目的探索肺结核患者血清甲壳质酶蛋白40(chitinase protein 40,YKL-40)、β-防御素-2(human beta defensin 2,HBD-2)水平及其对肺结核的诊断价值。方法选取2021年6月—2023年6月山东省立医院收治的86例肺结核患者为肺结核组,根据痰涂片...目的探索肺结核患者血清甲壳质酶蛋白40(chitinase protein 40,YKL-40)、β-防御素-2(human beta defensin 2,HBD-2)水平及其对肺结核的诊断价值。方法选取2021年6月—2023年6月山东省立医院收治的86例肺结核患者为肺结核组,根据痰涂片结果分为活动性肺结核组(n=50)和非活动性肺结核组(n=36),另选取86例来自我院体检中心的健康受试者作为对照组。检测所有受试者血清中YKL-40、HBD-2水平并分析肺结核患者血清中YKL-40与HBD-2的相关性;采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清中YKL-40、HBD-2水平对肺结核及活动性肺结核的诊断价值。结果肺结核组血清YKL-40、HBD-2水平高于对照组(P均<0.05);活动性肺结核组血清YKL-40、HBD-2水平高于非活动性肺结核组(P均<0.05)。肺结核患者血清中YKL-40与HBD-2的水平呈正相关(r=0.601)。YKL-40、HBD-2及2者联合诊断肺结核的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.895、0.922、0.962,2者联合诊断优于单独诊断;YKL-40、HBD-2及2者联合诊断活动性肺结核的AUC分别为0.891、0.881、0.959,2者联合诊断优于单独诊断。结论肺结核患者血清YKL-40、HBD-2水平显著升高,且随病情加重而升高,2者对肺结核及活动性肺结核的具有一定的诊断价值。展开更多
为探索建立持续稳定表达 h BD- 2的哺乳类动物型工程细胞的可能性 ,作者研究构建真核重组表达载体 p CMV.tag2 B/h BD- 2以进行 COS- 7细胞转染表达实验。将本室克隆获得的 h BD- 2全长 c DNA片段插入带有报告基因的真核表达质粒 p CMV....为探索建立持续稳定表达 h BD- 2的哺乳类动物型工程细胞的可能性 ,作者研究构建真核重组表达载体 p CMV.tag2 B/h BD- 2以进行 COS- 7细胞转染表达实验。将本室克隆获得的 h BD- 2全长 c DNA片段插入带有报告基因的真核表达质粒 p CMV.tag2 B构建出 h BD- 2的重组表达载体 p CMV.tag2 B/h BD- 2 ,并经 DNA测序证明h BD- 2 c DNA片段的插入方向和其全长 c DNA的碱基组成顺序均准确无误。通过脂质体转染法将 p CMV.tag2 B/h BD- 2导入 COS- 7细胞。RT- PCR法和免疫印迹法分别从 m RNA水平和蛋白质水平检测到被转染的 COS- 7细胞系能有效表达 h BD- 2。展开更多
β-防御素体外试验显示具广谱抗菌活性 ,本研究应用转基因方法评估其体内抗菌作用。构建大鼠 β-防御素 - 2 (r BD2 )重组质粒 p BK- CMV- r BD2和 p CDNA- 3.1- Myc- His(+) - r BD2 ,通过脂质体包裹的方法将重组质粒经气管滴入 ,检测...β-防御素体外试验显示具广谱抗菌活性 ,本研究应用转基因方法评估其体内抗菌作用。构建大鼠 β-防御素 - 2 (r BD2 )重组质粒 p BK- CMV- r BD2和 p CDNA- 3.1- Myc- His(+) - r BD2 ,通过脂质体包裹的方法将重组质粒经气管滴入 ,检测其在气管和肺组织表达情况 ,并应用肺组织匀浆上清菌落计数法检察对绿脓杆菌的肺清除率。结果显示在基因转染大鼠的气管和肺组织内均检测到 r BD2 - His融合蛋白基因 m RNA和蛋白的表达 ,说明脂质体包裹的重组 β-防御素 - 2 p BK- CMV- r BD2质粒可有效转染气道上皮组织。肺细菌清除率实验显示构建重组质粒 p BK-CMV- r BD2气道转染与对照相比可显著提高肺组织对绿脓杆菌的清除率 (n(8,p(0 .0 1)。本研究表明 β-防御素基因气道转染可提高呼吸道天然抗感染防御功能 ,可能在呼吸道感染的防治实践中具有潜在应用价值。展开更多
文摘目的探索肺结核患者血清甲壳质酶蛋白40(chitinase protein 40,YKL-40)、β-防御素-2(human beta defensin 2,HBD-2)水平及其对肺结核的诊断价值。方法选取2021年6月—2023年6月山东省立医院收治的86例肺结核患者为肺结核组,根据痰涂片结果分为活动性肺结核组(n=50)和非活动性肺结核组(n=36),另选取86例来自我院体检中心的健康受试者作为对照组。检测所有受试者血清中YKL-40、HBD-2水平并分析肺结核患者血清中YKL-40与HBD-2的相关性;采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清中YKL-40、HBD-2水平对肺结核及活动性肺结核的诊断价值。结果肺结核组血清YKL-40、HBD-2水平高于对照组(P均<0.05);活动性肺结核组血清YKL-40、HBD-2水平高于非活动性肺结核组(P均<0.05)。肺结核患者血清中YKL-40与HBD-2的水平呈正相关(r=0.601)。YKL-40、HBD-2及2者联合诊断肺结核的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.895、0.922、0.962,2者联合诊断优于单独诊断;YKL-40、HBD-2及2者联合诊断活动性肺结核的AUC分别为0.891、0.881、0.959,2者联合诊断优于单独诊断。结论肺结核患者血清YKL-40、HBD-2水平显著升高,且随病情加重而升高,2者对肺结核及活动性肺结核的具有一定的诊断价值。
文摘为探索建立持续稳定表达 h BD- 2的哺乳类动物型工程细胞的可能性 ,作者研究构建真核重组表达载体 p CMV.tag2 B/h BD- 2以进行 COS- 7细胞转染表达实验。将本室克隆获得的 h BD- 2全长 c DNA片段插入带有报告基因的真核表达质粒 p CMV.tag2 B构建出 h BD- 2的重组表达载体 p CMV.tag2 B/h BD- 2 ,并经 DNA测序证明h BD- 2 c DNA片段的插入方向和其全长 c DNA的碱基组成顺序均准确无误。通过脂质体转染法将 p CMV.tag2 B/h BD- 2导入 COS- 7细胞。RT- PCR法和免疫印迹法分别从 m RNA水平和蛋白质水平检测到被转染的 COS- 7细胞系能有效表达 h BD- 2。
文摘β-防御素体外试验显示具广谱抗菌活性 ,本研究应用转基因方法评估其体内抗菌作用。构建大鼠 β-防御素 - 2 (r BD2 )重组质粒 p BK- CMV- r BD2和 p CDNA- 3.1- Myc- His(+) - r BD2 ,通过脂质体包裹的方法将重组质粒经气管滴入 ,检测其在气管和肺组织表达情况 ,并应用肺组织匀浆上清菌落计数法检察对绿脓杆菌的肺清除率。结果显示在基因转染大鼠的气管和肺组织内均检测到 r BD2 - His融合蛋白基因 m RNA和蛋白的表达 ,说明脂质体包裹的重组 β-防御素 - 2 p BK- CMV- r BD2质粒可有效转染气道上皮组织。肺细菌清除率实验显示构建重组质粒 p BK-CMV- r BD2气道转染与对照相比可显著提高肺组织对绿脓杆菌的清除率 (n(8,p(0 .0 1)。本研究表明 β-防御素基因气道转染可提高呼吸道天然抗感染防御功能 ,可能在呼吸道感染的防治实践中具有潜在应用价值。