重楼复方对荷H_(22)小鼠抑瘤及免疫功能的影响

目的:观察重楼复方(Chonglou Fufang,CLFF)对小鼠H22肝癌的抑制作用及其免疫调节作用。方法:建立小鼠肝癌H22实体瘤模型,将小鼠随机分为6组:空白对照组、CLFF高、中、低剂量组、环磷酰胺(Cyclo-phosphamide,CTX)组、复方斑蝥(Fufang Banmao,FFBM)组。各组连续灌胃给药10d。于末次给药后24h,断颈处死小鼠,剥离瘤体,无菌条件下取脾脏,分别计算抑瘤率、脾指数,并采用MTT显色法检测药物对细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T Lymphocyte,CTL)的细胞不良反应。结果:CLFF显著抑制肿瘤生长,高、中、低剂量组抑瘤率分别为54.84%、54.38%、37.27%,与空白对照组比较具有显著性差异(P<0.01);CLFF高、中、低剂量组脾指数分别为(7.20±3.07)mg/g、(7.23±2.34)mg/g、(10.89±3.91)mg/g,各剂量组与环磷酰胺组比较具有显著性差异(P<0.01),中低剂量组与空白对照组比较具有统计学意义(P<0.05);CLFF高中低剂量组对小鼠的CTL细胞的杀伤率分别为51.76%、44.18%、22.74%,高剂量组与空白对照组及CTX组比较,P<0.05,具有统计学意义。结论:CLFF具有显著抑制肿瘤作用,其抑瘤机制可能与其调节机体的免疫功能有关。

重楼复方对人胃癌细胞MKN-45增殖抑制作用及分子机制研究

目的研究重楼复方对人胃癌细胞株MKN-45增殖抑制作用,及其对细胞周期、细胞凋亡的影响,并探讨可能的分子机制。方法不同浓度的重楼复方作用于MKN-45细胞48 h后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)显色法检测细胞增殖抑制率,采用流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期,RT-PCR法检测凋亡相关基因Sur-vivin、c-IAP1、c-IAP2、Bcl-2 mRNA的表达。结果重楼复方以剂量依赖方式抑制人胃癌细胞株MKN-45的细胞增殖,其半数抑制浓度(IC50值)为0.67 mg.mL-1。重楼复方0.2,0.4,0.8 mg.mL-1作用于MKN-45细胞48h后,其早期凋亡率分别为7.0%、13.8%、36.3%,而对照组为3.4%,其诱导凋亡作用呈现剂量依赖性。重楼复方0.8 mg.mL-1作用于MKN-45细胞24 h后,细胞积聚在G0/G1期(对照组63.30%,重楼复方73.16%),同时S期细胞比例减少(对照组32.48%,重楼复方22.52%)。重楼复方0.8 mg.mL-1作用MKN-45细胞48 h后,Survivin、c-IAP1、c-IAP2、Bcl-2的mRNA水平均下调。结论重楼复方具有抑制人胃癌细胞株MKN-45增殖及诱导细胞凋亡作用,并能阻滞细胞于G0/G1期,下调Survivin、c-IAP1、c-IAP2、Bcl-2 mRNA的表达可能为其诱导细胞凋亡的主要机制之一。

重楼复方对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、凋亡及Survivin表达的影响

目的:研究重楼复方对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖抑制作用,及其对细胞周期、细胞凋亡的影响,并探讨可能的分子机制。方法:采用MTT法观察重楼复方对SMMC-7721细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期,RT-PCR法检测凋亡相关基因生存素(Survivin)mRNA的表达。结果:重楼复方以剂量依赖方式抑制SMMC-7721的细胞增殖,其半数抑制浓度(48h)为(0.26±0.04)mg/mL。重楼复方0.2、0.4、0.8mg/mL作用于SMMC-7721细胞48h后,其早期凋亡率分别为4.8%、8.3%、21.6%,而对照组为1.8%,其诱导凋亡作用呈现剂量依赖性。重楼复方0.8mg/mL作用于SMMC-7721细胞24h后,细胞积聚在G0/G1期,同时S期细胞比例减少。重楼复方0.8mg/mL作用SMMC-7721细胞48h后,Survivin mRNA表达下调(P<0.05)。结论:重楼复方具有抑制人肝癌细胞株SMMC-7721增殖及诱导细胞凋亡作用,并能阻滞细胞于G0/G1期,下调Survivin mRNA的表达可能为其诱导细胞凋亡的主要机制之一。

重楼复方对荷肝癌H_(22)小鼠生长及生存时间的影响

[目的]观察重楼复方对荷肝癌H22小鼠体内抑瘤作用及生命延长作用。[方法]建立荷肝癌H22实体瘤小鼠模型,随机分为对照组、环磷酰胺组、复方斑蝥组及重楼复方常规剂量组(117mg/kg·d)、低剂量组(58.5mg/kg·d),观察各给药组中荷肝癌H22实体瘤小鼠抑瘤率、给药前后体重及生存时间。[结果]与对照组相比,重楼复方在常规、低剂量组抑瘤率分别为34.81%、8.28%(P=0.003);生命延长率分别为91.4%、13.5%(P<0.001);环磷酰胺组在抑瘤率上明显优势,达70.44%,但是其对小鼠体重的增加受到显著抑制(P=0.011),不同剂量重楼复方对小鼠体重无明显抑制。[结论]重楼复方常规剂量组对荷肝癌H22实体瘤小鼠肿瘤生长有明显抑制作用,且能显著提高荷肝癌H22实体瘤小鼠的生存期。

复方重楼颗粒剂薄层色谱鉴别

应用薄层层析技术对复方重楼颗粒剂中的重楼、鱼腥草、蚂蚁进行定性鉴别，分离效果满意，专一性强，无干扰。

复方重楼凝胶的皮肤刺激性及过敏性考察

目的考察复方重楼凝胶经皮给药的皮肤刺激性及过敏性。方法通过兔皮肤(完整和破损)刺激性实验、豚鼠主动皮肤过敏性实验,对皮肤刺激反应、刺激强度、过敏程度进行评价,并进行皮肤病理检测,考察复方重楼凝胶经皮给药的皮肤刺激性及过敏性。结果皮肤刺激性实验中,复方重楼凝胶对兔完整和破损皮肤无明显刺激性;过敏性实验中,复方重楼凝胶未见致敏现象。结论复方重楼凝胶对皮肤无刺激性及致敏性,为开发治疗虫咬皮炎新制剂提供了安全性评价数据。