2-氯-5-氨基甲苯-4-磺酸含量的重氮化法定量分析

采用重氮化法定量分析测定2-氯-5-氨基甲苯-4-磺酸含量(总氨基值),该法原理明确、操作简单、结果准确,对生产过程控制和产品质量检验提供了可行的试验方法。

非重氮化法合成偶氮化合物1,2,3,4,5,6-三(4-偶氮苯基)苯

本实验通过基础原料苯肼和1,4-环己二酮合成了1,4-环己二酮单苯腙(1),(1)在乙醇和二氯亚砜作用下三聚芳构化得到了1,2,3,4,5,6-三(4-偶氮苯基)苯(2),从而通过重氮化法合成了一种新型的偶氮化合物.该法操作简单,对环境友好,为生产偶氮化合物提供了新的途径.

重氮化法合成全抗原的研究

[目的]制备氯霉素全抗原,探索氯霉素合成的方法,为动物免疫试验作准备。[方法]采用重氮化法合成氯霉素卵清蛋白全抗原,通过紫外法和红外光谱法测定合成的偶联效果。[结果]重氮化法可用于制备较高偶联率的氯霉素全抗原,用于免疫动物制备抗体。[结论]该研究为合成高效价的抗体奠定了基础。

胆红素含量测定中重氮化法与摩尔系数法的比较

胆红素含量测定中重氮化法与摩尔系数法是两种较常用的方法,而重氮化法随加速剂及重氮化试剂等因素的不同方法上有所区别。本文用《正交试验法选择胆红素测定的最佳条件》

磺胺嘧啶银乳膏含量测定方法的改进

通过加入硝酸煮沸破坏乳膏基质，改进了磺胺嘧啶银乳膏含量的测定方法，解决了 １９９５年版《中国药典》、《中国医院制剂规范》和南京《医院制剂规范》规定的方法在测定磺胺嘧啶银乳膏含量时，测定结果明显偏低之问题。改进后的方法不仅操作简便，回收率高，重现性好，而且测定结果准确，适合于磺胺嘧啶银乳膏含量测定。

酶联免疫吸附法快速检测畜禽产品中西马特罗药物残留

目的建立一种以单链抗体为基础的酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)快速检测畜禽产品中西马特罗(cimaterol,CIM)药物残留。方法以重氮化法合成的西马特罗完全抗原CIM-牛血清白蛋白(bovine albumin,BSA)免疫新西兰大白兔,用兔脾细胞总RNA反转录合成c DNA第一链,设计引物扩增兔源抗体重链可变区(heavy chain variable region,VH)和轻链可变区(light chain variable region,VL),通过45 bp的连接肽(Linker)使用新型重叠延伸聚合酶链式反应技术(splicing by overlap extension polymerase chain reaction,SOE-PCR)连接成VH-Linker-VL并大量制备;利用噬菌体表面展示技术将单链抗体(single-chain variable fragment,Sc Fv)片段与噬菌体展示载体p CANTAB-5e连接,电转化至大肠杆菌TG1感受态细胞,得到兔源噬菌体Sc Fv抗体库。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)判断是否偶联成功,用紫外(ultraviolet,UV)扫描及基质辅助激光解析串联飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption tandem time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)测定人工抗原的偶联比。用ELISA测定免疫兔血清质量。鉴定合成抗体库并对抗体库进行4轮淘选,取最优的CIM-Sc Fv进行氨基酸序列分析。结果CIM-BSA及CIM-鸡卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)偶联比分别为8:1及10:1,免疫血清校价为1:32000,半数抑制浓度为9.77 ng/m L,标准曲线的拟合度为0.997。抗西马特罗兔源噬菌体Sc Fv免疫库的插入率为92%,库容为1×1010 pfu,多样性为83.3%,经淘选获得一株与CIM有结合活性的噬菌体Sc Fv菌。结论西马特罗完全抗原的合成效果良好,可用于建立西马特罗检测方法,兔源噬菌体抗体库为快速获得CIM单链抗体奠定基础,为西马特罗快速检测提供了新思路。

氟硼酸重氮盐裂解反应条件的探讨

讨论了以重氮化法合成4,4′-二氟二苯甲酮路线中的关键工艺——重氮盐裂解的各种影响因素。研究发现,通过加入Fe粉末作催化剂,将干燥的氟硼酸重氮盐分批次缓慢加入到m(重氮盐)∶m(甲苯)=1∶2.6的甲苯溶剂中裂解,反应可以十分平稳、温和地进行,并且其收率可以稳定在85%左右,含量达94%以上(气相色谱)。

西马特罗多克隆抗体的制备及其免疫学检测方法的建立

为建立一种特异、敏感、快速、准确的西马特罗(Cimaterol,CIM)残留检测方法,成功合成其完全抗原并免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,建立其免疫学检测方法。应用重氮化法偶联西马特罗与载体蛋白BSA、OVA,合成免疫抗原CIM-BSA和检测抗原CIM-OVA,并采用UV、SDS-PAGE、质谱3种方法进行完全抗原的鉴定。用CIM-BSA免疫新西兰大白兔制备抗西马特罗多克隆抗体并建立间接竞争ELISA检测方法。结果表明,成功合成了西马特罗完全抗原,具有合成抗原的分子特征;免疫新西兰大白兔后,成功制备了抗西马特罗多克隆抗体,其效价为1∶64000,对西马特罗的半数抑制质量浓度为4.26μg/L,与特布他林、莱克多巴胺、沙丁胺醇、齐帕特罗等β2型受体激动剂药物无交叉反应。经过条件优化,建立了西马特罗间接竞争性ELISA检测方法,其最低检测限为0.04μg/L,在0.1~12.8μg/L检测范围内,线性关系拟合度为R2=0.9771,拟合曲线方程为y=-0.2469x+0.6623。检测猪尿和饲料样品,回收率分别为96.3%~103.9%和67.0%~105.0%。综上,成功建立了具有良好应用前景的西马特罗间接竞争ELISA免疫学检测方法。

碘量法测定胆红素的含量

胆红素的含量测定,法定的方法是与重氮化试剂反应生成偶氮化合物,然后用分光光度法测定。还可采用吸收系数法。当前存在的问题,一是无标准品供应,二是一些小型生产单位或个人无有关仪器。为此,我们研究了一种比较简单的方法—碘量法。

荧光熄灭法测定胆红素的方法研究

胆红素测定方法已报道的有重氮化法、间接光度法,及荧光增强法等等。在上述方法中,有的操作比较繁琐,有的对试剂要求较严格,条件比较苛刻,有一定局限性。本文提出分析胆红素的荧光熄灭法,在文献上尚未见报道。本文对测定条件作了详细研究,对胆红素测定的相对标准偏差为2.8％,胆红素浓度在0～2.5ug/ml范围内线性关系良好,回收率在97％以上,本方法对胆红素样品分析操作简单、快速、选择性和重现性都较好,具有一定实用价值。

高效液相色谱法测定速效感冒胶囊中三种成分的含量

速效感冒胶囊为较常用的抗感冒药,其主要成分为对乙酰氨基酚、扑尔敏、咖啡因、人工牛黄,关于它的含量测定方法,山东省药品标准只收载了对乙酰氨基酚的含量测定,方法为用重氮化法外指示剂确定终点,该法操作麻烦终点不明显,误差较大。

蚕用氯霉素溶液含量检测方法的比较

氯霉素（Chloramphenicolum）为D—苏式一1—对硝基—2—二氯乙酰胺基—1．3一丙二醇,分子式C11H12Cl2N2O5,分子量323.13.氯霉素为广谱抗菌素.主要作用在细菌核糖核蛋白体50S亚单位,抑制转肽酶的活性,阻止肽链的延长,抑制蛋白质的合成,对革兰氏阴性菌的作用强于革兰氏阳性菌,主要用于家蚕的黑胸败血病、灵菌败血病、青头败血病、卒倒病、细菌性胃肠病等细菌性病害.

盐酸普鲁卡因注射剂含量测定方法的比较

盐酸普鲁卡因注射剂是临床常用的局部麻醉药,其制剂的含量测定常采用天津医院制剂规范(1980年)的中和法,重氮化法天津(药检所)和永停滴定法(cp1985),这几种方法均较力繁琐、费时。在美国、英国等国家已采用紫外分光光度法,对普鲁卡因注射利进行含量测定。为此我们参考有关文献,应用紫外分光光度法进行检验,其回收率为99.98％,我们认为此方法在医院药房有推广应用价值,特做了如下报告。

永停滴定仪检定方法的研究

永停滴定仪广泛应用于药品生产企业和药品检验机构的容量分析,在容量分析中用以确定滴定终点的仪器,主要用于药品检验重氮化法的滴定终点指示。永停滴定仪在药品检验中大量使用,其量值准确与否直接影响芳香伯胺类药物检测质量的水平。但是,我国目前还没有统一的永停滴定仪检定规程和国家标准及行业标准,无法进行周期检定。本文根据作者长期以来对理化仪器检定工作的经验,探索出一套检定方法以供广大计量检定人员参考。

氯霉素免疫原的合成与鉴定

分别采用混合酸酐法和重氮化法合成氯霉素（ＣＡＰ）免疫原。混合酸酐法：将ＣＡＰ与琥珀酸酐反应生成氯霉素琥珀酸酯（ＣＡＰ－ＨＳ），接着进行混合酸酐反应，将ＣＡＰ－ＨＳ与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）相连，得ＣＡＰ－ＨＳ－ＢＳＡ复合物。重氮化法：将ＣＡＰ分子中的芳香硝基还原为芳香氨基，重氮化处理后，与ＢＳＡ连接。通过红外光谱和动物免疫试验鉴定合成的免疫原，结果表明ＣＡＰ－ＨＳ－ＢＳＡ合成成功。

氯霉素-BSA和氯霉素-OVA偶联物的制备与鉴定

目的:制备氯霉素(CAP)-牛血清白蛋白(BSA)及氯霉素(CAP)-卵清白蛋白(OVA)的偶联物并进行鉴定。方法:分别采用混合酸酐法和重氮化法制备CAP-BSA及CAP-OVA的偶联物,前者是将CAP先与琥珀酸酐反应生成CAP-半琥珀酸酯(CAP-HS),再进行混合酸酐反应。将反应产物CAP-HS与BSA结合,合成CAP-HS-BSA偶联物;后者是将CAP分子中的苯环上的硝基还原为氨基后,进行重氮化处理,然后分别与BSA和OVA连接,合成CAP-BSA和CAP-OVA复合物。结果:紫外图谱分析表明,CAP-BSA、CAP-OVA和CAP-HS-BSA的紫外最大吸收峰分别是262nm、213nm和275nm;计算得CAP与载体蛋白BSA、OVA及HS的偶联比分别为5∶1、12∶1和22∶1。结论:成功的制备CAP-BSA及CAP-OVA的偶联物,为免疫动物制备抗CAP的抗体奠定了基础。

盐酸克伦特罗酶标抗原的制备及鉴定

选取辣根过氧化物为抗原标记酶,采用重氮化法将盐酸克伦特罗CLEN分别与牛血清蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)偶联,合成包被抗原和免疫原,并通过紫外光谱扫描(UV)、SDS聚丙烯酞胺凝胶电泳法验证偶联成功。这为下一步获得针对盐酸克伦特罗类特异性单克隆抗体制备及其相应食品安全检测试剂盒开发奠定了基础。

食品中残留盐酸克伦特罗免疫原的合成与鉴定

盐酸克伦特罗是一种只具有免疫反应性不具有免疫原性的小分子半抗原。本文采用重氮化法将其与牛血清白蛋白交联,用紫外扫描和SDS变性凝胶电泳方法检验。并用合成的CL_BSA免疫小鼠,经ELISA检验,小鼠产生了针对CL的抗体,表明合成的CL_BSA复合物具有免疫原性,为盐酸克伦特罗单克隆抗体的制备及其检测试剂盒的研制奠定了基础。

磺胺间甲嘧啶人工抗原的制备

采用重氮化法,将磺胺间甲嘧啶(SM1)与牛血清蛋白(BSA)偶联制备合成抗原BSA-SM1,并用作免疫抗原,用紫外扫描法和聚丙烯酰胺电泳法对其进行鉴定,并测得偶联的结合比。结果表明,通过紫外扫描和聚丙烯酰胺电泳法的测定证明偶联成功,偶联的结合比为9∶1。用BSA-SDM免疫BALB/C小鼠,间接ELISA测定多抗上清(pAb)效价,获得了高效价的pAb,为SM1残留免疫学检测方法的建立奠定了基础。

对甲苯腈生产工艺评析

简要叙述了对甲苯腈的用途、生产工艺 ,着重对各生产工艺的特点、技术经济进行评析。