重组人体干细胞因子的表达、复性、纯化及其对脐带血干细胞体外扩增作用研究

目的对重组人体干细胞因子(rhSCF)蛋白在脐带血干细胞体外扩增中的作用进行研究。方法通过大肠杆菌表达系统,经IPTG诱导表达获取SCF包涵体,经透析复性、纯化后获得蛋白。从脐带血中提取单核细胞(MNC),分选其中具有CD34+抗原表位的细胞,使用一定浓度的血小板生成素(TPO)、FLT-3配体(FL)及rhSCF组合对脐带血干细胞进行7 d体外扩增以研究rhSCF的作用。结果成功使用IPTG在大肠杆菌BL21诱导表达rhSCF,包涵体经复性及CM-Sepharose纯化获得高纯度的rhSCF。干细胞体外扩增实验表明rhSCF、FL及TPO联用,具有协同刺激CD34+细胞体外扩增的作用。结论成功建立rhSCF原核表达、复性和纯化体系,为造血干细胞体外扩增体系的优化研究奠定了基础,同时为干细胞因子的临床应用提供了有价值的参考。