通过下调癌基因的表达来抑制肿瘤细胞的生长,提示其在肿瘤治疗方面的应用前景。

癌基因H-ras启动子区重新甲基化抑制胃癌细胞生长的实验研究

目的:探讨癌基因启动子区域重新甲基化对胃癌细胞生长的影响。方法:用S-腺苷甲硫氨酸(SAM)使胃癌细胞系MGC-803中癌基因H-ras启动子区域重新甲基化,MTT法检测肿瘤细胞生长状态;MSP法检测H-ras启动子区域甲基化状态;细胞免疫荧光染色检测H-RAS蛋白的表达。结果:胃癌细胞系MGC-803经SAM处理后癌基因H-ras启动子区域重新出现甲基化;经SAM处理的胃癌细胞组与对照组相比,细胞生长受到明显抑制,差异有统计学意义(P<0.05);H-RAS蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SAM能够使MGC-803中癌基因H-ras启动子区域重新甲基化,降低H-RAS蛋白的表达水平,且有效抑制了肿瘤细胞的生长,从而为肿瘤治疗提供了新的靶点。

落叶松体细胞胚胎发生过程中DNA甲基化模式变化分析

通过MSAP技术检测落叶松体细胞胚胎发生过程中的DNA甲基化模式变化发现,体细胞胚胎发生的14个时期中,5’-CCGG-3’序列的胞嘧啶上发生重新甲基化事件最多在ABA诱导后的0.5～6 h,最少在5～7d的早期单胚阶段;而去甲基化事件发生最多的是5～7 d的早期单胚阶段,最少在14～21 d的中期单胚到晚期单胚阶段。与原胚团时期相比,重新甲基化事件最多发生在ABA诱导后的5 d,最少发生在ABA诱导后的7 d;去甲基化事件发生最多是在中期单胚的14 d,最少是在ABA诱导后的2 d。说明落叶松体细胞胚胎发生过程中存在着频繁的重新甲基化和去甲基化变化,体细胞胚胎成熟阶段与原胚团阶段相比,DNA甲基化的模式变化显著。

S-腺苷甲硫氨酸抑制大肠癌细胞生长的实验研究

目的探讨S-腺苷甲硫氨酸(SAM)对人大肠癌细胞生长的抑制作用及抑癌机制。方法用SAM对大肠癌细胞系HT-29进行处理,使其癌基因c-myc和H-ras启动子区域甲基化。用噻唑蓝(MTT)法检测肿瘤细胞生长状态;甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)(MSP)法检测c-myc和H-ras启动子区域甲基化状态;细胞免疫荧光染色检测C-MYC和H-RAS蛋白的表达情况。结果大肠癌细胞系HT-29经SAM处理后,癌基因c-myc和H-ras启动子区域重新出现甲基化。经SAM处理的大肠癌细胞组与对照组相比,细胞生长受到明显抑制,差异有统计学意义(P<0.05);C-MYC和H-RAS蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SAM能使HT-29中癌基因c-myc和H-ras启动子区域重新甲基化,降低C-MYC和H-RAS蛋白的表达水平,且有效抑制了肿瘤细胞的生长,从而为肿瘤治疗提供了新的靶点。