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重组人EGF-IL-18融合蛋白直接竞争ELISA方法的建立
1
作者
洪德芳
艾冬冬
+5 位作者
丁麟超
吕建新
钟连进
厉保秋
高丽昌
金丽琴
《温州医学院学报》
CAS
2014年第7期485-488,共4页
目的:建立检测给药食蟹猴血清中重组人表皮生长因子-白介素-18 (rhEGF-IL-18)融合蛋白含量的直接竞争ELISA方法,为该融合蛋白的动力学研究提供方法学.方法:用棋盘法确定包被抗体和酶标抗原工作浓度,建立直接竞争ELISA方法,并对其进...
目的:建立检测给药食蟹猴血清中重组人表皮生长因子-白介素-18 (rhEGF-IL-18)融合蛋白含量的直接竞争ELISA方法,为该融合蛋白的动力学研究提供方法学.方法:用棋盘法确定包被抗体和酶标抗原工作浓度,建立直接竞争ELISA方法,并对其进行方法学评价.结果:包被抗体和酶标抗原的最适工作浓度为4 μg/mL和1∶1 000.建立的标准曲线的曲线范围为100~ 900 ng/mL,R2为0.9898;日内精密度和日间精密度的最大变异系数分别为2.42%和2.20%;回收率95.3% ~103.0%;样品在室温放置1 h、冻融2次和冻存20 d三种条件下检测结果均较稳定,相对标准差均小于15%;定量下限为20.0 ng/mL.结论:本研究建立的ELISA方法稳定且可行.
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关键词
重组人表皮生长因子-白介素-18融合蛋白
方法学评价
下载PDF
职称材料
用于肿瘤靶向治疗的EGF-IL-18融合蛋白在昆虫细胞中的表达及活性鉴定
被引量:
2
2
作者
孟哲峰
彭颖
+1 位作者
沈波
吕建新
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第2期113-115,117,共4页
目的 :制备能用于肿瘤靶向治疗的重组表皮生长因子受体干扰序列 白细胞介素 18(EGF-IL-18)融合蛋白 ,并鉴定其生物学活性。方法 :利用Bac-to-Bac表达系统在昆虫细胞Sf9中表达融合蛋白 ,用离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤层析等方法纯...
目的 :制备能用于肿瘤靶向治疗的重组表皮生长因子受体干扰序列 白细胞介素 18(EGF-IL-18)融合蛋白 ,并鉴定其生物学活性。方法 :利用Bac-to-Bac表达系统在昆虫细胞Sf9中表达融合蛋白 ,用离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤层析等方法纯化表达产物 ,并以IFN-γ诱导实验和EGFR竞争结合实验初步评价融合蛋白的生物活性。结果 :经SDS-PAGE和Westernblot检测 ,Sf9细胞中表达的重组蛋白与预期的EGF-IL-18融合蛋白分子量一致 ,纯化后融合蛋白具有较高纯度和良好的免疫原性。IFN -γ诱导实验和EGFR竞争结合实验显示 ,该融合蛋白具有肿瘤导向性和抗肿瘤活性。结论 :成功表达并纯化了具有肿瘤导向性的抗肿瘤蛋白———EGF-IL-18融合蛋白 ,该蛋白具有较好的肿瘤导向性和抗肿瘤活性 。
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关键词
表皮
生长因子
-
白细胞
介素
18
融合
蛋白
昆虫细胞
肿瘤靶向治疗
下载PDF
职称材料
重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶治疗湿疹患儿的临床观察
被引量:
1
3
作者
孙锦贵
杨文超
《现代医学与健康研究电子杂志》
2021年第12期137-139,共3页
目的探讨重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rb-bFGF)凝胶对湿疹患儿嗜酸性粒细胞(EOS)、免疫球蛋白E(IgE)、白介素-18(IL-18)水平的影响。方法按照随机数字表法将寿光市人民医院2019年9月至2020年7月收治的80例湿疹患儿分为对照组和试验组,...
目的探讨重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rb-bFGF)凝胶对湿疹患儿嗜酸性粒细胞(EOS)、免疫球蛋白E(IgE)、白介素-18(IL-18)水平的影响。方法按照随机数字表法将寿光市人民医院2019年9月至2020年7月收治的80例湿疹患儿分为对照组和试验组,各40例。对照组患儿采用硼酸氧化锌冰片软膏治疗,试验组患儿在对照组的基础上联合重组rb-bFGF凝胶治疗,两组患儿均连续治疗4周。比较两组患儿治疗前与治疗2、4周后症状评分,治疗前与治疗4周后生活质量评分及外周血EOS、血清IgE、IL-18水平。结果与治疗前比,治疗2、4周后两组患儿症状评分均逐渐降低,且试验组均低于对照组;与治疗前比,治疗4周后两组患儿社会、躯体、情绪、生理等评分均升高,且试验组高于对照组,而两组患儿外周血EOS、血清IgE、IL-18水平均降低,且试验组低于对照组(均P<0.05)。结论重组rb-bFGF凝胶能够有效缓解湿疹患儿临床症状,改善患儿免疫功能,从而促进病情康复,提高患儿生活质量。
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关键词
湿疹
重组
牛碱性成纤维细胞
生长因子
凝胶
嗜酸性粒细胞
免疫球
蛋白
E
白介素
-
18
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职称材料
题名
重组人EGF-IL-18融合蛋白直接竞争ELISA方法的建立
1
作者
洪德芳
艾冬冬
丁麟超
吕建新
钟连进
厉保秋
高丽昌
金丽琴
机构
温州医科大学检验医学院
山东弘立医学动物实验研究有限公司
出处
《温州医学院学报》
CAS
2014年第7期485-488,共4页
基金
浙江省重大科技专项(2009C13038)
浙江省临床检验诊断学重中之重学科和浙江省重点科技创新团队资助项目(2010R50048)
文摘
目的:建立检测给药食蟹猴血清中重组人表皮生长因子-白介素-18 (rhEGF-IL-18)融合蛋白含量的直接竞争ELISA方法,为该融合蛋白的动力学研究提供方法学.方法:用棋盘法确定包被抗体和酶标抗原工作浓度,建立直接竞争ELISA方法,并对其进行方法学评价.结果:包被抗体和酶标抗原的最适工作浓度为4 μg/mL和1∶1 000.建立的标准曲线的曲线范围为100~ 900 ng/mL,R2为0.9898;日内精密度和日间精密度的最大变异系数分别为2.42%和2.20%;回收率95.3% ~103.0%;样品在室温放置1 h、冻融2次和冻存20 d三种条件下检测结果均较稳定,相对标准差均小于15%;定量下限为20.0 ng/mL.结论:本研究建立的ELISA方法稳定且可行.
关键词
重组人表皮生长因子-白介素-18融合蛋白
方法学评价
Keywords
rhEGF
-
IL
-
18
fusion protein
direct competitive ELISA
methodological evaluation
分类号
R331 [医药卫生—人体生理学]
下载PDF
职称材料
题名
用于肿瘤靶向治疗的EGF-IL-18融合蛋白在昆虫细胞中的表达及活性鉴定
被引量:
2
2
作者
孟哲峰
彭颖
沈波
吕建新
机构
温州医学院附属台州医院
温州医学院细胞与分子医学研究所
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第2期113-115,117,共4页
基金
浙江省医药卫生重点科技项目 (2 0 0 1ZD0 0 7)
文摘
目的 :制备能用于肿瘤靶向治疗的重组表皮生长因子受体干扰序列 白细胞介素 18(EGF-IL-18)融合蛋白 ,并鉴定其生物学活性。方法 :利用Bac-to-Bac表达系统在昆虫细胞Sf9中表达融合蛋白 ,用离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤层析等方法纯化表达产物 ,并以IFN-γ诱导实验和EGFR竞争结合实验初步评价融合蛋白的生物活性。结果 :经SDS-PAGE和Westernblot检测 ,Sf9细胞中表达的重组蛋白与预期的EGF-IL-18融合蛋白分子量一致 ,纯化后融合蛋白具有较高纯度和良好的免疫原性。IFN -γ诱导实验和EGFR竞争结合实验显示 ,该融合蛋白具有肿瘤导向性和抗肿瘤活性。结论 :成功表达并纯化了具有肿瘤导向性的抗肿瘤蛋白———EGF-IL-18融合蛋白 ,该蛋白具有较好的肿瘤导向性和抗肿瘤活性 。
关键词
表皮
生长因子
-
白细胞
介素
18
融合
蛋白
昆虫细胞
肿瘤靶向治疗
Keywords
EGF
-
IL
-
18
fusion proteins
Insect cells
Targeting therapy
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶治疗湿疹患儿的临床观察
被引量:
1
3
作者
孙锦贵
杨文超
机构
寿光市人民医院肿瘤一科
寿光市人民医院皮肤科
出处
《现代医学与健康研究电子杂志》
2021年第12期137-139,共3页
文摘
目的探讨重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rb-bFGF)凝胶对湿疹患儿嗜酸性粒细胞(EOS)、免疫球蛋白E(IgE)、白介素-18(IL-18)水平的影响。方法按照随机数字表法将寿光市人民医院2019年9月至2020年7月收治的80例湿疹患儿分为对照组和试验组,各40例。对照组患儿采用硼酸氧化锌冰片软膏治疗,试验组患儿在对照组的基础上联合重组rb-bFGF凝胶治疗,两组患儿均连续治疗4周。比较两组患儿治疗前与治疗2、4周后症状评分,治疗前与治疗4周后生活质量评分及外周血EOS、血清IgE、IL-18水平。结果与治疗前比,治疗2、4周后两组患儿症状评分均逐渐降低,且试验组均低于对照组;与治疗前比,治疗4周后两组患儿社会、躯体、情绪、生理等评分均升高,且试验组高于对照组,而两组患儿外周血EOS、血清IgE、IL-18水平均降低,且试验组低于对照组(均P<0.05)。结论重组rb-bFGF凝胶能够有效缓解湿疹患儿临床症状,改善患儿免疫功能,从而促进病情康复,提高患儿生活质量。
关键词
湿疹
重组
牛碱性成纤维细胞
生长因子
凝胶
嗜酸性粒细胞
免疫球
蛋白
E
白介素
-
18
分类号
R758.23 [医药卫生—皮肤病学与性病学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组人EGF-IL-18融合蛋白直接竞争ELISA方法的建立
洪德芳
艾冬冬
丁麟超
吕建新
钟连进
厉保秋
高丽昌
金丽琴
《温州医学院学报》
CAS
2014
0
下载PDF
职称材料
2
用于肿瘤靶向治疗的EGF-IL-18融合蛋白在昆虫细胞中的表达及活性鉴定
孟哲峰
彭颖
沈波
吕建新
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
2
下载PDF
职称材料
3
重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶治疗湿疹患儿的临床观察
孙锦贵
杨文超
《现代医学与健康研究电子杂志》
2021
1
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职称材料
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