重组人过氧化物还原酶-5通过诱导巨噬细胞极化提高抗肿瘤免疫

肿瘤细胞能够采用不同的策略抑制人体免疫系统,使其不能正常杀伤肿瘤细胞。前期研究表明,重组人过氧化物还原酶-5(human peroxiredoxin-5,hPRDX5)能够激活机体正常的抗肿瘤免疫反应,从而控制与清除肿瘤,然而,其确切的作用机制仍有待深入研究。本研究旨在探讨hPRDX5是否通过激活或者逆转小鼠巨噬细胞RAW264.7的极化状态,从而发挥其抗肿瘤活性。CCK8法检测结果显示,与对照组相比,不同剂量hPRDX5均能显著增强巨噬细胞活力(P<0.001);一氧化氮(nitric oxide,NO)检测试剂盒检测结果显示,hPRDX5显著增强RAW264.7细胞NO分泌水平(P<0.001);ELISA检测结果揭示,hPRDX5促进RAW264.7细胞TNF-α(P<0.01)和IL-6(P<0.001)的分泌;流式细胞术结果揭示,hPRDX5能够升高RAW264.7细胞抗原分化簇(cluster of differentiation,CD)80(P<0.01)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)(P<0.001)的表达,降低肿瘤条件培养基(tumor conditional culture solution,TCS)诱导的巨噬细胞CD206(P<0.001)的表达;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)检测揭示,hPRDX5可以提高巨噬细胞对小鼠胰腺癌Panc02细胞的杀伤活性。hPRDX5能够激活小鼠巨噬细胞RAW264.7,促进其M1型极化,并且逆转M2型极化,通过免疫增强作用发挥抗肿瘤活性。

重组鼠过氧化物还原酶-5体内抗胰腺癌作用研究

目的:探讨鼠源重组过氧化物还原酶-5(mPRDX5)在小鼠体内是否具有抗肿瘤活性,从而进一步确证PRDX5的抗肿瘤活性和作用机制。方法:通过体外异源表达和纯化获得高纯度的mPRDX5。小鼠左侧腋背部皮下接种胰腺癌Pan02细胞建立荷瘤小鼠模型。小鼠随机分为PBS(溶剂对照)组、GEM(吉西他滨)50.0 mg/kg组和mPRDX510.0 mg/kg组,每组10只,检测小鼠肿瘤相关指标。结果:与PBS组比较,GEM组荷瘤小鼠体质量降低明显,mPRDX5组小鼠体质量有一定程度的增加。PBS组肿瘤生长良好,根据肿瘤体积计算,与PBS组相比,GEM组、mPRDX510.0 mg/kg组在D7肿瘤生长抑制率分别为87.07%和52.82%;按瘤重计算,与PBS组相比,GEM组、mPRDX510.0 mg/kg组在D7肿瘤生长抑制率分别为95.39%和48.33%。对PBS组和mPRDX5组小鼠肿瘤组织中的巨噬细胞极化状态进行分析,发现相较于PBS组,mPRDX5组小鼠肿瘤组织中表达CD86的M1型巨噬细胞显著增加,而表达CD206的M2型巨噬细胞显著减少。结论:mPRDX5在小鼠体内具有显著的抗胰腺癌活性,且活性的发挥是通过促进肿瘤微环境中的巨噬细胞向M1型极化实现。

重组人-p53腺病毒注射液

重组人-p53腺病毒注射液是治疗恶性肿瘤药物中的新品,可以有效地将治病的p53基因转入肿瘤细胞内,特异地引起肿瘤细胞程序性死亡,或者使肿瘤细胞处于严重冬眠状态,而对正常细胞无害。

红球菌染料脱色过氧化物酶的异源表达及活性分析

染料脱色过氧化物酶(dye-decolorizing peroxidase,DyP)属于以血红素为辅基的新型过氧化物酶超家族。由于能够降解蒽醌类染料,DyP成为当今绿色经济的研究热点,而染料的有效降解与酶活性密切相关,因此寻求提高酶活性的方法是DyP后续生产应用的关键所在。克隆来自红球菌(Rhodococcus jostii)的染料脱色过氧化物酶基因RhDypB,实现在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中的高效表达,并对提高酶活性的方法进行了研究。利用一步克隆技术构建重组菌株pET24b-DypB/BL21,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导使蛋白表达,镍柱亲和层析纯化蛋白,比较了外源添加血红素合成前体5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid,5-ALA)和共表达大肠杆菌血红素合成途径中的谷氨酰-tRNA还原酶基因(hemA)对酶活性的影响。SDS-PAGE显示在40 kDa有明显的目的条带(纯度达到90%),蛋白质量浓度可达100 mg/L。添加5-ALA以及共表达hemA分别使血红素浓度增加至8.9和2.4μmol/L,相应的酶活性提高了102%和93%。RhDypB的可溶性表达与血红素含量的提升,为以血红素作为辅因子的过氧化物酶的相关研究提供依据。

超声心动图评价重组Peroxiredoxin-2蛋白对糖尿病心肌病大鼠心功能的影响

目的应用超声心动图来检测外源重组过氧化物还原酶(rePrx)-2对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心功能的影响。方法 30只SD雄性大鼠分为对照组(n=10),单纯DCM模型组(单纯模型组,n=10),干预组(DCM+rePrx-2,n=10只)。干预组于糖尿病模型构建成功后通过腹部皮下植入微渗透泵方法给予rePrx-2蛋白。于DCM大鼠模型建立后第12周检测各组的心脏超声心动图结果,并应用HE及Masson染色对大鼠心肌组织进行病理检查。结果与单纯模型组相比较,干预组大鼠心脏收缩期室间隔厚度(IVSs),舒张期室间隔厚度(IVSd),收缩期左心室内径(LVIDs),舒张期左心室内径(LVIDd),舒张期左室后壁厚度(LVPWd)和收缩期左室后壁厚度(LVPWs)显著降低,差异均具有统计学意义(均P<0.05);同时干预组心功能指标左室射血分数(LVEF)和缩短分数(LVFS)显著增高,差异具有统计学意义(均P<0.05),Masson及HE染色可见干预组明显改善单纯模型组心肌纤维化损伤程度。结论通过超声心动图检查,能有效证实rePrx-2对DCM大鼠心肌重构及心功能有明显改善作用。

硒与几种酶的关系

通过对硒与谷胱甘肽过氧化物酶系、磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶系、碘甲腺原氨酸脱碘酶系、硫氧还蛋白还原酶系关系的研究 ,阐述硒对人体健康的影响。