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重组Ⅱ型溶瘤单纯疱疹病毒纯化工艺的建立 被引量:1
1
作者 吴振 张紫怡 +5 位作者 汪洋 胡翰 石晓太 毛泽勇 方志正 刘滨磊 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第5期552-554,562,共4页
目的建立重组Ⅱ型溶瘤单纯疱疹病毒(oncolytic herpes simple virus typeⅡ,o HSV2)OH2纯化工艺,制备高纯度的病毒。方法采用不同粗滤材质[PDH4囊式过滤器、Bio20囊式过滤器、Ultipor GF U6-40、PP材质滤膜(聚丙烯膜)和CA材质滤膜(醋酸... 目的建立重组Ⅱ型溶瘤单纯疱疹病毒(oncolytic herpes simple virus typeⅡ,o HSV2)OH2纯化工艺,制备高纯度的病毒。方法采用不同粗滤材质[PDH4囊式过滤器、Bio20囊式过滤器、Ultipor GF U6-40、PP材质滤膜(聚丙烯膜)和CA材质滤膜(醋酸纤维膜)]澄清过滤后,使用不同的层析柱(Mustang Q、Sartobind Q囊式离子交换柱和Capto^(TM) Core 700)进行纯化,并根据确定的纯化工艺,进一步放大层析柱体积。依据病毒滴度的变化,选择合适的纯化工艺条件。结果 PP及CA材质滤膜过滤病毒液后滴度变化较小,二者对病毒吸附较低;Mustang Q、Sartobind Q囊式离子交换柱纯化OH2病毒时收率最高为13%,而Capto^(TM) Core 700在AKTA仪上纯化高滴度的病毒液时几乎不损失病毒;使用Capto^(TM) Core 700进行柱体积放大后,柱床直径为26 mm时,纯化后病毒的滴度及收率较理想。结论使用CA膜过滤细胞裂解液后,采用Capto^(TM) Core 700进行柱层析,可制备高纯度的OH2。 展开更多
关键词 重组ⅱ型溶瘤单纯疱疹病毒 纯化 Capto^(TM) CORE 700
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包皮中单纯疱疹病毒Ⅱ型和人乳头瘤病毒的检测 被引量:9
2
作者 侯炜 马胜利 +3 位作者 杨占秋 毛琳 刘汉燕 胡礼泉 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2003年第1期70-71,共2页
关键词 单纯疱疹病毒 人乳头病毒 包皮 阴茎疾病 病毒性皮肤病
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女性人乳头状瘤病毒与单纯疱疹病毒Ⅱ型感染的相关性研究 被引量:3
3
作者 向华国 曾锦婷 +3 位作者 颜容 刘典浪 刘小君 高丹 《国际检验医学杂志》 CAS 2013年第5期609-610,共2页
目的探讨女性生殖道人乳头状瘤病毒(HPV)与单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)感染的相关性。方法对427例女性宫颈脱落细胞标本采用PCR-反向点杂交进行HPV-DNA分型检测,将其中的49例HPV阳性标本作为HPV阳性组,同时随机选取40例HPV阴性标本组作为... 目的探讨女性生殖道人乳头状瘤病毒(HPV)与单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)感染的相关性。方法对427例女性宫颈脱落细胞标本采用PCR-反向点杂交进行HPV-DNA分型检测,将其中的49例HPV阳性标本作为HPV阳性组,同时随机选取40例HPV阴性标本组作为对照组,再利用实时荧光PCR同时检测上述两组病例的HSV-Ⅱ感染情况。结果 HPV阳性组及HPV阴性组的HSV-Ⅱ阳性率分别为20.4%(10/49)和7.5%(3/40),HPV和HSV-Ⅱ的感染有显著的相关性(P<0.05)。结论女性生殖道HPV与HSV-Ⅱ感染具有协同作用并密切相关,早发现、早治疗对于预防宫颈癌具有十分重要的意义。 展开更多
关键词 人乳头状病毒 单纯疱疹病毒 反向点杂交 聚合酶链反应
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单纯疱疹病毒Ⅱ型DNA疫苗的免疫研究 被引量:2
4
作者 韩双艳 王捷 +2 位作者 杨慧兰 杨太成 冼江 《广东医学》 CAS CSCD 2004年第5期501-503,共3页
目的 构建新型单纯疱疹病毒Ⅱ型DNA疫苗 ,鉴定其在哺乳细胞中的表达 ,检测其激发动物产生免疫反应的能力。方法 RT -PCR鉴定gD基因在COS - 7细胞中的表达 ,ELISA检测血清中中和抗体水平 ,用病毒攻击后检测其保护效率。结果 pVAX -gD... 目的 构建新型单纯疱疹病毒Ⅱ型DNA疫苗 ,鉴定其在哺乳细胞中的表达 ,检测其激发动物产生免疫反应的能力。方法 RT -PCR鉴定gD基因在COS - 7细胞中的表达 ,ELISA检测血清中中和抗体水平 ,用病毒攻击后检测其保护效率。结果 pVAX -gD能在COS- 7细胞中表达 ,并可激发免疫动物产生高滴度中和抗体 ,有效保护动物免受致死量病毒的攻击。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒 DNA疫苗 免疫学 重组质粒 载体
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重组溶瘤2型单纯疱疹病毒荧光定量PCR检测方法的建立与验证 被引量:1
5
作者 王磊兰 陈莹 +1 位作者 吴基良 刘滨磊 《湖北科技学院学报(医学版)》 2020年第2期102-104,F0003,共4页
目的为了建立高效、敏感的针对重组溶瘤2型单纯疱疹病毒(oHSV2)的荧光定量PCR方法。方法依据oHSV2的基因序列,登录Beacon Designer 8.0软件设计引物,提取前期已重组好的阳性质粒pHG52d34.5CMVhGM-CSF,测定浓度并换算后梯度稀释为荧光定... 目的为了建立高效、敏感的针对重组溶瘤2型单纯疱疹病毒(oHSV2)的荧光定量PCR方法。方法依据oHSV2的基因序列,登录Beacon Designer 8.0软件设计引物,提取前期已重组好的阳性质粒pHG52d34.5CMVhGM-CSF,测定浓度并换算后梯度稀释为荧光定量PCR的模板,进行PCR反应。结果经过多次调整实验的反应条件和反应体系,熔解曲线为单一峰,该病毒与野生型Ⅰ型单纯疱疹病毒、野生型Ⅱ型单纯疱疹病毒等没有交叉反应。oHSV2最低检测限为1000 copies/μL,R^2可达0.997,批内及批间变异系数分别为0.357%~1.156%和1.06%~3.35%,体液(血液)中预加的oHSV2的回收率为96.6%~109.3%。结论成功建立了oHSV2的SYBR Green实时荧光定量PCR方法,可特异而灵敏地检测血浆中的oHSV2。 展开更多
关键词 重组单纯疱疹病毒 qPCR 建立
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溶瘤单纯疱疹病毒激活PBMC抗肿瘤的初步机制
6
作者 吴振 罗凯伦 +2 位作者 李雨莹 汪洋 刘滨磊 《湖北工业大学学报》 2019年第4期113-116,共4页
目的:研究重组Ⅱ型溶瘤单纯疱疹病毒激活外周血单核细胞的初步机制,为后续研究中激活的免疫细胞杀伤肿瘤奠定基础。材料:健康志愿者血液样本,灭活oHSV2。方法:灭活的oHSV2与分离的免疫细胞进行共孵育,采用CCK-8试剂盒以及qPCR的试验方法... 目的:研究重组Ⅱ型溶瘤单纯疱疹病毒激活外周血单核细胞的初步机制,为后续研究中激活的免疫细胞杀伤肿瘤奠定基础。材料:健康志愿者血液样本,灭活oHSV2。方法:灭活的oHSV2与分离的免疫细胞进行共孵育,采用CCK-8试剂盒以及qPCR的试验方法,检测细胞的增殖以及γ干扰素的相对表达量。结果:刺激的后PBMC与阴性对照组相比较,MOI=0.01条件下的细胞增殖具有统计学极显著差异(P<0.001)。经过病毒刺激后的PBMC中γ干扰素的mRNA表达量增高。 展开更多
关键词 重组ⅱ型溶瘤单纯疱疹病毒(oHSV2) 外周血单个核细胞 Γ干扰素
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单纯疱疹病毒II型CTL表位DNA疫苗的Th1/Th2免疫应答研究 被引量:5
7
作者 杨慧兰 周翠 +2 位作者 关蕾 赵举峰 樊建勇 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2007年第7期402-404,共3页
目的探讨单纯疱疹病毒II型(HSV-2)CTL表位疫苗对小鼠Th1/Th2型免疫应答的影响。方法用构建的HSV-2pVAX-gD-CTL重组质粒免疫BALB/c小鼠3次,末次免疫后第4周检测小鼠血清中gDIgG水平;MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖情况;ELISA法检测脾淋巴... 目的探讨单纯疱疹病毒II型(HSV-2)CTL表位疫苗对小鼠Th1/Th2型免疫应答的影响。方法用构建的HSV-2pVAX-gD-CTL重组质粒免疫BALB/c小鼠3次,末次免疫后第4周检测小鼠血清中gDIgG水平;MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖情况;ELISA法检测脾淋巴细胞培养上清中INF-γ,IL-4水平;流式细胞仪测定小鼠CD4+,CD8+T淋巴细胞亚群。结果HSV-2pVAX-gD-CTL疫苗免疫小鼠后可以诱导脾淋巴细胞增殖及分泌INF-γ和IL-4,诱导CD4+,CD8+T细胞百分比的升高;并能刺激血清HSV-2gD特异性抗体的产生。其中pVAX-gD-CTL组在脾淋巴细胞刺激指数及其分泌INF-γ水平、CD4+,CD8+T细胞百分比升高方面均显著高于pVAX-gD对照组。结论CTL表位对单纯疱疹II型重组DNA疫苗诱导的Th1型免疫应答有促进作用。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒 CTL表位 重组DNA疫苗 TH1/TH2免疫应答
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重组溶瘤Ⅱ型单纯疱疹病毒生产技术规范
8
《药物生物技术》 CAS 2024年第5期543-552,共10页
主要起草人陈媛、范九梅、方志正、高凯、胡文言、金燕京、刘滨磊、李少伟、刘琼、鲁惠萍、毛泽勇、饶春明、石晓太、夏南、余鹏威、朱涛、周斌起草单位武汉滨会生物科技股份有限公司、北京昭衍药物检定研究有限公司、康希诺生物股份公... 主要起草人陈媛、范九梅、方志正、高凯、胡文言、金燕京、刘滨磊、李少伟、刘琼、鲁惠萍、毛泽勇、饶春明、石晓太、夏南、余鹏威、朱涛、周斌起草单位武汉滨会生物科技股份有限公司、北京昭衍药物检定研究有限公司、康希诺生物股份公司、厦门大学前言本指南按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本标准适用于重组溶瘤Ⅱ型单纯疱疹病毒的生产管理、质量控制及质量保证等活动。 展开更多
关键词 重组单纯疱疹病毒 生产规范
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重组复制型溶瘤单纯疱疹病毒人细胞巨噬细胞集落刺激因子的质量研究 被引量:5
9
作者 高凯 付志浩 +4 位作者 李永红 王兰 陶磊 毕华 饶春明 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第19期1520-1525,共6页
目的研究建立重组复制型溶瘤单纯疱疹病毒人细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF,HSV1/GM-CSF)的质控方法与质量标准。方法采用限制性内切酶酶切与PCR法,对GM-CSF基因、单纯疱疹病毒载体ICP 34.5、ICP6、ICP47等改造结构进行鉴定。采用A26... 目的研究建立重组复制型溶瘤单纯疱疹病毒人细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF,HSV1/GM-CSF)的质控方法与质量标准。方法采用限制性内切酶酶切与PCR法,对GM-CSF基因、单纯疱疹病毒载体ICP 34.5、ICP6、ICP47等改造结构进行鉴定。采用A260紫外吸收法检测病毒颗粒数;pfu法测定HSV1/GM-CSF感染活性。HSV1/GM-CSF体外感染Vero细胞后,分别测定感染上清中GM-CSF表达量以及表达产物的生物学活性;测定HSV1/GM-CSF对肿瘤细胞MCF7的体外杀伤活性;HSV1/GM-CSF分别以相同MOI感染MCF7与二倍体人胚肺成纤维细胞MRC5后,分别测定细胞裂解上清中子代病毒的感染活性,并以子代病毒的感染活性比值来分析该制品在肿瘤细胞中的增殖复制能力。采用PCR法控制野生型单纯疱疹病毒等外源因子的残留。结果对重组HSV1/GM-CSG基因组的酶切、以及对所携带的GM-CSF基因、ICP 34.5、ICP6、ICP47基因改造区的PCR鉴定结果与理论值相符。病毒载体颗粒数为4.5×1010VP.mL-1,感染活性为4.3×107pfu.mL-1。HSV1/GM-CSF以MOI 0.01感染Vero细胞72 h后,ELISA检测上清中GM-CSF表达量为228 ng.mL-1,表达产物的生物学活为4.3×103U.mL-1。该基因治疗制剂对人乳腺癌肿瘤细胞MCF7体外杀伤的MOIIC50为0.08。以相同MOI感染并经pfu法检测,HSV1/GM-CSF在人乳腺癌肿瘤细胞MCF7与人胚肺成纤维二倍体细胞MRC5的增殖比值为308。未检出野生型单纯疱疹病毒。其他各项指标均符合《人基因治疗研究和制剂质量控制技术指导原则》及2005年版《中国药典》(三部)要求。结论初步建立了HSV1/GM-CSF的质控方法和质量标准,并已用于该制品的质量控制。 展开更多
关键词 重组单纯疱疹病毒载体 基因治疗 GM—CSF 质量控制
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AIDS患者肛周似瘤样肥大性单纯疱疹:5例病例报道
10
作者 Nadal S.R. Calore E.E. +1 位作者 Manzione C.R. 陈云茹 《世界核心医学期刊文摘(胃肠病学分册)》 2006年第5期22-23,共2页
Five patients (4 males; mean age, 46.4 years) with pain-ful verrucous perianal lesions caused by herpes simplex virus are described. All patients had had AIDS for a long time and were using highly active antiretrovira... Five patients (4 males; mean age, 46.4 years) with pain-ful verrucous perianal lesions caused by herpes simplex virus are described. All patients had had AIDS for a long time and were using highly active antiretroviral therapy. CD4+ counts ranged from 73 to 370/mm3. All lesions were submitted to resection under subdural anesthesia. Histologic examinations revealed epithelial hyperplasia and dense inflammatory process, composed mainly of lymphocytes and plasma cells, extended just to the hypodermis. Immunohistochemistry was positive for herpes simplex virus Type 2 in four patients and for herpes simplex virus Type 1 in one patient, and did not detect human papillomavirus antigens. Three patients had recurrences after 3, 10, and 12 months. Resection was performed on two patients; one had a new recurrence after three months. Oral acyclovir eliminated the lesion in the third patient. The analysis of our patients suggests that herpes simplex virus, Types 1 and 2, may cause verrucous lesions simulating neoplasia in patients with AIDS using antiretroviral therapy. 展开更多
关键词 AIDS患者 Ⅰ型单纯疱疹病毒 肛周病变 病例报道 抗逆转录病毒治疗 单纯疱疹病毒 肥大性 CD4^+细胞计数 单纯疱疹病毒
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人用重组溶瘤单纯疱疹病毒Ⅱ型(OH2)生物学特性的稳定性 被引量:1
11
作者 李延飞 毛泽勇 +5 位作者 石晓太 邹建文 董玉婷 孙美玲 刘滨磊 方志正 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2016年第5期494-496,502,共4页
目的分析人用重组溶瘤单纯疱疹病毒Ⅱ型(oncolytic herpes simplex virus type 2,OH2)生物学特性的稳定性。方法将OH2在Vero细胞中连续传20代,测定不同时间点收获的不同代次(P4、P10、P20)病毒的滴度,并绘制病毒的生长曲线;ELISA夹心法... 目的分析人用重组溶瘤单纯疱疹病毒Ⅱ型(oncolytic herpes simplex virus type 2,OH2)生物学特性的稳定性。方法将OH2在Vero细胞中连续传20代,测定不同时间点收获的不同代次(P4、P10、P20)病毒的滴度,并绘制病毒的生长曲线;ELISA夹心法检测表达的h GM-CSF的含量;TF-1细胞培养法检测表达的h GM-CSF的活性;CCK-8试剂盒检测OH2的体外癌细胞杀伤能力。结果 OH2在Vero细胞中连续传20代后,不同代次病毒(P4、P10、P20)的生长曲线模式、表达的h GM-CSF含量及活性、体外癌细胞的杀伤能力均无明显差异。结论 OH2生物学特性的稳定性良好,具有新生物药开发前景。 展开更多
关键词 人用重组单纯疱疹病毒 生物学特性 稳定性
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人乳头状瘤病毒及单纯疱疹病毒Ⅱ型感染与宫颈疾病的相关性研究 被引量:13
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作者 晋阳秋 魏鑫 彭丽娜 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第16期3904-3906,共3页
目的研究人乳头状瘤病毒(HPV)和单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)感染与宫颈疾病的相关性,为临床资料提供参考依据。方法选择医院2012年3月-2013年3月不同宫颈疾病患者181例,均留取宫颈活检组织进行HPV高危型和HSV-2检测,对HPV高危型和HSV-2感... 目的研究人乳头状瘤病毒(HPV)和单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)感染与宫颈疾病的相关性,为临床资料提供参考依据。方法选择医院2012年3月-2013年3月不同宫颈疾病患者181例,均留取宫颈活检组织进行HPV高危型和HSV-2检测,对HPV高危型和HSV-2感染的相关性进行研究,分为慢性宫颈炎组62例、宫颈上皮内瘤样变组66例、宫颈癌组53例,3组数据采用SPSS13.0统计处理。结果慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤样变、宫颈癌患者HPV阳性率分别为1.61%、53.03%、96.23%,呈上升趋势,3种宫颈疾病患者HSV-2感染率分别为0.00%、1.51%、11.32%,宫颈癌患者HSV-2感染率明显高于慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤样变患者,宫颈癌患者HPV阳性率与慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤样变患者比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 HPV高危型感染是宫颈癌发生的主要因素,合并HSV-2感染可能在致癌过程中具有协同作用,会导致癌变的危险性增加,因此,对性传播疾病患者进行宫颈癌筛查,对于宫颈癌的早期诊断与治疗具有一定的作用。 展开更多
关键词 人乳头状病毒 单纯疱疹病毒 感染 宫颈疾病 相关性 研究
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人乳头状瘤病毒16/18、单纯疱疹病毒Ⅱ型和巨细胞病毒感染与宫颈癌发生、发展的关系 被引量:12
13
作者 钱元淑 吕雯 +1 位作者 隋丽华 王晶 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期622-625,共4页
目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)16/18、单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSVⅡ)和巨细胞病毒(CMV)感染与宫颈癌发生、发展的关系。方法对43例宫颈癌、47例宫颈上皮瘤样病变(CIN)、56例宫颈炎和10例正常宫颈进行聚合酶链反应检测HPV16/18、HSVⅡ和CMV感... 目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)16/18、单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSVⅡ)和巨细胞病毒(CMV)感染与宫颈癌发生、发展的关系。方法对43例宫颈癌、47例宫颈上皮瘤样病变(CIN)、56例宫颈炎和10例正常宫颈进行聚合酶链反应检测HPV16/18、HSVⅡ和CMV感染情况。结果HSVⅡ、HPV16/18和CMV的阳性率在宫颈癌和CIN组、CINⅢ级和CINⅠ~Ⅱ级组均有递减趋势,且差异有统计学意义。Ⅱ期宫颈癌组HPV16/18阳性显著高于Ⅰ期宫颈癌组,高分化宫颈癌组HPV16/18和HSVⅡ阳性高于中分化组,与临床分期及组织类型差异均无统计学意义;CMV阳性与临床分期、组织分级及组织类型差异均无统计学意义。三种病毒感染拷贝数,HSVⅡ和HPV16/18:宫颈癌>CIN>宫颈炎;CMV:宫颈癌>CIN。宫颈癌中出现几种病毒混合感染,其中HPV16/18合并HSVⅡ明显多于HPV16/18合并CMV者。结论HPV16/18、HSVⅡ和CMV感染与宫颈癌的发生发展关系密切,且与病毒负荷量有关,可能是宫颈癌的致病因子。 展开更多
关键词 人乳头状病毒16/18 单纯疱疹病毒 巨细胞病毒 病毒感染 宫颈癌 病毒负荷量
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人乳头瘤病毒、沙眼衣原体和单纯疱疹病毒Ⅱ型感染与宫颈疾病的相关性研究 被引量:8
14
作者 李玲 罗慧琴 苗晋华 《国际病毒学杂志》 2012年第6期257-260,共4页
目的探讨人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)、沙眼衣原体(chlamydia trachomarls,CT)和单纯疱疹病毒Ⅱ型(herpes simplex virus Ⅱ,HSV-Ⅱ)感染与宫颈疾病的关系。方法采用核酸分子快速杂交基因分型技术对598例宫颈脱落... 目的探讨人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)、沙眼衣原体(chlamydia trachomarls,CT)和单纯疱疹病毒Ⅱ型(herpes simplex virus Ⅱ,HSV-Ⅱ)感染与宫颈疾病的关系。方法采用核酸分子快速杂交基因分型技术对598例宫颈脱落细胞进行HPV感染基因型分型测定,同时应用实时荧光定量PCR法(FQ—PCR)检测CT和HSV—II两种病原体的感染情况。结果HPV、CT和HSV-II的阳性检出率分别为24.9%、9.2%和8.9%,且随着宫颈病变程度加重而逐渐增高,宫颈炎组和宫颈癌病变组三种病原体的感染率差异均有统计学意义。HPV感染以高危型为主(占77.9%),低危型为22.1%。HPV高危型和阴性组比较两种病毒的感染率有统计学差异(CT:x^2=26.97,P〈0.05;HSV—Ⅱ:x^2=65.93,P〈0.05)。各宫颈病变组均有多病毒混合感染情况出现,其中宫颈癌组混合感染率为22.2%。结论HPV、CT和HSV—Ⅱ感染与宫颈癌的发生密切相关,多病原体混合感染会促进宫颈癌的发生。 展开更多
关键词 人乳头病毒 沙眼衣原体 单纯疱疹病毒 宫颈癌
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重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子溶瘤2型单纯疱疹病毒注射液(Vero细胞)的药效学分析 被引量:4
15
作者 金静 汪洋 +4 位作者 胡翰 毛泽勇 石晓太 方志正 刘滨磊 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第5期502-506,共5页
目的分析重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)溶瘤2型单纯疱疹病毒(oncolytic herpes simplex virus type 2,OH2)的体内、外药效。方法按不同感染复数(MOI)=0.002、0.01、0.05... 目的分析重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)溶瘤2型单纯疱疹病毒(oncolytic herpes simplex virus type 2,OH2)的体内、外药效。方法按不同感染复数(MOI)=0.002、0.01、0.05、0.25、1.25分别感染人结肠癌细胞(Lo Vo)和人喉癌细胞(Hep2),MTT法检测OH2在体外的溶瘤作用。经BALB/c-nu正常小鼠右侧肋腹皮下分别注射Lo Vo细胞和Hep2细胞,当肿瘤平均体积>100 mm^3时,试验组于肿瘤内分别注射高、中、低剂量的OH2(1×10~7、1×10~6、1×10~5 CCID_(50)/m L),同时设阳性对照组(5 mg/m L的5-FU)及阴性对照组(DMEM/F12培养基),于第0、3和6天进行注射。首次注射后第0、3、6、9、12、15、18天测量肿瘤长径(a)和宽径(b),计算肿瘤体积(tumor volume,TV)及相对肿瘤增殖率。结果 OH2在较小浓度下(MOI分别为0.168和0.063)即可较好地杀伤Lo Vo和Hep2细胞。与阴性对照组比较,两种肿瘤模型的OH2高、中、低剂量组及阳性对照组均有显著抑瘤效果(P<0.05);Lo Vo肿瘤模型中,OH2高剂量组的抑瘤效果明显优于中、低剂量组(P<0.05);Hep2肿瘤模型中,OH2高、中、低剂量组的抑瘤效果差异无统计学意义(P>0.05)。结论 OH2在体外和体内实验中均显示较好的溶瘤作用,具有新生物药开发前景,为临床前研究提供了实验依据。 展开更多
关键词 重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 2型单纯疱疹病毒 人结肠癌细胞 人喉癌细胞 药效学
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局部注射重组α-2b干扰素合用伐昔洛韦治疗男性复发性生殖器疱疹的疗效观察 被引量:1
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作者 李新生 陈西成 《中国麻风皮肤病杂志》 2005年第9期748-749,共2页
关键词 复发性生殖器疱疹 重组Α-2B干扰素 疗效观察 伐昔洛韦 干扰素合 局部注射 男性 治疗 单纯疱疹病毒
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TOPO定向克隆和表达Ⅱ型单纯疱疹病毒gG基因的免疫优势表位片段 被引量:2
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作者 王书崎 尹跃平 +4 位作者 余艳华 赖伟红 蒋明军 陈强 陈祥生 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期288-290,共3页
目的通过基因工程技术,克隆和表达Ⅱ型单纯疱疹病毒gG基因的免疫优势表位片段。方法以PCR法扩增HSV-2的gG基因的免疫优势表位片段;将PCR产物与TOPO定向表达载体连接;然后鉴定含有目的基因的重组表达载体;并转化BL21StarTM菌株诱导表达... 目的通过基因工程技术,克隆和表达Ⅱ型单纯疱疹病毒gG基因的免疫优势表位片段。方法以PCR法扩增HSV-2的gG基因的免疫优势表位片段;将PCR产物与TOPO定向表达载体连接;然后鉴定含有目的基因的重组表达载体;并转化BL21StarTM菌株诱导表达目的蛋白;以免疫印迹法检测表达的目的蛋白。结果PCR法扩增出616bp的DNA片段;通过PCR法及测序法证实重组质粒中含有616bp的DNA片段,其中99.5%序列与目的基因序列一致。SDS-PAGE结果显示重组蛋白在3h时的表达产量最高。免疫印迹法通过抗gG的单克隆抗体,证实重组蛋白在大肠杆菌中的表达。结论Ⅱ型单纯疱疹病毒的gG免疫优势表位基因片段的成功表达,为制备国产的HSV-2血清诊断试剂提供资料。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒 G基因 表位 定向克隆 TOPO HSV-2 免疫印迹法 DNA片段 基因工程技术 PCR法 重组表达载体 重组蛋白 PCR产物 单克隆抗体 目的基因 BL21 诱导表达 重组质粒 基因序列 表达产量 PAGE 大肠杆菌 基因片段 诊断试剂
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泛昔洛韦片联合重组人干扰素α-1b治疗生殖器疱疹效果观察 被引量:3
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作者 郭建平 《中国乡村医药》 2012年第12期17-18,共2页
目的探讨泛昔洛韦片联合重组人干扰素α-1b治疗生殖器疱疹(GH)临床疗效。方法 320例GH患者采用随机数字法分为两组:A组160例仅给予泛昔洛韦片治疗,B组160例给予泛昔洛韦片联合重组人干扰素α-1b治疗。采用实时荧光PCR法检测单纯疱疹病... 目的探讨泛昔洛韦片联合重组人干扰素α-1b治疗生殖器疱疹(GH)临床疗效。方法 320例GH患者采用随机数字法分为两组:A组160例仅给予泛昔洛韦片治疗,B组160例给予泛昔洛韦片联合重组人干扰素α-1b治疗。采用实时荧光PCR法检测单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)DNA,同时观察患者止疱时间、水疱消失时间、结痂时间、脱痂时间及不良反应,并随访1年观察其复发情况。结果治疗后B组止疱、水疱消失、结痂、脱痂时间均明显短于A组,且1年后随访复发次数亦明显少于A组,差异有统计学意义;B组总有效率明显高于A组,差异有统计学意义;A组不良反应发生率略高于B组,但差异无统计学意义。结论泛昔洛韦联合重组人干扰素α-1b治疗GH效果良好。 展开更多
关键词 重组人干扰素Α-1B 生殖器疱疹 泛昔洛韦 治疗 联合重组 不良反应发生率 单纯疱疹病毒 荧光PCR法
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宫颈癌患者外周血中HPV6.11、HPV16.18、HSVⅡ及HCMV DNA的检测 被引量:4
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作者 彭小萍 李孟达 +3 位作者 李俊东 李经略 叶永照 林妙卿 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期282-284,共3页
目的:测定宫颈癌患者外周血中人乳头状瘤病毒(HPV)、单纯疱疹病毒(HSVⅡ)和人巨细胞病毒(HCMV)DNA,探讨其对HPV感染的高危妇女发生宫颈癌的追踪及监测作用。方法:采用HPV6.11、HPV16.18、HSVⅡ及HCMVPCR试剂盒,用PEGeneAmpPCRSystem240... 目的:测定宫颈癌患者外周血中人乳头状瘤病毒(HPV)、单纯疱疹病毒(HSVⅡ)和人巨细胞病毒(HCMV)DNA,探讨其对HPV感染的高危妇女发生宫颈癌的追踪及监测作用。方法:采用HPV6.11、HPV16.18、HSVⅡ及HCMVPCR试剂盒,用PEGeneAmpPCRSystem2400扩增,测定104例宫颈癌患者外周血中的HPV6.11、HPV16.18和80例HSVⅡ及HCMV的DNA,并以32例子宫肌瘤患者为对照组。用χ2行差异性检测。结果:1)宫颈癌患者外周血中HPV6.11、HPV16.18、HSVⅡ和HCMV病毒DNA测定的阳性率分别为35.58%、20.19%、10.00%和3.75%。对照组分别为12.50%、9.37%、3.13%和0%。2)宫颈癌患者外周血中HPV6.11混合HSVⅡ或混合HCMVDNA阳性率分别为2.04%和1.92%;HPV16.18混合HSVⅡ或混合HCMVDNA阳性率分别为5.36%和3.30%。对照组无1例出现病毒DNA的混合阳性。结论:1)宫颈癌患者外周血中HPV、HSVⅡ和HCMV等病毒DNA阳性率高于对照组。2)宫颈癌患者外周血中的病毒DNA阳性率以HPV为主(P<0.05)。3)宫颈癌患者外周血中各种病毒DNA混合阳性率较低,其协同的致癌作用有待进一步研究。4)在HPV感染的高危人群中定期进行宫颈涂片和检测外周血中HPVDNA,可起到对病情的追踪及监测作用。 展开更多
关键词 宫颈癌 人乳头状病毒 单纯疱疹病毒 人巨细胞病毒 外周血 HSV HCMV DNA HPV6.11 HPV16.18
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AdCMV-TK和AdCMV-p53联合治疗胶质瘤的体外实验 被引量:4
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作者 王金环 房欣 +1 位作者 史国利 蔡宝立 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期169-172,共4页
目的 为了探讨联合应用单纯疱疹病毒 胸苷激酶和野生型p5 3两种基因治疗胶质瘤的可能性。方法 构建了含CMV启动子和单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (HSV TK)的重组腺病毒AdCMV TK和含CMV启动子及野生型p5 3的重组腺病毒AdCMV p5 3。以感... 目的 为了探讨联合应用单纯疱疹病毒 胸苷激酶和野生型p5 3两种基因治疗胶质瘤的可能性。方法 构建了含CMV启动子和单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (HSV TK)的重组腺病毒AdCMV TK和含CMV启动子及野生型p5 3的重组腺病毒AdCMV p5 3。以感染复数 (MOI)为 1 0 0的病毒剂量 ,用AdCMV TK和AdCMV p5 3同时感染人胶质母细胞瘤细胞系TJ90 5 ,并以 1 0 0MOI的AdCMV TK和AdCMV p5 3分别感染另外两组TJ90 5细胞。除感染AdCMV p5 3的细胞外 ,其他两组均于感染后加入 1 0 0 μmol/LGCV。 结果 感染AdCMV p5 3的TJ90 5细胞 ,其生长受到抑制 ,于感染后第 5d,细胞存活率下降为 3 6 9% ,感染AdCMV TK的细胞 ,其生长抑制程度与感染AdCMV p5 3的TJ90 5细胞相似 ,用药后第 5d ,细胞存活率为 3 0 1 % ,而同时感染两种重组腺病毒的细胞 ,细胞生长的抑制程度更明显 ,应用 1 0 0μmol/LGCV后第 5d,细胞存活率仅为 8 8%。结论 联合应用AdCMV TK和AdCMV p5 展开更多
关键词 体外实验 单纯疱疹病毒-胸苷激酶 野生型P53基因 重组病毒 pACCMV AdCMV-p53 胸胶质 脑肿 基因治疗
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