重组人肝细胞生长因子α的纯化与活性测定

目的纯化重组人肝细胞生长因子α(rhHGFα)包涵体,复性并测定其活性。方法大肠杆菌中表达的rhHGF琢以包涵体形式存在,表达量约占菌体总蛋白的25%。离心分离包涵体,用8mol/L尿素溶解,梯度稀释复性。经SephadexG75凝胶过滤和POROSHQ阴离子交换纯化,噻唑蓝法(MTT)测定活性。结果rhHGF琢纯度达到90%以上,其刺激肝细胞生长的活性达到rhHGF标准品的80%。结论建立了纯化rhHGF琢的技术路线,rhHGF琢具有刺激原代培养大鼠肝细胞生长的作用。

重组人肝细胞生长因子α高效表达工程菌筛选及发酵工艺研究

将人肝细胞生长因子α重组质粒转化至不同E.coli菌株,在相同培养条件下比较其表达量,筛选高表达工程菌株;在15L的发酵罐内,采用分批补料培养的方法,研究表达菌株的发酵培养条件,检测改变发酵培养基成分、种子液接种量、诱导时间等参数对菌液密度以及蛋白表达的影响,同时检测质粒传代的稳定性。实验结果表明筛选出的高表达工程菌在优化的发酵培养条件下,菌体收获量可达52g/L,目的蛋白表达量约占菌体可溶性总蛋白的25%,且质粒和蛋白表达均具有良好的稳定性。高效表达工程菌和优化发酵工艺可以较好地提高菌体收率,为规模化生产奠定了基础。

重组人肝细胞生长因子α在大肠杆菌中的表达及活性检测

目的 建立人肝细胞生长因子α链 (rhHGFα)高效原核表达体系。方法 以pRC/CMV hHGF为模板 ,扩增hHGFαcDNA ,继以XhoI酶切为 386和 95 4bp 2个片段 ,亚克隆入pBSKS,DNA测序后 ,将上述两个片段与pBV2 2 0连接 ,构建重组质粒。转化E .coliJM10 9、DH5α和BL2 1(DE3) ,筛选高效表达菌株。分离包涵体 ,8mol/L尿素溶解 ,梯度复性后利用反相和凝胶过滤层析纯化重组蛋白 ,经MTT法检测活性。结果 所克隆的hHGFα基因序列正确 ,筛选出高效表达菌株BY ,经SDS-PAGE显示在相对分子质量 5 2 0 0 0处出现特异的目的蛋白表达带 ,表达量约占全菌蛋白的 2 5 %。表达产物以不溶性的包涵体 (IBs)形式存在 ,复性后具有刺激原代大鼠肝细胞生长的作用。结论 已成功表达了rhHGFα蛋白 ,为研究rhHGFα结构与功能及中试生产奠定了基础。

重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶联合蒙脱石散对婴幼儿尿布疹的疗效观察与研究

目的探究重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rbFGF)凝胶联合蒙脱石散对婴幼儿尿布疹的临床效果。方法选取2019年12月至2020年6月赣南医学院第一附属医院收治的72例婴幼儿尿布疹患儿作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组与实验组,每组36例。对照组给予rbFGF凝胶干预,实验组在对照组基础上联合蒙脱石散干预,比较两组干预效果、恢复情况、皮肤损伤程度、血清学指标及不良反应发生情况。结果实验组治疗总有效率为94.44%,高于对照组的72.22%,差异有统计学意义(P<0.05)。干预后,两组皮肤发红、皮肤破裂面积及皮肤侵蚀程度评分均低于干预前,且实验组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组不良反应发生率为5.56%,低于对照组的25.00%差异有统计学意义(P<0.05)。实验组尿布疹消退时间、住院时间均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。干预后,两组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)水平均低于干预前,干扰素-γ(IFN-γ)水平高于干预前,且实验组TNF-α、IL-4、IL-10水平低于对照组,IFN-γ水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论rbFGF凝胶联合蒙脱石散应用于婴幼儿尿布疹的疗效显著,可减轻皮肤损伤程度,改善机体炎症反应,缩短尿布疹消退时间,且不良反应少,值得临床推广应用。

罂粟碱注射液联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子治疗深度烧伤残余创面的临床研究

目的观察罂粟碱注射液联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rb-bFGF)治疗深度烧伤残余创面的临床疗效。方法回顾性选取2019年1月至2023年6月入中国人民解放军联勤保障部队第九一〇医院治疗的深度烧伤患者80例作为研究对象,参考用药不同分为联合用药组(n=40)与单独用药组(n=40)。联合用药组采用rb-bFGF与罂粟碱注射液联合治疗,于5 cm×5 cm无菌纱布上涂抹300 IU/cm^(2)rb-bFGF之后将其于创面上覆盖,每日换药1次,肌肉注射罂粟碱注射液每日30 mg,每日2次。单独用药组单用rb-bFGF,用法同联合用药组。两组均持续治疗14 d。比较两组患者的治疗前及治疗后14 d的血清炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-10、IL-6、IL-4、IL-1β]水平,治疗后3、7、10、14 d的创面分泌物评分和创缘反应评分,创面愈合时间,总有效率及不良反应发生率。结果联合用药组患者治疗后14 d的血清TNF-α、IL-6、L-1β水平分别为(65.27±8.77)、(105.21±9.14)、(20.21±1.18)μg/L,均明显低于单独用药组[(89.26±9.32)、(128.32±8.21)、(29.36±1.28)μg/L],IL-10、IL-4水平分别为(537.75±22.92)、(162.42±17.79)μg/L,均明显高于单独用药组[(497.41±22.63)、(137.27±17.41)μg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。联合用药组患者治疗后3、7、10、14 d创面分泌物评分分别为(1.64±0.25)、(0.97±0.24)、(0.78±0.20)、(0.38±0.11)分,均低于单独用药组[(1.82±0.29)、(1.28±0.26)、(1.04±0.24)、(0.65±0.14)分],差异均有统计学意义(P<0.05)。联合用药组患者治疗后3、7、10、14 d创缘反应评分分别为(0.82±0.13)、(0.39±0.09)、(0.20±0.04)、(0.04±0.02)分,均低于单独用药组[(1.19±0.21)、(0.68±0.11)、(0.49±0.10)、(0.21±0.04)分],差异均有统计学意义(P<0.05)。联合用药组患者治疗后创面愈合时间为(22.84±3.02)d,明显短于单独用药组[(27.94±3.14)d],差异有统计学意义(P<0.05)。联合用药组患者的治疗后总有效率为97.50%,明显高于单独用药组(80.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。两组均未发生皮肤刺痛及红痒等不良反应。结论深度烧伤残余创面治疗中,与单用rb-bFGF治疗相比,罂粟碱注射液联合rb-bFGF的临床疗效明显提高,可进一步减轻炎症反应,加速创面愈合,且无明显不良反应。

重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶联合调Q激光治疗面部脂溢性角化病

目的:探讨重组牛碱性成纤维细胞生长因子(Recombinant bovine basic fibroblast grow,rb-bFGF)凝胶联合调Q激光治疗面部脂溢性角化病(Seborrheic keratosis,SK)的效果。方法:选笔者医院2020年6月-2023年6月收治的82例面部SK患者为研究对象。按随机数字表法分为对照组(n=41)与观察组(n=41),两组均进行调Q激光治疗(波长532 nm),观察组在对照组基础上给予rb-bFGF凝胶治疗。观察对比两组疗效、疼痛程度、痂皮完全脱落时间、遗留红斑持续时间、皮肤病生活质量量表(Dermatology life quality index,DLQI)及不良反应发生情况。结果:观察组有效率较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05);观察组疼痛视觉模拟评分法(Visual analogue scale,VAS)评分较对照组低,创面痂皮完全脱落时间、遗留红斑持续时间均较对照组短,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组DLQI除治疗维度外其他维度评分均较治疗前降低(P<0.05),且观察组均低于对照组(P<0.05);观察组不良反应发生率为0.93%,对照组为6.03%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:rb-bFGF凝胶联合调Q激光治疗面部SK疗效显著,可促进创面恢复,减轻恢复期疼痛,提高患者生活质量。

血清可溶性CD40L与肝细胞生长因子联合检测在急性肺栓塞患者诊断中的应用价值

目的探讨血清可溶性CD40L(sCD40L)、肝细胞生长因子(HGF)联合检测在急性肺栓塞患者诊断中的应用价值。方法选取2021年1月至2022年12月延安市人民医院收治的96例急性肺栓塞患者为肺栓塞组,根据《肺血栓栓塞症的诊断与治疗指南(草案)》相关标准分为大面积肺栓塞组(50例)及非大面积肺栓塞组(46例)。另选取同期于延安市人民医院就诊的90例非急性肺栓塞患者为对照组;收集两组临床资料及空腹血液,采用酶联免疫吸附法检测两组血清中sCD40L、HGF水平;采用Pearson法分析血清sCD40L与HGF水平的相关性;采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清sCD40L、HGF水平对急性肺栓塞的诊断价值。结果肺栓塞组血清sCD40L、HGF水平明显高于对照组(P<0.05);大面积肺栓塞组血清sCD40L、HGF水平明显高于非大面积肺栓塞组(P<0.05)。肺栓塞组患者血清sCD40L与HGF水平呈正相关(r=0.613,P<0.05)。ROC曲线显示,血清sCD40L、HGF诊断急性肺栓塞的曲线下面积(AUC)分别为0.820、0.848,特异度分别为82.2%、82.2%,敏感度分别为72.9%、72.9%,最佳截断值分别为113.48、492.81 ng/L;sCD40L和HGF联合诊断急性肺栓塞的AUC为0.875,特异度为91.1%,敏感度为74.1%。结论急性肺栓塞患者血清sCD40L、HGF水平升高,且二者呈正相关,sCD40L与HGF联合检测可有效提高急性肺栓塞患者的诊断效能。

复方桐叶烧伤油联合重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶治疗喉癌术后咽漏的疗效研究

目的研究喉癌术后咽漏患者应用复方桐叶烧伤油联合重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶(rh-bFGF)治疗的疗效。方法选取2018年1月至2022年12月本院收治的行喉癌切除术后咽漏患者60例,采用随机数字表法分为治疗组和对照组,每组30例。治疗组使用复方桐叶烧伤油联合rh-bFGF纱条进行局部换药,对照组仅使用rh-bFGF纱条进行局部换药。评估咽漏疗效、治愈时间和费用。结果治疗组患者显效率[46.67%(14/30)]、总有效率[96.67%(29/30)]与对照组[30.00%(9/30)和86.67%(26/30)]比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗组患者治疗后血清白细胞介素6水平[(16.56±4.26)pg/L]均低于治疗前[(53.96±6.28)pg/L]与对照组[(24.35±3.61)pg/L],术后住院费用[(57817.7±2203.7)元]明显少于对照组[(61915.5±1972.9)元],住院时间[(19.27±2.35)d]明显短于对照组[(24.77±2.16)d],差异均有统计学意义(P<0.05)。结论复方桐叶烧伤油联合rh-bFGF治疗喉癌术后咽漏效果与常规使用rh-bFGF相当,可促进愈合,减轻炎症反应,且与常规使用rh-bFGF比较,可缩短住院时间和费用,具有较好的临床获益,值得推广应用。

重组牛碱性成纤维细胞生长因子联合牙周基础治疗牙龈炎对减少患者龈沟出血与复发的效果

目的观察重组牛碱性成纤维细胞生长因子联合牙周基础治疗牙龈炎对减少患者龈沟出血与复发的效果。方法选取2021年1月—2022年1月于松滋市人民医院诊治的牙龈炎患者98例,采用随机数字表法分为观察组和对照组,每组49例。对照组给予常规牙周基础治疗,观察组在对照组治疗基础上给予重组牛碱性成纤维细胞生长因子治疗,2组均治疗2周。比较2组治疗效果,治疗前后牙周指标[牙周探诊深度(PD)、牙龈指数(GI)与菌斑指数(PLI)]、龈沟出血指数(SBI)、龈沟液炎性指标[C反应蛋白(CRP)、前列腺素E 2(FGE 2)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)],牙龈炎复发率。结果治疗后4周,观察组总有效率为93.88%,高于对照组的75.51%(χ^(2)=6.376,P=0.012)。2组PD、GI及PLI低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.01)。治疗后7 d、14 d,2组SBI低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.01)。治疗后4周,2组龈沟液CRP、FGE 2、IL-6及IL-1β水平低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.01)。随访3个月,观察组牙龈炎复发率为2.04%(1/49),低于对照组的22.45%(11/49)(χ^(2)=9.496,P=0.002)。结论重组牛碱性成纤维细胞生长因子联合牙周基础治疗对牙龈炎患者龈沟出血具有显著改善效果,并能改善患者牙周健康,减轻牙龈炎症,减少牙龈炎复发。

多功能激光光电平台联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶治疗轻中度面部敏感性皮肤疗效观察

目的观察多功能激光光电平台联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶治疗轻中度面部敏感性皮肤的临床疗效及安全性。方法选取2021年1月至2022年2月安徽医科大学第二附属医院门诊就诊的30例轻中度面部敏感性皮肤的病人,按随机数字表法分为对照组15例、治疗组15例。对照组单独外用重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶(贝复新),1天2次;治疗组在对照组基础上联合应用多功能激光光电平台(舒敏专家)的电磁波模块及U光模块(830 nm/590 nm),1周1次。疗程均为4周,同时在疗程结束后1个月进行随访。对治疗前后病人的皮肤敏感症状评分及生活质量评分进行比较。结果治疗4周后,治疗组总有效率为93.33%(14/15),对照组为53.33%(8/15),治疗组明显优于对照组(P<0.05)。治疗组治疗前敏感症状积分和生活质量评分分别为(21.33±3.15)分及(12.13±2.17)分,治疗4周后分别为(3.67±2.58)分及(3.53±1.19)分。对照组治疗前敏感症状积分和生活质量评分分别为(20.6±2.47)分及(12.27±2.05)分,治疗4周后分别为(7.47±2.13)分及(5.80±1.15)分。治疗组和对照组的皮肤敏感症状积分和生活质量评分均较前降低(P<0.05),治疗组总体改善程度优于对照组(P<0.05)。随访1个月,对照组的复发率[53.3%(8/15)]高于治疗组[13.3%(2/15)](P<0.05)。结论多功能激光光电平台联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶治疗轻中度面部敏感性皮肤能有效改善皮肤敏感症状和病人的生活质量,同时有效预防复发,且安全无不良反应。

大隐静脉高位结扎联合泡沫硬化剂注射术+外用重组人酸性成纤维细胞生长因子治疗重度静脉曲张合并溃疡患者的临床疗效

目的探讨大隐静脉高位结扎联合泡沫硬化剂注射术+外用重组人酸性成纤维细胞生长因子治疗重度静脉曲张合并溃疡患者的临床疗效。方法收集2018年1月至2023年6月解放军联勤保障部队第九〇〇医院收治的60例大隐静脉曲张患者的临床资料,按照治疗方式的不同将其分为对照组(n=30)与观察组(n=30),两组患者均采用大隐静脉高位结扎联合泡沫硬化剂注射术,对照组溃疡创面采用碘伏和生理盐水常规换药,观察组溃疡创面采用外用重组人酸性成纤维细胞生长因子治疗。比较两组患者手术时间、术中出血量、住院时间、住院费用、术后并发症的发生情况、治疗前后溃疡面积、溃疡愈合时间、疼痛数字评价量表(NRS)评分以及患者对诊疗过程的满意度。结果观察组患者住院时间短于对照组患者,差异有统计学意义(P﹤0.05)。术后第7天,两组患者溃疡面积均小于本组术前,且观察组患者溃疡面积小于对照组患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。观察组患者溃疡愈合时间短于对照组患者,差异有统计学意义(P﹤0.05)。术后第14天,两组患者NRS评分均低于本组术前,且观察组患者NRS评分低于对照组患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。观察组患者满意度评分高于对照组患者,差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论大隐静脉高位结扎联合泡沫硬化剂注射术+外用重组人酸性成纤维细胞生长因子可显著促进下肢静脉性溃疡创面的愈合,明显缩短溃疡愈合时间、住院时间,缓解患者下肢疼痛程度,提高患者的诊疗满意度,值得在临床上进一步推广应用。

含重组人碱性成纤维细胞生长因子和重组人骨形态发生蛋白-2骨水泥在骨质疏松性腰椎压缩性骨折治疗的应用价值

目的:探讨含重组人碱性成纤维细胞生长因子(recombinant human basic fibroblast growth factor,rhbFGF)和重组人骨形态发生蛋白-2(recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)骨水泥在骨质疏松性腰椎压缩性骨折(osteoporotic vertebral compression fracture,OVCF)患者经皮椎体后凸成形术(percutaneous kyphoplasty,PKP)治疗的应用价值。方法:回顾性分析2018年1月至2021年1月收治的103例行PKP手术治疗的OVCF患者,男40例,女63例;年龄61~78(65.72±3.29)岁。受伤原因:滑倒33例,跌倒42例,提重物受伤28例。根据填充骨水泥不同分为3组:磷酸钙组34例,男14例,女20例,年龄(65.1±3.3)岁,填充磷酸钙骨水泥;rhBMP-2组34例,男12例,女22例,年龄(64.8±3.2)岁,填充含rhBMP-2的骨水泥;rhbFGF+rhBMP-2组35例,男14例,女21例,年龄(65.1±3.6)岁,填充含rhbFGF和rhBMP-2的骨水泥。比较3组Oswestry功能障碍指数(Oswestry dysfunction index,ODI)、骨密度、椎体前缘丢失高度、伤椎前缘压缩率、疼痛视觉模拟评分(visual simulation score,VAS)及再骨折发生率。结果:所有患者获得12个月随访。3组术后ODI、VAS呈下降(P<0.001),骨密度增高(P<0.001),椎体前缘丢失高度、伤椎前缘压缩率呈先下降后缓慢上升趋势(P<0.001),rhbFGF+rhBMP-2组术后第1、6、12个月ODI、VAS均低于rhBMP-2组和磷酸钙组(P<0.05),术后第6、12个月骨密度大于rhBMP-2组和磷酸钙组(P<0.05)。rhbFGF+rhBMP-2组术后第6、12个月椎体前缘丢失高度、伤椎前缘压缩率均低于rhBMP-2组和磷酸钙组(P<0.05)。3组再骨折发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:含rhbFGF和rhBMP-2骨水泥可更有效地增加OVCF患者骨密度,获得术后满意的临床和放射学效果,显著改善临床症状。

探究重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶对白内障超声乳化术术后干眼症患者泪膜稳定性、视觉功能的影响

目的研究重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rb-bFGF)眼用凝胶对白内障超声乳化术(CUP)术后干眼症患者的泪膜稳定性和视觉功能的影响。方法前瞻性选取2020年4月至2023年10月惠州市中心人民医院收治的CUP术后并发干眼症患者90例作为研究对象。按照随机数字表法将其分为观察组和对照组,每组各45例。对照组采用妥布霉素地塞米松滴眼液治疗,观察组在其基础上联合rb-bFGF眼用凝胶治疗。比较两组治疗疗效。观察两组患者治疗前、治疗4周后的泪膜稳定性[泪膜破裂时间(BUT)、基础泪液分泌试验(SIT)、角膜荧光素染色(FL)评分],治疗前、治疗2周、治疗4周后的视觉功能情况,并观察两组患者治疗前、治疗4周后的炎症指标[白细胞介素(IL)-1β、IL-8]、应激指标[脂质过氧化物(LPO)、丙二醇]变化,并比较两组的安全性。结果治疗后,观察组治疗总有效率为95.56%,高于对照组(82.22%),差异有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗4周后的BUT、SIT分别为(8.64±0.92)s、(10.26±0.47)mm/5 min,均高于对照组[(7.83±0.44)s、(8.63±1.87)mm/5 min],FT评分为(0.84±0.17)分,低于对照组[(1.31±0.25)分],差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗2、4周后的视力分别为0.64±0.11、0.81±0.05,均高于对照组(0.54±0.09、0.75±0.11),差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗4周后的血清IL-1β、IL-8、丙二醇、LPO水平分别为(38.22±3.59)ng/L、(64.87±8.46)ng/L、(2.75±0.55)U/L、(1.43±0.15)μmol/L,均低于对照组[(77.15±9.25)ng/L、(96.06±10.34)ng/L、(3.29±0.12)U/L、(1.92±0.22)μmol/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组与对照组的不良反应总发生率比较(6.67%vs.4.44%),差异无统计学意义(P>0.05)。结论在CUP术后干眼症患者的临床治疗中,使用rb-bFGF眼用凝胶辅助治疗可显著提高其泪膜稳定性,促进视觉功能的恢复。

3-甲基腺嘌呤对转化生长因子-β诱导大鼠肝脏星形细胞株HSC-T6活化及自噬的影响观察

目的观察3-甲基腺嘌呤(3-MA)对转化生长因子-β(TGF-β)诱导的大鼠肝星形细胞株HSC-T6活化及自噬的影响。方法取对数生长期的HSC-T6细胞分为空白组、TGF-β+PBS组、TGF-β+3-MA组。TGF-β+3-MA组细胞加入浓度为2 ng/mL TGF-β培养72 h后加入3-MA(0.5 mg/mL)处理24 h,TGF-β+PBS组细胞加入浓度为2 ng/mL TGF-β培养72 h后加入等量PBS处理24 h,空白组加入等量PBS处理,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞活化标志物α-SMA、TGF-βmRNA和自噬标志物LC3、Beclin-1、Atg5 mRNA,采用Western blotting法检测各组细胞活化标志物α-SMA、TGF-β蛋白和自噬标志物LC3、Beclin-1、Atg5蛋白。结果TGF-β+PBS组、TGF-β+3-MA组细胞活化标志物α-SMA、TGF-βmRNA和蛋白均高于空白组,且TGF-β+3-MA组均低于TGF-β+PBS组(P均<0.05)。TGF-β+PBS组、TGF-β+3-MA组细胞自噬标志物LC3、Beclin-1、Atg5 mRNA和蛋白均高于空白组,且TGF-β+3-MA组均低于TGF-β+PBS组(P均<0.05)。结论3-MA可抑制TGF-β诱导的大鼠肝星形细胞株HSC-T6活化及自噬。

过表达肝细胞生长因子的内皮祖细胞移植促进坐骨神经挤压伤修复的研究

目的探讨过表达肝细胞生长因子(HGF)慢病毒转染的内皮祖细胞对大鼠坐骨神经损伤的修复作用。方法体外实验方面,提取大鼠骨髓的内皮祖细胞(EPC)并利用DiI-acLDL和FITC-UEA-1双染法进行鉴定。EPC转染慢病毒后采用qRT-PCR实验检测HGF基因表达水平。采用CCK-8实验、Transwell实验以及血管形成实验对转基因EPC的体外功能进行评估。体内实验方面,随机将25只SD大鼠平均分为5组,即对照组(Con组)、正常EPC组(N-EPC组)、空载病毒转染EPC组(LV-NC组)、过表达HGF病毒转染EPC组(LV-HGF组)和假手术组(Sham组)。各组大鼠暴露出右侧坐骨神经后,在坐骨神经分叉处上方10 mm处使用止血钳形成2 mm宽的坐骨神经挤压伤,假手术组在暴露神经后不做处理;分别将转染空载慢病毒EPC、转染过表达HGF慢病毒EPC或正常EPC与基质胶按1∶1体积比混合后注入伤处神经外膜下,而对照组不注入EPC。术后4周,运用Catwalk检测大鼠运动功能的恢复情况,电生理实验检测神经传导功能的恢复情况,透射电镜观察髓鞘厚度,甲苯胺蓝染色观察神经纤维密度,腓肠肌湿重称重检测肌肉萎缩程度,马松染色检测各组手术侧的腓肠肌肌纤维面积。结果体外实验结果显示,与正常EPC组相比,LV-HGF组EPC在CCK8实验中细胞增殖速度更快(P<0.05),Transwell实验中细胞迁移速率更高(P<0.01),在血管形成实验中形成更多血管状结构(P<0.01)。动物实验结果显示,LV-HGF组的坐骨神经功能指数值显著高于其他3组(Con组,P<0.01;N-EPC组,P<0.01;LV-NC组,P<0.01);复合肌肉动作电位波幅更高(Con组,P<0.01;N-EPC组,P<0.05;LV-NC组,P<0.05);再生坐骨神经的髓鞘较厚(Con组,P<0.01;N-EPC组,P<0.01;LV-NC组,P<0.01);有髓神经纤维密度更高(Con组,P<0.01;N-EPC组,P<0.05;LV-NC组,P<0.05);腓肠肌湿重比值更高(Con组,P<0.01;N-EPC组,P<0.01;LV-NC组,P<0.01);肌纤维平均面积较大(Con组,P<0.01;N-EPC组,P<0.05;LV-NC组,P<0.05);LV-HGF组以上实验结果与Sham组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论过表达HGF基因可以增强EPC的增殖、迁移及分化功能。在坐骨神经挤压伤后,HGF基因转染的EPC相较于正常EPC,能更明显地促进了受损周围神经结构和功能的恢复,其机制与促进受损周围神经的轴突再生及髓鞘形成有关。

玻璃酸钠联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子滴眼液治疗眼角结膜干燥症的临床疗效分析

目的探讨玻璃酸钠与重组牛碱性成纤维细胞生长因子滴眼液联合治疗眼角结膜干燥症的临床疗效。方法选取2020年7月至2022年1月建瓯市立医院收治的74例眼角结膜干燥症患者作为研究对象,采用随机抽样法分为观察组(玻璃酸钠联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子滴眼液治疗)与对照组(单纯玻璃酸钠滴眼液治疗),每组37例。比较两组治疗前后眼功能指标、临床疗效及不良反应发生情况。结果用药2周后,两组国际标准眼表疾病指数(OSDI)均低于用药前,泪膜破裂时间(BUT)均长于用药前,且观察组OSDI值低于对照组,BUT长于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);用药2周后,两组角膜荧光素染色评分(FL)、干眼症状评分(DESS)均低于用药前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组不良反应发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论玻璃酸钠联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子滴眼液治疗眼角结膜干燥症效果显著,能显著改善患者眼功能,延长泪膜破裂时间,且安全性较高,值得临床推广应用。

鼠神经生长因子联合低剂量重组人促红细胞生成素对早产儿脑损伤后神经发育的影响

目的:探讨鼠神经生长因子(mNGF)联合低剂量重组人促红细胞生成素(rh Epo)对早产儿脑损伤后神经发育的影响。方法:选取2021年3月~2022年3月期间某院收治的200例脑损伤早产儿作为研究对象,依据随机数字表法分为对照组和观察组,每组100例。两组患儿均给予营养支持、水电解质纠正、血糖、血压维持等常规治疗,对照组在常规治疗基础上给予注射用鼠神经生长因子,观察组在对照组治疗基础上静脉注射低剂量重组人促红素注射液(CHO细胞)。比较两组患儿脑损伤相关因子[神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S100钙结合蛋白β(S100β)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、8-异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)]、炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-18(IL-18)、Toll样受体4(TLR4)]水平、神经发育异常情况、智能等级及不良反应发生情况。结果:治疗后,两组患儿NSE、S100β、8-OHdG、8-iso-PGF2α水平均降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05);两组患儿TNF-α、IL-18、TLR4水平均降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05);观察组患儿神经发育异常项目≥3项及异常项目≥1项的发生率均低于对照组(P<0.05);两组患儿智能等级均呈升高趋势(P<0.05),且观察组升高趋势更明显(P<0.05);两组患儿不良反应总发生率比较无统计学差异(P>0.05)。结论:在常规治疗基础上联用m NGF、低剂量rhEpo可有效降低患儿脑损伤相关因子水平及神经发育异常率,提高智能等级,且未增加不良反应的发生风险。

翼状胬肉术中应用重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶对眼表的保护作用研究

目的:观察翼状胬肉术中应用重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rb-bFGF)眼用凝胶对眼表的保护作用.方法:选取2019年1月—2021年12月于青岛大学附属威海市立第二医院行翼状胬肉切除加自体角膜缘干细胞移植术的患者60例(60眼),根据治疗方案不同将其分为观察组和对照组各30例.观察组术中应用rb-bFGF保护非手术区眼表,对照组术中使用0.9%氯化钠注射液棉片保持非手术区眼表湿润.比较两组角膜刺激症状评分、角膜上皮完全愈合时间、泪膜破裂时间(BUT)和泪液分泌试验(SIt)结果.结果:术后1、3 d,观察组角膜刺激症状评分均低于对照组;术后1个月,观察组BUT长于对照组,SIt优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).术后,观察组角膜上皮完全愈合时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:翼状胬肉术中应用rb-bFGF眼用凝胶可以有效保护患者眼表组织,减轻患者角膜刺激症状,有利于眼表功能恢复和稳定泪膜.

芦荟凝胶重组牛碱性成纤维细胞生长因子联合应用在预防、减轻头颈癌放射性皮炎中的临床研究

探讨芦荟凝胶重组牛碱性成纤维细胞生长因子联合应用在预防、减轻头颈癌放射性皮炎中的临床价值。方法 选取2021 年 5 月 15 日至 2023 年3 月 15 日本院收入因头颈癌行病灶及颈部淋巴引流区适型调强放射治疗患者为研究对象,经纳入排除标准筛选后92例患者入选,按照随机数字表法将其平均分为A组、B组、C组,A组31例,B组31例,C组30例,A组放疗区域涂抹芦荟凝胶;B组放疗区域喷洒重组牛碱性成纤维细胞生长因子(贝复济);C组将芦荟凝胶与贝复济交替使用,直至放疗结束。观察并比较三组病人的放射性皮炎发生率、发生时间、发生程度及愈合时间。结果 三组性别、年龄、体重指数、KPS评分、肿瘤类型以及疾病分期等一般资料对比无统计学差异(P>0.05),有分组比较价值;A组放疗期间III度以上放射性皮炎发生率为38.70%(12/31),B组III度以上放射性皮炎发生率为35.48%(11/31),C组发生率为10.00%(3/30),以C组明显更低(P<0.05);在放疗第5d、10d时均未出现放射性皮炎,在放疗第20d、25d时放射性皮炎的发生率C组明显少于A、B组,且C组首次发生放射性皮炎的平均天数明显长于A、B组(P<0.05);在接受不超过 50Gy放疗剂量前C组放射性皮炎发生率明显少于A、B组(P<0.05),随着放疗剂量的增加,三组放射性皮炎发生率相比无统计学差异(P>0.05);放疗前三组疼痛评分相比差异无统计学意义(P>0.05),放疗1周、2周、4周及8周的疼痛评分明显低于对A、B组(P<0.05),C组放射性皮炎病情在1周内缓解的人数占比明显高于A、B组(P<0.05),且C组放射性皮炎持续时间明显短于A、B组(P<0.05)。 放疗后1d各组的外周血炎症因子指标无差异(P>0.05),放疗后1周,三组EGF、TNF-α、IL-6等指标均有所升高,但C组明显低于A、B两组(P<0.05)。结论 芦荟凝胶、重组牛碱性成纤维细胞生长因子联合应用可有效预防并减轻头颈癌放射性皮炎的发生情况,进而减轻病人的痛苦,保证放射治疗的连续性,提高肿瘤局部控制率,最终达到延长患者生存期的目的。

大麻二酚对转化生长因子β1诱导肝星状细胞活化和肝纤维化的作用

背景:大麻二酚具有抗炎、抗氧化等药理学作用,并且不具有精神活性,在肝脏疾病中的研究日渐增加,但其对肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号转导通路的作用尚未明确。目的:探讨大麻二酚对肝星状细胞中转化生长因子β1/Smad信号转导通路的影响,研究其抗肝纤维化的可能机制。方法:(1)体外实验:选取大鼠肝星状细胞株(HSC-T6),分6组培养:对照组常规培养24 h,单纯药物组加入大麻二酚培养24 h,造模组加入转化生长因子β1培养24 h,造模+低剂量药物组、造模+高剂量药物组、造模+阳性对照组均加入转化生长因子β1培养24 h后分别加入1,5μmol/L大麻二酚或水飞蓟素培养24 h。培养结束后,检测各组细胞α-平滑肌肌动蛋白与Ⅰ型胶原mRNA表达、白细胞介素1β与肿瘤坏死因子α水平及Ⅰ型胶原、转化生长因子β1/Smad信号转导通路蛋白表达。(2)动物体内实验:将C57BL/6J小鼠随机分为5组,每组8只:假手术组不造模,造模组、造模+低剂量药物组、造模+高剂量药物组、造模+阳性对照组通过胆管结扎法建立肝纤维化模型,造模3周后分别腹腔注射4,8 mg/kg大麻二酚或水飞蓟素,1次/d,连续给药7 d。给药结束后,检测各组小鼠肝功能、肝脏病理形态及α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、转化生长因子β1/Smad信号转导通路相关蛋白表达。结果与结论:(1)体外实验:与对照组比较,造模组HSC-T6细胞α-平滑肌肌动蛋白与Ⅰ型胶原mRNA表达、白细胞介素1β与肿瘤坏死因子α水平以及Ⅰ型胶原、转化生长因子β1、p-Smad2/3蛋白表达均升高(P<0.05),Smad7蛋白表达降低(P<0.05);两种剂量大麻二酚处理可改善转化生长因子β1诱导的HSC-T6细胞上述指标的变化,并且以造模+高剂量药物组改善作用更明显;(2)体内实验:与假手术组比较,模型组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活性升高(P<0.05),肝组织中炎性细胞浸润及胶原含量增加(P<0.05),转化生长因子β1/Smad信号转导通路被激活,α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白表达升高(P<0.05);两种剂量大麻二酚干预可减轻造模小鼠上述指标的变化,并且以造模+高剂量药物组效果更明显;(3)结果表明,大麻二酚通过抑制肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号传导通路的激活抑制肝纤维化。