重组人白细胞介素35早期干预对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的保护作用研究

目的探讨重组人白细胞介素35(interleukin 35,IL-35)早期干预对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的保护作用。方法采用随机数字表法将40只雄性SD大鼠分成正常组、致伤组、对照组和治疗组,每组各10只(其中每个观察点5只)。正常组大鼠不作处理,其余3组大鼠麻醉后经暴露的气管滴注10 mg/kg LPS建立大鼠ALI模型。造模后,治疗组大鼠尾静脉注射重组人IL-352μg,每天给药1次,连续给药3天;对照组大鼠尾静脉注射同等剂量无菌生理盐水,每天1次,连续3天;正常组和致伤组大鼠不进行药物干预。观察各组大鼠干预后第1、3天肺组织病理学变化及评分、动脉血氧分压(arterial partial pressure of oxygen,PaO_(2))和二氧化碳分压(partial pressure of carbon dioxide,PCO_(2))变化。采用酶联免疫吸附分析(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测大鼠肺组织匀浆上清液中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)和白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)含量。结果与正常组比较,致伤组、对照组和治疗组大鼠建模后第1天的肺组织病理评分均显著升高、PaO_(2)显著降低(P均<0.05);治疗组大鼠第3天肺组织病理评分显著低于致伤组和对照组、PaO_(2)显著高于致伤组和对照组,致伤组、对照组和治疗组大鼠第3天PCO_(2)较正常组显著升高(P均<0.05)。与正常组相比,致伤组、对照组和治疗组大鼠第1、3天TNF-α、IL-10含量明显升高(P均<0.05);治疗组大鼠第1、3天TNF-α含量明显低于对照组(P均<0.05),第1天IL-10含量明显低于致伤组和对照组,但第3天IL-10含量明显高于致伤组和对照组(P均<0.05)。结论重组人IL-35具有减轻LPS致大鼠肺损伤的作用,可降低肺损伤组织TNF-α水平,提高IL-10水平的作用。

重组人白细胞介素35(rhIL-35)通过抑制NF-κB通路减轻川崎病的冠状动脉内皮细胞损害

目的探究重组人白细胞介素35(rhIL-35)对川崎病(KD)冠脉损害的保护作用及其作用机制。方法采用体外培养的人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)建立KD血管模型,利用肿瘤坏死因子α(TNF-α)及KD患者血清刺激HCAEC以模拟KD的局部炎性病变。将细胞分为对照组、TNF-α及KD血清刺激组、(25、50)ng/mL rhIL-35处理组,CCK-8法检测细胞增殖活性,实时定量PCR检测HCAEC的IL-1β、IL-6、IL-17A、闭锁小带蛋白1(ZO-1)mRNA水平,ELISA检测KD患儿血浆IL-35水平及HCAEC上清液IL-1β、IL-6、IL-17A含量,Western blot法检测核因子κB p65(NF-κB p65)及ZO-1的表达。结果TNF-α及KD血清处理抑制HCAEC增殖,rhIL-35则明显逆转以上作用;rhIL-35预保护细胞后可明显下调IL-1β、IL-6及IL-17A的表达;与TNF-α及KD血清刺激组相比,rhIL-35预处理细胞后可明显增高ZO-1蛋白的表达,抑制NF-κB p65的高表达。结论rhIL-35能够通过抑制NF-κB通路减轻KD的冠状动脉内皮细胞损害。

血清白细胞介素-35表达水平与前列腺癌全雄激素阻断治疗预后的相关性分析

目的 探究血清白细胞介素-35(IL-35)表达水平与前列腺癌全雄激素阻断(MAB)患者预后的相关性。方法 收集2017年4月至2020年4月在本院接受MAB治疗的60例前列腺癌患者为研究对象。测定患者治疗前血清IL-35水平。依据随访结果,用受试者工作特征(ROC)曲线确定IL-35最佳截断值,并以此将纳入者分为低IL-35组和高IL-35组。比较2组病理特征,Kaplan-Meier生存曲线和Cox回归模型分析血清IL-35与患者预后的相关性。结果 以3年随访是否死亡为结局绘制ROC曲线,所得IL-35最佳截断值147.73 pg/ml[曲线下面积(95%CI)=0.667(0.517,0.818,P<0.001)],并以此为临界点将患者分为低IL-35组(<147.73 pg/ml)和高IL-35组(≥147.73 pg/ml)。高IL-35组中Gleason评分>7分(58%和29%)、肿瘤T分期中T4期(74%和44%)和伴淋巴结转移(68%和39%)者占比均显著高于低IL-35组(P<0.05)。KaplanMeier生存曲线显示,低IL-35组患者无进展生存(PFS)[(32±4)个月和(23±4)个月]和总生存[(32±3)个月和(24±4)个月]情况均优于高IL-35组患者(χ^(2)=11.988、8.617,P<0.05);单因素和多因素Cox回归模型分析显示,血清IL-35水平[HR值(95%CI)=1.044 (1.017,1.073)]、[HR值(95%CI)=1.035(1.006,1.064)];Gleason评分[HR值(95%CI)=2.218 (1.449,6.307)]、[HR值(95%CI)=3.056 (1.649,9.447)];临床T分期[HR值(95%CI)=2.056(1.553,5.984)]、[HR值(95%CI)=1.900(1.237,11.622)]和伴淋巴结转移[HR值(95%CI)=2.415(2.084,7.445)]、[HR值(95%CI)=4.147(1.081,15.910)]均是影响MAB治疗的前列腺癌患者无进展生存期(PFS)和总生存情况的独立危险因素(P<0.05)。结论 治疗前血清IL-35水平异常升高是影响前列腺癌患者MAB治疗预后的独立危险因素。

半乳糖凝集素-3、白细胞介素35、白细胞介素17在支气管哮喘病儿血清中的水平及与肺功能的相关性

目的探究半乳糖凝集素-3(Galectin-3)、白细胞介素35(IL-35)及白细胞介素17(IL-17)在支气管哮喘病儿血清中的水平及临床意义。方法选取2021年8月至2022年8月徐州医科大学附属医院诊治的哮喘病儿77例,分为轻中度哮喘急性发作组(40例)及哮喘缓解组(37例),选择同期徐州医科大学附属医院健康体检儿童26例为对照组。采用酶联免疫法测定血清Galectin-3、IL-35、IL-17水平。应用肺功能仪进行肺功能检查,记录第1秒用力呼气容积/1 s用力呼气量预计值百分比(FEV1%)、1 s用力呼气量占用力肺活量比值(FEV1/FVC)、最大呼气50%瞬间流量(FEF50%),最大呼气75%瞬间流量(FEF75%)指标。结果轻中度急性发作组Gal-3、IL-17水平分别为(50.89±7.90)ng/L、(60.95±8.14)ng/L,明显高于缓解组的(33.93±9.49)ng/L、(42.94±6.67)ng/L及对照组的(24.8±5.84)ng/L、(35.45±8.68)ng/L,差异有统计学意义(P<0.05)。轻中度急性发作组IL-35水平为(101.28±9.44)ng/L明显低于缓解组(125.91±7.79)ng/L及对照组(148.83±8.09)ng/L,差异有统计学意义(P<0.05)。轻中度急性发作组FEV1%、FEV1/FVC水平分别为(67.22±12.11)%、(67.56±12.60)%明显低于缓解组的(95.4±10.63)%、(95.58±10.95)%和对照组的(108.21±10.49)%、(108.9±10.03)%,均差异有统计学意义(P<0.05),FEF50%、FEF75%在轻中度急性发作组分别为(46.22±11.80)%、(38.42±9.94)%,与缓解组的(50.11±11.53)%、(42.76±12.39)%比较,差异无统计学意义(P>0.05),与对照组(91.75±12.43)%、(93.84±12.07)%比较差异有统计学意义(P<0.05)。Gal-3与IL-17呈正相关(P<0.05),IL-35与IL-17呈负相关(P<0.05),Gal-3、IL-17与FEV1%、FEV1/FVC、FEF50%、FEF75%呈负相关(P<0.05),IL-35与FEV1%、FEV1/FVC、FEF50%、FEF75%呈正相关(P<0.05)。结论哮喘病儿Gal-3表达上调,IL-35表达下调,引起IL-17促表达增强、表达抑制作用减弱,IL-17水平升高从而导致气道炎症加重,可能是轻中度哮喘急性发作的发病机制之一;亦可能是哮喘缓解期部分病儿小气道炎症持续存在的可能机制之一。Gal-3、IL-35、IL-17水平测定有助于预测轻中度哮喘急性发作风险及指导调整吸入糖皮质激素(ICS)用药。

辅助T细胞17、白细胞介素-17、白细胞介素-35与特应性皮炎的相关性分析

目的探讨辅助T细胞17(Th-17)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-35(IL-35)与特应性皮炎的相关性。方法选取2021年9月至2022年12月于江西省皮肤病专科医院收治的80例特应性皮炎患儿作为研究对象,将其纳为观察组,根据皮炎严重程度采用特应性皮炎评分指数将其划分为重度、中度、轻度3个亚组,另选取同时期80名健康体检儿童为对照组,检测两组Th-17、IL-17、IL-35水平,比较不同病情程度患儿Th-17、IL-17、IL-35水平的差异,进行单因素及多因素logistic分析,评估影响特应性皮炎病情的独立因素,展开Pearson相关性分析,评价三项指标与病情的相关性。结果观察组的Th-17、IL-17水平高于对照组,IL-35水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。单因素分析结果显示,轻度皮炎组、中度皮炎组、重度皮炎组的性别、年龄、住院时间比较,差异无统计学意义(P>0.05);但三组的Th-17、IL-17、IL-35水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic分析结果显示,Th-17、IL-17、IL-35水平均为特应性皮炎的独立影响因素(β=1.157、2.143、1.793,OR=3.180、8.525、6.007,95%CI=1.166~8.676、1.157~62.818、1.064~33.909,P<0.05),且特应性皮炎病情严重程度与Th-17、IL-17水平呈正相关,与IL-35水平呈负相关(r=0.404、0.402、-0.405,P<0.05)。结论Th-17、IL-17、IL-35水平均为儿童影响特应性皮炎病情程度的独立影响因素,且三项指标与特应性皮炎病情严重程度之间存在一定相关性,当临床出现Th-17、IL-17水平下降或IL-35水平升高时,需警惕患儿免疫功能水平降低及病情进展,及时采取针对性干预措施。

血清白细胞介素-35、乳酸脱氢酶在骨髓增生异常综合征120例中的临床意义

目的分析血清白细胞介素(IL)-35、乳酸脱氢酶(LDH)在骨髓增生异常综合征(MDS)中的临床意义,为探究MDS的潜在靶点提供参考依据。方法选取青岛市胶州中心医院2019年5月至2020年5月收治的128例MDS病人作为研究对象,所有病人均根据指南在医院接受个体化治疗,于治疗6个月疗程时评估病人治疗效果,分为治疗失败组(n=28)和治疗有效组(n=92)。于治疗前检测研究相关指标[白细胞(WBC)、血小板(PLT)、中性粒细胞绝对计数(ANC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、IL-35、LDH]并统计病人临床资料,分析血清IL-35、LDH与MDS病人治疗效果的关系,并检验IL-35、LDH联合预测MDS病人治疗失败的最佳阈值。结果128例MDS病人随访期间共剔除8例,120例MDS病人,治疗6个疗程时,治疗失败占23.33%(28/120),治疗有效组占76.67%(92/120);治疗失败组WHO分型预后积分系统(WPSS)评分、修订的国际预后积分系统(IRSS-R)均高于治疗有效组,较高危病人占比多于治疗有效组(P<0.05);治疗失败组全血ANC,血浆Hb、PLT低于治疗有效组,血清IL-35、LDH表达量高于治疗有效组(P<0.05)。经logistics回归分析显示,MDS病人治疗失败与全血ANC,血浆Hb、PLT低表达,血清IL-35、LDH高表达有关(P<0.05)。绘制ROC曲线图发现,血清IL-35、LDH单独及联合预测MDS病人治疗失败风险截断值分别为129.70 ng/L、324.28 U/L。限制性立方样条分析显示,血清IL-35、LDH与MDS病人治疗失败风险呈线性剂量反应关系。结论血清IL-35、LDH水平与MDS病人治疗失败风险呈线性剂量反应关系,检测血清IL-35、LDH有助于预测MDS病人治疗失败风险。

冠心病患者血清转化因子-β1、白细胞介素-35水平与冠状动脉病变程度的相关性研究

目的:观察冠心病患者血清转化因子-β1、白细胞介素-35水平与冠状动脉病变程度的相关性。方法:选取2018年7月—2021年12月潍坊市第二人民医院心内科收治的患者125例作为研究对象,根据冠状动脉造影结果分为冠心病组与对照组(无冠心病),并根据冠状动脉病变程度将冠心病组分为单支血管病变组、双支血管病变组、多支血管病变组。比较各组血清转化因子-β1和白细胞介素-35水平。结果:冠心病组血清转化因子-β1、白细胞介素-35水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。冠心病组各亚组血清转化因子-β1、白细胞介素-35水平比较,单支血管病变组>双支血管病变组>多支血管病变组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:血清转化因子-β1、白细胞介素-35参与冠心病发生发展,且与冠状动脉狭窄严重程度密切相关,可作为评价冠状动脉狭窄严重程度的参考指标。

鼻息肉组织黏蛋白5AC、免疫球蛋白E、白细胞介素-35表达对鼻黏膜上皮细胞凋亡的影响

目的研究黏蛋白(MUC)5AC、免疫球蛋白(Ig)E、白细胞介素(IL)-35基因在鼻息肉组织中水平差异及对鼻黏膜上皮细胞凋亡的影响。方法Western印迹检测MUC5AC、IgE、IL-35在鼻中隔矫正的下鼻甲组织与鼻窦炎鼻息肉组织中的水平差异;从鼻息肉组织中分离出鼻黏膜上皮细胞,构建MUC5AC、IgE、IL-35特异性siRNA转染细胞,以空脂质体转染的细胞作为对照组,通过Western印迹检验转染效果;各组转染细胞培养48 h后,流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,检测凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)3表达。结果IL-35在鼻息肉组织中的表达显著低于下鼻甲组织(P<0.05);鼻息肉组织中的MUC5AC、IgE表达显著高于下鼻甲组织(P<0.05);经过MUC5AC、IgE、IL-35特异性siRNA转染后,鼻黏膜细胞MUC5AC、IgE、IL-35表达均下降(P<0.05);IgE siRNA组、MUC5AC siRNA组细胞凋亡率显著低于si-NC组,IL-35 siRNA组显著高于si-NC组(P<0.05)。与对照组比较,IL-35 siRNA组caspase3表达明显升高,IgE siRNA组、MUC5AC siRNA组caspase3表达明显降低(P<0.05)。结论IL-35在鼻息肉组织中低表达,MUC5AC、IgE在鼻息肉组织中高表达,沉默MUC5AC、IgE的表达能抑制鼻黏膜细胞凋亡,沉默IL-35能促进鼻黏膜细胞凋亡。

白细胞介素-35对肝细胞癌患者CD4^(+)CD25^(+)CD127^(dim/-)调节性T细胞的调控作用

目的 观察肝细胞肝癌(HCC)患者外周血白细胞介素-35(IL-35)水平和CD4^(+)CD25^(+)CD127^(dim/-)调节性T细胞(Treg)比例,评估IL-35对Treg数量和功能的影响。方法 共有51例HCC患者和25例对照者,分离外周血单个核细胞(PBMC)和血浆,实时定量PCR法检测PBMC中IL-35亚基mRNA相对表达量,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外周血IL-35水平,流式细胞术检测PBMC中CD4^(+)CD25^(+)CD127^(dim/-)Treg比例。使用重组人IL-35(1 ng/ml)刺激HCC组PBMC 24 h,观察Treg比例和EBI3、IL-12p35 mRNA相对表达量的变化。分选17例HCC患者的Treg,经重组人IL-35刺激后与自体PBMC共培养48 h,通过检测细胞增殖和细胞因子表达评估IL-35对Treg功能的影响。组间比较采用t检验或配对t检验。结果 HCC组血浆IL-35水平显著高于对照组[(1024±218.0)pg/ml比(297.6±77.78)pg/ml,t=16.12,P<0.0001)],HCC组PBMC中EBI3和IL-12p35 mRNA相对表达量均显著高于NC组(P<0.0001)。HCC组CD4^(+)CD25^(+)CD127^(dim/-)Treg比例显著高于对照组[(6.35±1.46)%比(4.55±0.90)%,t=5.641,P<0.0001)],HCC组中CD4^(+)CD25^(+)CD127^(dim/-)Treg比例与血浆IL-35水平呈显著正相关(γ=0.400,P=0.0036)。HCC组PBMC经IL-35刺激后CD4^(+)CD25^(+)CD127^(dim/-)Treg比例较无IL-35刺激升高(P=0.041),EBI3和IL-12p35 mRNA相对表达量亦升高(P<0.001)。HCC患者纯化的CD4^(+)CD25^(+)CD127^(dim/-)Treg经IL-35刺激后,免疫检查点受体表达升高(P<0.05),抑制自体PBMC增殖的能力增强,共培养系统中细胞数量减少(P=0.023)。IFN-γ分泌水平在经IL-35刺激的Treg中显著降低(P=0.0002),而IL-10和IL-35分泌水平在经IL-35刺激的Treg中显著升高(P<0.05)。结论 HCC患者中IL-35水平升高,增强Treg免疫抑制活性。

KIH结构在人白介素-35体外重组表达中的应用

白细胞介素35(interleukin-35,IL-35)是非常重要的免疫抑制性细胞因子,被证实在多种疾病的免疫应答中发挥作用。本研究通过克隆人IL-35基因编码序列,构建单亚基表达载体pXC17.4-p35和pcDNA3.1(+)-EBI3,共转染CHO-K1细胞体外表达IL-35,经检测未发现p35亚基与EBI3亚基的结合。Knobs-into-Holes(KIH)可解决异源抗体重链错配的问题,因此,在原始序列的基础上融合KIH结构构建表达载体pXC17.4-p35-Fch和pcDNA3.1(+)-EBI3-Fck来表达KIH-IL-35重组融合蛋白质;同时交换2个亚基的表达载体来验证不同表达载体对KIH-IL-35表达量的影响。经过多种蛋白质检测方法的分析,显示KIH-IL-35结构的正确表达率明显提高。大量表达后对KIH-IL-35进行亲和纯化,采用ELISA法检测纯化后的KIH-IL-35与糖蛋白130(gp130)分子的结合活性,结果表明,KIH-IL-35与gp130的结合呈浓度依赖性。采用细胞活性检测方法检测KIH-IL-35与M1细胞的间接活性,结果表明,M1细胞的抑制率与KIH-IL-35的浓度呈剂量依赖性增长。此外,本研究成功建立了一种利用激活的人外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)对IL-35进行活性检测的方法,结果显示,激活的PBMCs与KIH-IL-35的浓度呈剂量依赖性增长。总之,本研究利用KIH-IL-35模型,提高了重组人IL-35的正确表达率,并验证其在体外的高活性,为IL-35的研究及类似异源二聚体细胞因子的重组表达提供新思路。

白细胞介素-35和叉头样转录因子3在大鼠根尖周炎中的表达

目的:观察大鼠实验性根尖周炎中白细胞介素-35(interleukin-35,IL-35)与叉头样转录因子3(foxhead box p3,Foxp3)的动态表达情况,探讨IL-35在根尖周炎中的作用。方法:选取40只SPF级SD大鼠,随机分为5组,单侧下颌第一磨牙开髓进行根尖周炎造模,分别于术后0、7、14、21、28 d各随机处死一组,下颌骨拍摄X线片,观察根尖周变化情况。取下颌第一磨牙根尖周组织进行苏木精-伊红染色(HE)观察其组织病理变化。实时荧光定量PCR反应(real-time qPCR,RT-qPCR)动态检测根尖周病损组织中IL-35和Foxp3 mRNA的表达情况。结果:X线和HE染色显示随着牙髓暴露时间的延长,根尖部炎症程度逐渐加重,待髓腔开放21~28 d时炎症则趋于稳定,从临床表现和组织病理学两方面证实了大鼠根尖周炎造模成功。RT-qPCR结果显示:IL-35和Foxp3 mRNA相对表达量在术后不同时期均呈波动性升高趋势(P<0.01),术后0~7 d迅速上升,7~21 d表达量呈下降趋势(P<0.05),21~28 d又呈上升趋势(P<0.05);Pearson相关分析显示:IL-35mRNA与Foxp3mRNA相对表达量呈正相关关系(r=0.609,P<0.05)。结论:IL-35在大鼠根尖周炎中的表达量与炎症程度成反比,可能通过调控Treg的表达参与根尖周炎的发生发展。

血清白细胞介素-35在脑梗死合并肺部感染患者中的动态变化及意义

目的 研究脑梗死及脑梗死合并肺部感染患者血清白细胞介素-35(interleukin IL-35)动态演变,为临床研究提供依据。方法 回顾性选取苏州市立医院神经内科2019年12月—2020年12月住院的脑梗死患者60例,其中30例合并肺部感染者为A组,另30例未合并肺部感染者为B组,再随机抽取同期健康人员30名为C组;A、B组患者分别于发病后24 h、48 h、7 d抽取静脉血清IL-35,C组健康人员于入组当天空腹抽取静脉血清IL-35;比较A+B、C组IL-35指标的差异及A、B组24 h、48 h、7 d的变化规律。结果 A、B组发病后24 h血清IL-35浓度低于C组,差异有统计学意义(P<0.05),随后呈动态上升的趋势,至发病后7 d接近正常水平;A、B组各时间点比较发现,A组血清IL-35浓度发病后24 h、发病后48 h及发病后7 d均比B组低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论脑梗死发生后,患者血清中IL-35的浓度在发病后24 h最低,随后逐渐上升,至发病后7 d升高到接近正常水平,且合并肺部感染者,血清IL-35浓度降低更明显。

超声引导下经皮微波消融联合重组人白细胞介素-2治疗原位肝癌的效果

目的:分析超声引导下经皮微波消融(PMAT)联合重组人白细胞介素-2(rhIL-2)治疗原位肝癌的效果。方法:选取2018年7月—2019年12月华中科技大学协和深圳医院收治的原位肝癌患者144例作为研究对象,根据随机数字表法分为研究组(n=68)和常规组(n=76)。常规组进行PMAT治疗,研究组进行PMAT联合rhIL-2治疗。比较两组消融效果、肿瘤标志物水平及免疫功能。结果:两组完全消融率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组癌胚抗原、甲胎蛋白水平均低于治疗前,且研究组癌胚抗原水平低于常规组,差异有统计学意义(P<0.05);两组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)高于治疗前,CD8^(+)水平低于治疗前,且研究组CD3^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平高于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PMAT联合rhIL-2治疗原位肝癌的效果显著,可降低肿瘤标志物水平,提高免疫功能。

重组人白细胞介素-11对恶性实体瘤患者化疗所致血小板减少症一级预防的有效性和安全性

目的探讨重组人白细胞介素-11(rhIL-11)对恶性实体瘤患者化疗所致血小板减少症(CIT)一级预防的有效性和安全性。方法采用随机数字表法将88例恶性实体瘤化疗患者分为观察组和对照组,每组44例,观察组患者应用rhIL-11一级预防CIT,对照组患者应用安慰剂。比较两组患者CIT发生率、血小板(PLT)变化情况、化疗相关不良事件发生情况、PLT输注情况、rhIL-11相关不良反应发生情况。结果一级预防后,两组患者CIT总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者Ⅲ~Ⅳ级CIT发生率为2.27%,低于对照组患者的18.18%,差异有统计学意义(P<0.05)。化疗第14、20天,观察组患者PLT水平均高于对照组(P<0.05)。至化疗第20天,观察组患者化疗相关不良事件总发生率为11.36%,低于对照组患者的29.55%,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者PLT输注率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。应用rhIL-11后,观察组5例患者出现了轻微的不良反应,对症治疗后症状消失,未停用rhIL-11。结论应用rhIL-11对恶性实体瘤CIT高出血风险和有危险因素的中出血风险人群进行一级预防,可减轻CIT严重程度,减少化疗相关不良事件,rhIL-11相关不良反应轻且易纠正,建议应用于临床。

基于HBV感染自然病程的慢性乙型肝炎患者外周血白细胞 介素-35表达水平及与病毒载量和转氨酶的相关性

目的探究白细胞介素-35(IL-35)在慢性HBV感染自然病程中的表达及与病毒载量和肝脏生化指标的相关性,评估其在HBV慢性感染管理中的作用,为动态监测慢性乙型肝炎(简称乙肝)病程并降低重症化提供证据。方法选取2015年1月至2020年11月上海长海医院感染科就诊的慢性HBV感染者83例,依据慢性HBV感染的自然病程分为免疫耐受期22例、免疫清除期29例及重型肝炎32例。选取健康对照20例。空腹采取患者静脉血,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血IL-35表达水平,同时检测HBV DNA及转氨酶水平。统计学方法采用两组间Mann-Whitney U检验、多组间Kruskal-Wallis H检验以及相关性分析。结果慢性HBV感染者与健康对照者的IL-35分别为51.75(9.9,96.5)pg/ml和7.33(3.35,8.76)pg/ml,差异有统计学意义(Z=-5.69,P<0.01)。慢性HBV感染后各自然病程中IL-35表达水平均高于健康对照组,其中在重型肝炎患者中表达最高,为121.46(68.98,213.44)pg/ml。IL-35指标变化与HBV DNA无明显相关性(r分别为0.385、0.392、-0.168,P均>0.05)。重型肝炎患者的IL-35与ALT呈正相关(ρ=0.543,P=0.045),慢性HBV感染后整体IL-35与ALT和AST均呈较好的正相关(ALT:r=0.684,P=0.001;AST:r=0.618,P=0.001)。血清IL-35每增加1个单位,进展至重型肝炎的可能性增加7.2%。血清IL-35水平的ROC曲线显示AUC为0.9491(95%CI:0.9078~0.9905,P<0.01),cut off值<50.95pg/ml。结论①HBV慢性感染病程中外周血高表达IL-35,IL-35水平同肝脏炎症程度呈正相关;②IL-35在临床评估乙肝患者病情方面有重要应用价值,可动态监测外周血IL-35水平辅助评估患者免疫状态,及早抗病毒治疗以降低重型肝炎的发生率。

重组人白细胞介素-35的真核表达及生物活性

目的构建重组人白细胞介素-35[rhIL-35-IgG1(Fc)]蛋白的真核表达载体并表达纯化该蛋白,研究IL-35与其受体糖蛋白130(gp130)的结合作用。方法构建IL-35真核表达载体pSTEP2-IL35-LFc,转染到HEK293T细胞中,采用亲和色谱分离纯化获得重组IL-35蛋白,SDS-PAGE及Western blot法鉴定蛋白表达,ELISA法检测IL-35-Fc与其受体链gp130的结合作用,并在M1小鼠白血病细胞上研究IL-35对gp130的生物学作用。结果获得高纯度的人IL-35-Fc重组蛋白,ELISA法检测结果发现IL-35-Fc与其受体链gp130具有结合作用,并且IL-35在M1小鼠白血病细胞上对gp130具有中和作用。结论成功制备了具有生物活性的人IL-35-IgG1(Fc)重组蛋白,发现IL-35能够与其受体链gp130的结合,在M1小鼠白血病细胞上对gp130也具有中和作用。

重组白细胞介素-35对支气管哮喘模型小鼠T淋巴细胞亚群及细胞因子的影响

目的探究重组白细胞介素-35(rIL-35)对支气管哮喘模型小鼠T淋巴细胞亚群和细胞因子的影响及其作用机制。方法 100只SPF级雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、rIL-35低剂量组、rIL-35中剂量组和rIL-35高剂量组,每组20只。哮喘组和rIL-35各剂量组小鼠采用卵白蛋白(OVA)复制支气管哮喘模型,对照组小鼠则以生理盐水代替OVA进行处理。rIL-35各剂量组小鼠在OVA激发结束后腹腔注射不同剂量rIL-35,连续3 d,对照组和哮喘组小鼠注射等剂量的生理盐水。比较各组小鼠的气道反应性、肺泡灌洗液(BALF)中总细胞、淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞的数量;采用流式细胞仪检测各组小鼠BALF中T淋巴细胞亚群的水平;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠BALF中IgE、白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-22(IL-22)、白细胞介素-10(IL-10)和转化生长因子-β(TGF-β)水平。结果对照组小鼠未见明显异常状态。哮喘组小鼠致敏后活动减少,雾化激发时出现不同程度的咳嗽、呼吸急促、烦躁不安等症状。rIL-35低、中和高剂量组小鼠雾化激发时上述反应症状减轻。不同组激发时肺阻力(RL)和肺顺应性(Cdyn)比较,差异有统计学意义(P <0.05),不同剂量乙酰甲胆碱激发时RL和Cdyn比较,差异有统计学意义(P <0.05)。乙酰甲胆碱与rIL-35存在交互作用,随着乙酰甲胆碱剂量增大,rIL-35剂量减小,激发时RL越大(F=202.320,P=0.000),Cdyn越小(F=5.623,P=0.000)。与对照组比较,哮喘组小鼠BALF中的细胞总数、淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞等炎症细胞的数量均增加(P <0.05),Th2、Th17、Th17/Treg、IgE、IL-4、IL-5、IL-17、IL-22水平升高(P <0.05),而Th1、Treg、Th1/Th2、IL-2、IFN-γ、IL-10和TGF-β水平降低(P <0.05)。与哮喘组小鼠比较,rIL-35低、中和高剂量组小鼠BALF中的细胞总数、淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞等炎症细胞的数量降低(P <0.05),均呈随rIL-35剂量增加而减少的趋势,Th2、Th17、Th17/Treg、IgE、IL-4、IL-5、IL-17、IL-22水平降低(P <0.05),均呈随rIL-35剂量增加而降低的趋势,而Th1、Treg、Th1/Th2、IL-2、IFN-γ、IL-10和TGF-β水平升高(P <0.05),且呈随rIL-35蛋白剂量增加而升高的趋势。结论 rIL-35可通过调控Th1/Th2和Th17/Treg细胞的失衡及炎症细胞因子的分泌,抑制支气管哮喘小鼠体内的炎症反应。

重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶联合蒙脱石散对婴幼儿尿布疹的疗效观察与研究

目的探究重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rbFGF)凝胶联合蒙脱石散对婴幼儿尿布疹的临床效果。方法选取2019年12月至2020年6月赣南医学院第一附属医院收治的72例婴幼儿尿布疹患儿作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组与实验组,每组36例。对照组给予rbFGF凝胶干预,实验组在对照组基础上联合蒙脱石散干预,比较两组干预效果、恢复情况、皮肤损伤程度、血清学指标及不良反应发生情况。结果实验组治疗总有效率为94.44%,高于对照组的72.22%,差异有统计学意义(P<0.05)。干预后,两组皮肤发红、皮肤破裂面积及皮肤侵蚀程度评分均低于干预前,且实验组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组不良反应发生率为5.56%,低于对照组的25.00%差异有统计学意义(P<0.05)。实验组尿布疹消退时间、住院时间均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。干预后,两组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)水平均低于干预前,干扰素-γ(IFN-γ)水平高于干预前,且实验组TNF-α、IL-4、IL-10水平低于对照组,IFN-γ水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论rbFGF凝胶联合蒙脱石散应用于婴幼儿尿布疹的疗效显著,可减轻皮肤损伤程度,改善机体炎症反应,缩短尿布疹消退时间,且不良反应少,值得临床推广应用。

幽门螺杆菌感染儿童消化性溃疡患者Th17/Treg与转化生长因子β和白细胞介素水平的临床意义

目的研究不同分型幽门螺杆菌(Hp)感染儿童消化性溃疡(PU)患者辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)、转化生长因子β(TGF-β)和白细胞介素(IL)水平。方法选取2021年2—9月本院收治的90例Hp感染儿童PU患儿作为研究对象,采用免疫印迹法检测血清Hp分型,采用酶联免疫吸附法检测Th17/Treg、TGF-β和IL-1β、IL-17、IL-35水平,比较不同分型患儿Th17/Treg、TGF-β和IL-1β、IL-17、IL-35水平。结果90例患儿中,HpⅠ型51例(56.67%),HpⅡ型14例(15.56%),Hp阴性25例(27.78%)。HpⅠ型患儿Th17/Treg水平低于HpⅡ型及Hp阴性患儿,TGF-β、IL-1β、IL-17、IL-35水平均高于HpⅡ型及Hp阴性患儿,差异有统计学意义(P<0.05);HpⅡ型患儿Th17/Treg水平低于Hp阴性患儿,TGF-β、IL-1β、IL-17、IL-35水平均高于Hp阴性患儿,差异有统计学意义(P<0.05)。结论不同分型Hp感染儿童PU患儿Th17/Treg、TGF-β和IL水平存在差异,利于鉴别Hp分型,为临床提供新思路。

IL-35下调CD36表达减少巨噬细胞内脂质积累缓解动脉粥样硬化的机制研究

目的分析冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)患者血清白细胞介素-35(IL-35)水平与血脂四项的相关性,探究IL-35抑制人髓系白血病单核细胞(THP-1)泡沫化机制。方法选取2022年6月—2023年6月在泰州人民医院就诊的疑似CHD患者154例,分为对照组和CHD组,空腹采血后用酶联免疫吸附试验检测两组血清IL-35水平,分析与血脂四项的相关性。采用油红染色和胆固醇检测试剂盒对比IL-35刺激THP-1细胞前后细胞内胆固醇含量变化;Western blotting检测CD36、SR-A、Lox-1、p38、p-p38蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链反应检测CD36、SR-A和Lox-1 mRNA的表达。结果CHD组血清IL-35水平低于对照组(P<0.05)。CHD患者血清IL-35水平与TC、LDL-C、TG呈负相关(r_(s)=-0.321、-0.218和-0.215,P=0.003、0.044和0.047),与HDL-C呈正相关(r_(s)=0.322,P=0.003)。对照组与实验组THP-1细胞2、4、6、8和10 h的荧光强度(FI)比较,结果:(1)不同时间点FI比较,差异有统计学意义(F=726.726,P=0.000);(2)实验组与对照组FI比较,差异有统计学意义(F=8.102,P=0.012),实验组FI较低;(3)两组FI变化趋势比较,差异有统计学意义(F=111.061,P=0.000)。oxLDL组和实验组CD36、SR-A、Lox-1蛋白和mRNA相对表达量均高于对照组和IL-35组(P<0.05),实验组CD36蛋白和mRNA相对表达量低于oxLDL组(P<0.05)。oxLDL组和实验组p-p38/p38蛋白相对表达量均高于对照组和IL-35组(P<0.05),实验组p-p38/p38蛋白相对表达量低于oxLDL组(P<0.05)。oxLDL组、实验组、P79350组CD36蛋白相对表达量均高于对照组(P<0.05),oxLDL组和P79350组CD36蛋白相对表达量均高于实验组(P<0.05)。结论CHD患者血清IL-35与血脂四项有相关性,IL-35可能通过抑制p38 MAPK信号通路介导巨噬细胞CD36表达下调,减少细胞内脂质。