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重组γ干扰素的表达与纯化 被引量:3
1
作者 吴玲 牛勃 +1 位作者 解军 赵建滨 《山西医科大学学报》 CAS 2000年第4期289-291,共3页
目的 探讨γ干扰素在大肠杆菌中的表达及纯化方法 ,为下一步批量生产提供实验依据。方法 应用DNA重组技术把中国人淋巴细胞mRNA反转录产物IFN -γcDNA克隆到原核表达质粒 pBV2 2 0上 ,构建出pBVIFN高效表达载体 ,转化大肠杆菌 plyss... 目的 探讨γ干扰素在大肠杆菌中的表达及纯化方法 ,为下一步批量生产提供实验依据。方法 应用DNA重组技术把中国人淋巴细胞mRNA反转录产物IFN -γcDNA克隆到原核表达质粒 pBV2 2 0上 ,构建出pBVIFN高效表达载体 ,转化大肠杆菌 plyss。通过温度诱导 ,高效表达IFN -γcDNA。然后 ,经过包涵体溶解、复性、浓缩及DEAE离子交换层析 ,使γ干扰素纯化。结果 IFN -γcDNA表达水平占菌体可溶性蛋白的 40 4% ,包涵体纯度为 70 % ,总生物活性为 1 2 7× 10 9U ,比活性达 1.31× 10 9U/L蛋白 ,活性回收率为 77.7%。 展开更多
关键词 重组γ干扰素 分子克隆 重组DNA
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重组γ干扰素治疗类风湿性关节炎研究进展 被引量:1
2
作者 江裔发 鲍春德 《国外医学(预防.诊断.治疗用生物制品分册)》 1995年第6期254-255,共2页
重组γ干扰素治疗类风湿性关节炎的临床试验表明,重组γ干扰素可被人体耐受,安全性较好,发热等副反应较低,其毒性发生率低于大多数类风湿性关节炎药物,有效率为40%~60%。研究人员将进一步探索γ干扰素单独或联合使用治疗严重类风湿... 重组γ干扰素治疗类风湿性关节炎的临床试验表明,重组γ干扰素可被人体耐受,安全性较好,发热等副反应较低,其毒性发生率低于大多数类风湿性关节炎药物,有效率为40%~60%。研究人员将进一步探索γ干扰素单独或联合使用治疗严重类风湿性关节炎的效果。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 免疫疗法 干扰素 重组γ干扰素
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人重组γ干扰素对大鼠和狗的毒性(英文) 被引量:1
3
作者 袁伯俊 方裕强 +3 位作者 刘俊平 陆国才 杨幼明 周光兴 《中国药理学报》 CSCD 1995年第4期308-310,共3页
目的:研究人重组γ干扰素(Hu-rIFN-7)对小鼠的急性毒性及对大鼠、狗的长期毒性.方法:小鼠肌注或静注Hu-rIFN-γ 4.4×10~9IUm^(-2)观察一周.长期毒性研究中,肌注给予临床推荐剂量1×10~6IU m^(-2)的10,50及100倍(大鼠)及5和50倍... 目的:研究人重组γ干扰素(Hu-rIFN-7)对小鼠的急性毒性及对大鼠、狗的长期毒性.方法:小鼠肌注或静注Hu-rIFN-γ 4.4×10~9IUm^(-2)观察一周.长期毒性研究中,肌注给予临床推荐剂量1×10~6IU m^(-2)的10,50及100倍(大鼠)及5和50倍(狗),观察血液学、血液生化、尿分析、心电图和组织器官的病理变化.结果:Hu-rIFN-γ对小鼠im或iv的最大耐受剂量为4.4×109 IU m^(-2).长期毒性试验中未发现药物相关的毒性.结论:人重组γ干扰素对大鼠及狗不产生毒性反应. 展开更多
关键词 重组γ干扰素 毒理学 病理学 干扰素
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重组干扰素γ的中间试制 被引量:4
4
作者 童葵塘 宋一鸣 +5 位作者 应国光 王光娟 王韦 庄晨杰 侯云德 张智清 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期134-139,共6页
用带有表达质粒pBV220(含有γ干扰素基因)的大肠杆菌DH5α株进行发酵培养,3批中试的菌产量平均为14.1克/L,γ干扰素的表达量平均为1.02×109IU/L,收集的菌体经高压匀质破菌后收集包涵体,用7mo... 用带有表达质粒pBV220(含有γ干扰素基因)的大肠杆菌DH5α株进行发酵培养,3批中试的菌产量平均为14.1克/L,γ干扰素的表达量平均为1.02×109IU/L,收集的菌体经高压匀质破菌后收集包涵体,用7mol/L盐酸胍提取干扰素,此过程可去除78.4%菌体蛋白,而干扰素活性仅损失10.41%,粗制干扰素经复性可使干扰素活性提高405%,比活也有明显提高,3批平均为1.76×107IU/mg蛋白,复性γ干扰素用三步柱层析法进行纯化,其其得率平均为28.13%,其比活分别为3.22、2.78和3.01×107IU/mg蛋白。3批中试的纯化γ干扰素纯度在SDS-PAGE测定均>99%,高效液相层析(HPLC)测定>98%,其它检定项目也均合乎规程要求。 展开更多
关键词 重组γ干扰素 中间试制 基因工程
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重组鸡干扰素对E.tenella卵囊免疫后肠上皮组织结构的影响 被引量:6
5
作者 叶秀华 蔡建平 +1 位作者 吴志光 汪明 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期484-486,共3页
取AA肉鸡,在其7日龄和14日龄时分别给予柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)孢子化卵囊进行首免和二免,并同时肌肉注射5 000 U重组鸡γ干扰素(rCh IFN-γ)后,于21日龄以同源E.tenella攻虫。试验结果表明,rCh IFN-γ协同球虫活卵囊免疫可减少由于... 取AA肉鸡,在其7日龄和14日龄时分别给予柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)孢子化卵囊进行首免和二免,并同时肌肉注射5 000 U重组鸡γ干扰素(rCh IFN-γ)后,于21日龄以同源E.tenella攻虫。试验结果表明,rCh IFN-γ协同球虫活卵囊免疫可减少由于球虫病造成的体质量下降,降低OPG值和肠道病变记分,提高抗球虫指数(AC I);同时还发现,rCh IFN-γ能够显著增加肠道绒毛高度、肠隐窝深度、刷状缘厚度(=α0.05)。由此表明,rCh IFN-γ可以减轻由于球虫感染所造成的肠道黏膜损伤,促进肠道的吸收功能,进而减轻球虫病所造成的增重损失,对球虫活卵囊疫苗的免疫有一定的免疫增强效果。 展开更多
关键词 鸡球虫活卵囊 免疫 重组γ干扰素 肠黏膜上皮结构
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重组鸡γ干扰素对柔嫩艾美球虫卵囊免疫鸡肠道免疫相关细胞数量的影响 被引量:3
6
作者 叶秀华 蔡建平 +3 位作者 吴志光 易亚斯 佘锐萍 汪明 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期715-720,共6页
分别给7日龄和14日龄雏鸡免疫柔嫩艾美球虫孢子化卵囊并同时肌肉注射5000 U重组鸡γ干扰素(rChIFN-γ),21日龄再以5×104个同源柔嫩艾美球虫孢子化卵囊攻虫。分别取试验鸡各肠段制作组织切片,经HE和PAS染色后显微镜检查。发现21日龄... 分别给7日龄和14日龄雏鸡免疫柔嫩艾美球虫孢子化卵囊并同时肌肉注射5000 U重组鸡γ干扰素(rChIFN-γ),21日龄再以5×104个同源柔嫩艾美球虫孢子化卵囊攻虫。分别取试验鸡各肠段制作组织切片,经HE和PAS染色后显微镜检查。发现21日龄时,rChIFN-γ加强免疫组鸡肠道黏膜上皮内淋巴细胞(IELs,9.8)和杯状细胞(GCs,26.2)数量显著高于免疫对照组(8.2、24.9);28日龄时,加强免疫组的IELs和GCs数量进一步增多(13.5、34.1)并显著高于免疫对照组(11.8、26.9)。用改良甲苯胺蓝组织化学染色法检测发现,rChIFN-γ可增加十二指肠、空肠、回肠和盲肠黏膜上皮肥大细胞(MCs)数量。结果提示,rChIFN-γ可有效刺激试验鸡肠道黏膜IELs、GCs和MCs的分化与增殖,具有增强肠道黏膜非特异性免疫的作用。 展开更多
关键词 重组γ干扰素 柔嫩艾美球虫 肠黏膜上皮内淋巴细胞 杯状细胞 肥大细胞
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重组猪γ干扰素对仔猪外周血T淋巴细胞亚群及IL-2、IFN-γ水平影响的研究 被引量:5
7
作者 李涛 马凤龙 +3 位作者 朱连勤 乔彦良 朱风华 马小明 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2008年第2期167-169,220,共4页
选28日龄健康仔猪16头,随机分为4组。1组为对照组,肌肉注射生理盐水;2-4组为试验组,分别肌注重组猪IFN-γ注射液(rpoIFN-γ)4万、40万、400万单位/头,注射液体积均为4 ml,研究rpoIFN-γ对猪外周血T细胞亚群及血清IL-2、IFN-γ含量的... 选28日龄健康仔猪16头,随机分为4组。1组为对照组,肌肉注射生理盐水;2-4组为试验组,分别肌注重组猪IFN-γ注射液(rpoIFN-γ)4万、40万、400万单位/头,注射液体积均为4 ml,研究rpoIFN-γ对猪外周血T细胞亚群及血清IL-2、IFN-γ含量的影响。结果发现:2组在试验第7天CD3^+亚群比例、第7天和第14天CD4^+亚群比例及CD4^+/CD8^+比值、第1天和第3天血清IL-2水平显著高于对照组(P〈0.05);3组在试验第14天CD3^+和CD4^+亚群比例、CD4^+/CD8^+比值、血清IFN-γ含量,第7天、28天CD8^+亚群比例,第14天、21天、28天血清IL-2含量显著高于对照组(P〈0.05);4组CD8^+亚群比例在第28天显著高于对照组(P〈0.05)。表明注射rpoIFN-γ对仔猪的细胞免疫有促进作用,肌注的适宜剂量是40万单位/头。 展开更多
关键词 断奶仔猪 重组γ干扰素 细胞免疫
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重组基因γ干扰素治疗支气管哮喘疗效观察 被引量:1
8
作者 刘光辉 祝戎飞 +4 位作者 王忠喜 黄爱霞 李文静 陈欢 张威 《药物流行病学杂志》 CAS 2004年第5期230-231,共2页
目的 :研究重组基因γ干扰素在治疗支气管哮喘中的作用。方法 :采用随机对照研究法 ,选取支气管哮喘患者 6 0例 ,随机分两组 ,每组 30例 ,对照组予常规脱敏治疗 ,试验组予常规脱敏治疗及重组基因γ干扰素治疗。 6个月后比较两组的症状... 目的 :研究重组基因γ干扰素在治疗支气管哮喘中的作用。方法 :采用随机对照研究法 ,选取支气管哮喘患者 6 0例 ,随机分两组 ,每组 30例 ,对照组予常规脱敏治疗 ,试验组予常规脱敏治疗及重组基因γ干扰素治疗。 6个月后比较两组的症状积分、肺功能、血清IL 4、ECP水平。结果 :对照组和试验组均能改善症状积分和肺功能 ,降低血清IL 4水平及ECP水平。与对照组相比 ,试验组在改善哮喘患者症状积分、降低血清IL 4、ECP方面作用更明显 (P <0 .0 5 )。结论 :重组基因γ干扰素能降低支气管哮喘患者血清IL - 4、ECP的水平 ,改善哮喘患者症状及肺功能 ,在支气管哮喘的治疗中发挥着免疫调节的作用。 展开更多
关键词 重组基因γ干扰素 哮喘 ECP IL-4
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基因重组干扰素γ雾化吸入治疗毛细支气管炎的临床疗效分析
9
作者 张翠香 黄建萍 +3 位作者 陈冰 姚淑娴 高虹 王亚宇 《医学理论与实践》 2007年第12期1419-1420,共2页
目的:探讨基因重组人γ干扰素(γIFN-γ)雾化吸入对毛细支气管炎临床治疗效果。方法:对49例毛细支气管炎患儿进行分组,治疗组25例,对照组24例。观察患儿发热、咳嗽、喘憋缓解所需时间及平均住院天数。结果:治疗组各项观察指标消失所需... 目的:探讨基因重组人γ干扰素(γIFN-γ)雾化吸入对毛细支气管炎临床治疗效果。方法:对49例毛细支气管炎患儿进行分组,治疗组25例,对照组24例。观察患儿发热、咳嗽、喘憋缓解所需时间及平均住院天数。结果:治疗组各项观察指标消失所需天数比对照组明显缩短,结果比较存在显著性差异(P<0.01)。结论:γ干扰素(γIFN-γ)雾化吸入治疗是婴儿毛细支气管炎较为有效的治疗方法。 展开更多
关键词 毛细支气管炎 雾化吸入 重组γ干扰素
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重组人γ干扰素雾化吸入治疗小儿呼吸道病毒感染100例 被引量:2
10
作者 刘耘 尹千里 《中国医药科学》 2015年第18期52-54,118,共4页
目的探讨呼吸道病毒感染患儿临床治疗中,重组人γ干扰素雾化吸入治疗方法的应用效果。方法将2014年2月~2015年2月在我院感染科治疗的200例小儿呼吸道病毒感染患者当作研究对象,采用双盲法把患者分为两组,对照组采用常规治疗方法进行治疗... 目的探讨呼吸道病毒感染患儿临床治疗中,重组人γ干扰素雾化吸入治疗方法的应用效果。方法将2014年2月~2015年2月在我院感染科治疗的200例小儿呼吸道病毒感染患者当作研究对象,采用双盲法把患者分为两组,对照组采用常规治疗方法进行治疗,观察组在此基础上采用辅助重组人γ干扰素雾化吸入方法进行治疗,两组患者用药7d后比较治疗效果,包括患者临床症状改善时间、免疫学指标以及不良反应发生情况等。结果经过观察对比,观察组患者治疗有效率为95%,对照组患者治疗有效率为86%,观察组治疗有效率明显高于对照组,差异有统计学意义(P〈0.05);在患者咳嗽、气喘、发热、肺部湿啰音等症状改善时间上,观察组明显短于对照组,差异有统计学意义(P〈0.05);在治疗后Ig E水平上,观察组患者明显低于对照组,差异存在统计学意义(P〈0.05),而在Ig A、Ig G、Ig M水平上,两组无明显差异,差异不存在统计学意义(P〉0.05);在IL-4及IFN-γ改善情况上,观察组明显优于对照组,差异有统计学意义(P〈0.05);且在不良反应发生率上,两组不存在明显差异,差异不具有统计学意义(P〉0.05)。结论重组人γ干扰素雾化吸入治疗小儿呼吸道病毒感染效果显著,能加速改善患者临床症状,增强患者机体免疫功能,效果显著,值得临床推广。 展开更多
关键词 小儿呼吸道病毒感染 重组γ干扰素 雾化吸入治疗
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重组人γ干扰素防止尖锐湿疣电灼术后复发的疗效观察 被引量:1
11
作者 和艳琴 《皮肤病与性病》 2003年第3期56-56,共1页
关键词 重组γ干扰素 尖锐湿疣 电灼术 复发 疗效 人类乳头瘤病毒
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重组猪γ干扰素对猪瘟弱毒疫苗免疫效果的影响
12
作者 李涛 曲平平 +1 位作者 王志远 李进 《上海畜牧兽医通讯》 2016年第1期36-37,共2页
为研究rPoIFN-γ对HCV血清抗体产生的影响,选28日龄健康仔猪16头,随机分为4组,第1组为对照组,2~4组为试验组。各组均免疫HCV疫苗2头份,同时第1组分点肌注生理盐水4 mL/头;2~4组分别分点肌注rPoIFN-γ注射液4万单位/头(4 mL)、40万单位... 为研究rPoIFN-γ对HCV血清抗体产生的影响,选28日龄健康仔猪16头,随机分为4组,第1组为对照组,2~4组为试验组。各组均免疫HCV疫苗2头份,同时第1组分点肌注生理盐水4 mL/头;2~4组分别分点肌注rPoIFN-γ注射液4万单位/头(4 mL)、40万单位/头(4mL)、400万单位/头(4mL)。结果显示,免疫HCV疫苗后第28d,2组血清抗体水平显著高于第1组(P〈0.05);试验第21、28d和42d,第3组血清抗体水平显著高于第1组(P〈0.05);试验至28d和35d,第4组血清抗体水平显著高于第1组(P〈0.05)。试验结果表明,肌肉注射一定剂量的rPoIFN-γ促进了HCV血清抗体的产生,增强了疫苗免疫效果;适宜注射剂量为40万单位/头。 展开更多
关键词 仔猪 重组γ干扰素 猪瘟疫苗
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γ干扰素对慢性乙型肝炎患者肝功能和纤维化指标的影响
13
作者 王永亮 《中国乡村医药》 2010年第4期15-16,共2页
慢性乙型病毒性肝炎(简称乙肝)是肝硬化的主要病因,肝纤维化是慢性乙肝向肝硬化发展的必经病理过程。目前已知重组人γ干扰素有确切抗肝纤维化作用。本研究通过观察γ干扰素对幔性乙肝患者肝纤维化指标透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(P... 慢性乙型病毒性肝炎(简称乙肝)是肝硬化的主要病因,肝纤维化是慢性乙肝向肝硬化发展的必经病理过程。目前已知重组人γ干扰素有确切抗肝纤维化作用。本研究通过观察γ干扰素对幔性乙肝患者肝纤维化指标透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(IVC)、层黏蛋白(LN)的影响,来探讨其抗肝纤维化效果。 展开更多
关键词 肝纤维化指标 慢性乙型肝炎患者 抗肝纤维化作用 重组γ干扰素 肝功能 慢性乙型病毒性肝炎 慢性乙肝 Ⅲ型前胶原
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鸡IFN-γ基因重组蛋白复性条件的优化及生物活性鉴定 被引量:1
14
作者 刘鼎阔 王立红 +4 位作者 徐大为 杨爱华 王建春 秦操 张勇 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第3期52-57,共6页
为提高鸡IFN-γ基因重组蛋白的复性效率,用18种不同的复性缓冲液对在大肠埃希菌中表达的cIFN-γ进行复性处理,通过SDS-PAGE分析、考马斯亮蓝定量、对鸡胚成纤维细胞以及对鸡胚的保护试验检测复性产物的得率和生物学活性。结果表明,去污... 为提高鸡IFN-γ基因重组蛋白的复性效率,用18种不同的复性缓冲液对在大肠埃希菌中表达的cIFN-γ进行复性处理,通过SDS-PAGE分析、考马斯亮蓝定量、对鸡胚成纤维细胞以及对鸡胚的保护试验检测复性产物的得率和生物学活性。结果表明,去污剂和疏水剂能保证蛋白的复性得率和复性效率,重组表达产物得率可高达94.7%;氧化还原电势是cIFN-γ成功复性的关键,有生物学活性的复性产物的复性液中均存在氧化还原对GSSG/GSH;经去污剂处理后再复性的产物对细胞保护的有效浓度显著低于直接复性的蛋白。 展开更多
关键词 重组γ干扰素 复性条件 生物学活性
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慢性肉芽肿病中远期随访和感染预防性药物的效果分析 被引量:5
15
作者 惠晓莹 孙金峤 +5 位作者 高维银 应文静 刘丹如 俞晔珩 王静漪 王晓川 《中国循证儿科杂志》 CSCD 2012年第5期321-325,共5页
目的探讨慢性肉芽肿病(CGD)患儿使用人重组IFN-γ(rhIFN-γ)、复方磺胺甲唑联合用药的疗效和安全性。方法对2004年1月至2011年12月复旦大学附属儿科医院诊断的CGD患儿进行随访研究,包括感染部位、感染病原体、非感染性炎症反应和药物治... 目的探讨慢性肉芽肿病(CGD)患儿使用人重组IFN-γ(rhIFN-γ)、复方磺胺甲唑联合用药的疗效和安全性。方法对2004年1月至2011年12月复旦大学附属儿科医院诊断的CGD患儿进行随访研究,包括感染部位、感染病原体、非感染性炎症反应和药物治疗等。比较联合使用rhIFN-γ和复方磺胺甲唑以及单用复方磺胺甲唑治疗前后的感染发生频率,分析感染预防性用药的有效性和安全性。结果 29例CGD患儿纳入本研究,平均发病和诊断年龄分别为2.5月龄和2.4岁,人均随访时间为2.9年。①每年人均感染发生频率为1.28,其中严重感染和非严重感染发生频率分别为0.48和0.80。肺部和淋巴结感染是诊断前(49和26例次)和随访期间(26和37例次)最常见的感染部位,分枝杆菌是导致本组患儿感染(34/61例次)和死亡(3/4例)的主要原因。②21例联合用药,8例因出现rhIFN-γ不良反应或自行停药而单用复方磺胺甲唑。联合用药组总感染和严重感染每年人均发生频率均较治疗前明显降低(总感染:1.986vs1.098,P=0.002;严重感染:1.290vs0.452,P=0.001),以肺部感染最明显(0.758vs0.275,P=0.004)。单用复方磺胺甲唑组总感染、严重感染每年人均感染发生频率较使用前差异均无统计学意义。联合用药组较单用复方磺胺甲唑组总感染和非严重感染每年人均发生频率明显降低(总感染:1.098vs1.823,P=0.015;非严重感染:0.646vs1.248,P=0.047),而严重感染每年人均发生频率差异无统计学意义(0.452vs0.576,P=0.254)。③14/29例(48.3%)使用rhIFN-γ治疗后出现不良反应,以发热为主要表现(12/29例),未发现致命性不良反应。结论分枝杆菌是导致本组CGD患儿感染和死亡的主要原因。rhIFN-γ、复方磺胺甲唑联合治疗方案可明显降低CGD患儿感染发生频率,rhIFN-γ是CGD患儿安全有效的治疗药物。 展开更多
关键词 慢性肉芽肿病 感染 分枝杆菌 重组γ干扰素 治疗
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重组猪γ干扰素对猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗免疫效果的影响 被引量:1
16
作者 李涛 屈平平 王志远 《黑龙江畜牧兽医(下半月)》 北大核心 2016年第8期157-159,共3页
为了研究重组猪γ干扰素(r Po IFN-γ)对疫苗免疫效果的影响,试验选取35日龄健康仔猪16只,随机分为4组,1组为对照组,2,3,4组为试验组。各组均免疫PRRS弱毒疫苗1头份,同时1组分点肌肉注射生理盐水4 m L/头;2,3,4组分别分点肌肉注射r Po I... 为了研究重组猪γ干扰素(r Po IFN-γ)对疫苗免疫效果的影响,试验选取35日龄健康仔猪16只,随机分为4组,1组为对照组,2,3,4组为试验组。各组均免疫PRRS弱毒疫苗1头份,同时1组分点肌肉注射生理盐水4 m L/头;2,3,4组分别分点肌肉注射r Po IFN-γ注射液4万单位(4 m L)/头、40万单位(4 m L)/头、400万单位(4 m L)/头,研究r Po IFN-γ对PRRS弱毒疫苗血清ELISA抗体和中和抗体产生的影响。结果表明:在免疫PRRS弱毒疫苗后第14天,3组ELISA抗体水平显著高于其他组(P<0.05);试验至第35天,2,3,4组ELISA抗体水平显著高于1组(P<0.05)。免疫PRRS弱毒疫苗21 d后,试验组血清中和抗体水平高于对照组,但各组差异不显著(P>0.05)。说明肌肉注射一定剂量r Po IFN-γ增强了疫苗免疫效果。 展开更多
关键词 仔猪 重组γ干扰素 猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗 ELISA抗体 中和抗体
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Inhibition of hepatitis B virus DNA replicative intermediate forms by recombinant interferon-γ 被引量:10
17
作者 Mohammad Khalid Parvez Deepak Sehgal +2 位作者 Shiv Kumar Sarin Seemi Farhat Basir Shahid Jameel 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2006年第19期3006-3014,共9页
AIM: To evaluate the in vitro anti-HBV activity of recombinant human IFN-γ, alone and in combination with lamivudine. METHODS: A recombinant baculovirus-HBV/HepG2 culture system was developed which could support prod... AIM: To evaluate the in vitro anti-HBV activity of recombinant human IFN-γ, alone and in combination with lamivudine. METHODS: A recombinant baculovirus-HBV/HepG2 culture system was developed which could support productive HBV infection in vitro. Expression of HBsAg and HBeAg in infected HepG2 culture medium was detected by commercial enzyme immunoassays. HBV DNA replication intermediates were detected in infected cells by Southern hybridization and viral DNA load was determined by dot hybridization. RESULTS: IFN-γat 0.1 to 5μg/L efficiently down regulated HBsAg expression in transduced HepG2 cells. At 5μg/L, IFN-γalso suppressed HBV DNA replication in these cells. While treatment with a combination of lamivudine and IFN-γshowed no additive effect, sequential treatment first with lamivudine and then IFN-γwas found to be promising. In this culture system the best HBV suppression was observed with a pulse of 2μmol/L lamivudine for two days, followed by 1μg/L IFN-γfor another four days. Compared to treatment with lamivudine alone, the sequential use of 0.2μmol/L lamivudine for two days, followed by 5μg/L IFN-γfor six days showed a 72% reduction in HBV cccDNA pool. CONCLUSION: This in vitro study warrants further evaluation of a combination of IFN-γand lamivudine, especially in IFN-αnon-responder chronic hepatitis B patients. A reduced duration of lamivudine treatment would also restrict the emergence of drug-resistant HBV mutants. 展开更多
关键词 Hepatitis B virus (HBV) LAMIVUDINE INTERFERON-Γ Replicative intermediates CCCDNA
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