抗菌肽Alloferon-1串联式重组表达及其表达产物体外抗肿瘤活性的研究

目的:构建串联式表达Alloferon-1的原核重组表达系统,检测合成及重组表达的Alloferon-1体外抗肿瘤细胞活性。方法:采用连接引物PCR法,构建含6×His-EK-8×Alloferon-1-EK-6×His序列的人工融合基因;采用常规分子生物学方法克隆并构建该人工融合基因及其原核表达系统;采用SDS-PAGE和BioRad凝胶图象分析系统了解目的重组产物8×rAlloferon-1-EK表达情况和产量;采用Ni-NTA亲和层析及EK酶切和Sephadex G-50层析法提纯8×rAlloferon-1-EK及rAlloferon-1-EK;采用MTT法检测rAlloferon-1-EK体外抑制KB、SGC和HL-60肿瘤细胞增殖的作用,并与直接合成的Alloferon-1(sAlloferon-1)和Alloferon-1-EK(sAlloferon-1-EK)的抗肿瘤作用比较。结果:获得了序列正确的目的人工融合基因克隆及其原核表达系统pET42a-8×rAlloferon-1-EK-E.coliBLDE3。在IPTG诱导下,该原核重组表达系统可表达串联式目的重组蛋白8×rAlloferon-1-EK,其产量约为细菌总蛋白的30%。Ni-NTA和Sephadex G-50层析后,可分别获得8×rAlloferon-1-EK和rAlloferon-1-EK。在25~100μg/ml剂量范围内,sAlloferon-1、sAlloferon-1-EK和rAlloferon-1、rAlloferon-1-EK均有明显抑制KB、SGC和HL-60肿瘤细胞生长及增殖的效果(P<0.01),且四者抑制作用无明显差异(P>0.05)。结论:本研究成功构建了串联表达rAlloferon-1的原核表达系统,其表达产物具有与合成的Alloferon-1和Alloferon-1-EK相似的体外抗肿瘤细胞活性。

PEG-G-CSF在多发性骨髓瘤外周血造血干细胞动员及预处理后造血重建中的应用进展

诱导化疗序贯自体外周血造血干细胞移植是适合移植多发性骨髓瘤患者的一线治疗方案,能延长患者无进展生存期和总生存期,而聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子由于其有效、稳定和安全的优点,在多发性骨髓瘤自体外周血造血干细胞动员及预处理后造血重建方面的应用越来越广泛。本文对聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子在多发性骨髓瘤外周血造血干细胞动员及预处理后造血重建的作用机制及具体影响作一综述。

益赛普治疗幼年型类风湿关节炎的临床疗效及对血清TNFα和IL-1β的影响

目的探讨重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体C抗体融合蛋白（益赛普）治疗幼年型类风湿关节炎的临床疗效以及对血清肿瘤坏死因子α（TNFα）及白介素1β（IL-1β）的影响。方法幼年型类风湿关节炎患者12例,女性11例,男性1例,使用益赛普治疗,12.5 mg,皮下注射,每周2次,治疗8周,观察患者关节疼痛、肿胀、晨僵时间、握力、患者总体评估、医生评分等临床症状的改善情况,并检测血沉、C反应蛋白（CRP）、血清TNFα及IL-1β的浓度。结果益赛普起效迅速,所有的患者在第2周达到了临床缓解ACR20。治疗8周,50%（6/12）的患者获得了ACR70缓解,血清TNFα及IL-1β的浓度显著下降（P〈0.05）。结论益赛普治疗幼年型类风湿关节炎短期疗效非常明显,能作为治疗难治性幼年型类风湿关节炎诱导缓解的首选药物,其长期疗效以及安全性有待进一步观察。