精浆中游离L-肉碱水平与附属性腺生化指标的相关性研究

目的:研究精浆中游离L-肉碱水平与α-葡糖苷酶、果糖、酸性磷酸酶3项附属性腺生化指标之间的相关性,探讨L-肉碱作为一项生化指标在男性生殖功能评价中的作用。方法:采集30例正常生育男性和222例不育患者精液样品,分别以计算机辅助精液分析系统进行精液常规分析,同时测定精浆中游离L-肉碱、果糖水平以及α-葡糖苷酶和酸性磷酸酶活性。用SPSS 12.0统计软件包分析两组间各项生化指标之间的差异,以及精浆中游离L-肉碱与果糖水平、α-葡糖苷酶和酸性磷酸酶活性之间的相关性。结果:正常生育组精浆游离L-肉碱水平明显高于不育组(P<0.01)。两组间α-葡糖苷酶活性差异有统计学意义(P<0.05),而果糖水平和酸性磷酸酶活性差异无统计学意义。相关性分析结果显示,精浆游离L-肉碱水平与精浆中α-葡糖苷酶活性具有较强的正相关关系(r=0.504,P<0.001);而与精浆中果糖水平以及酸性磷酸酶活性之间无相关关系。结论:精浆中游离L-肉碱水平测定可作为评估附睾功能的一项生化指标,其在正常生育组与不育组间的水平差异较两组精浆中α-葡糖苷酶活性差异更为显著,可为男性不育检查及临床诊治和进行有关男性生殖功能机制研究提供参考。

婴儿型糖原贮积症Ⅱ型酶替代治疗三例并文献复习

背景婴儿型糖原贮积症Ⅱ型(GSDⅡ)患儿临床表现危重,未予重组人酸性α葡糖苷酶替代治疗时,常会在1岁前死于心力衰竭和或呼吸衰竭,目前国内缺少对婴儿型GSDⅡ酶替代治疗的疗效评估。目的总结婴儿型GSDⅡ使用重组α葡萄糖苷酶治疗的效果,为临床治疗提供参考。方法收集2016年3月—2017年12月在中山大学附属第一医院住院确诊的婴儿型GSDⅡ患儿3例,均有心肌肥厚和/或肌无力表现,外周血酸性α-葡糖苷酶(GAA)活性低于正常。患儿均接受重组人类GAA替代治疗,20mg/kg,1次/2周。观测患儿生命体征、呼吸情况、肌力、丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、胸部X线检查情况。结果3例患儿开始治疗时症状均以四肢肌无力并呼吸困难为主要表现,1例成功撤离呼吸机,2例放弃治疗后死亡。3例患儿经重组人类GAA替代治疗肌力均明显好转,ALT下降2例,升高1例;AST下降2例,升高1例;LDH下降1例,升高2例;CK下降2例,升高1例;3例患儿治疗前的胸部X线检查示心影大;治疗后患儿1、2胸部X线检查示心影缩小,患儿3胸部X线检查示心影变化不明显。治疗后心脏彩超示室间隔厚度下降3例;左心室射血分数提升3例。结论 结合文献复习,重组人GAA替代治疗婴儿型GSDⅡ安全有效,可明显改善患儿心功能、肌力及呼吸功能。

少弱精子症与精浆附性腺标志物的相关性分析

目的分析少弱精子症患者精液参数与精浆附性腺标志物的相关性,探讨附性腺功能对男性生育力的影响。方法采用精液常规、精子形态、精浆附性腺标志物分析方法,检测正常供精者和门诊就诊的少弱精子症患者的精液相关指标。结果少弱精子症组正常形态精子百分数、精子穿透功能、精浆中性α-糖苷酶显著低于正常对照组。相关分析结果显示,少弱精子症患者组,精液量与精子活动率呈负相关(r=-0.415,P<0.05),精子数与形态呈正相关(r=0.393,P<0.05)。结论少弱精子症患者同时存在不同程度的附睾功能障碍,精子功能下降,精子畸形率显著升高,睾丸生精功能越低下,精子畸形发生率越高。

不育男性弓形虫感染与附属性腺功能测定

目的探讨弓形虫(toxoplasmosis)感染对男性附属性腺功能的影响。方法应用化学法分别检测38例正常生育男性(正常对照组)和42例弓形虫感染不育男性(弓形虫感染组)的精浆中酸性磷酸酶(ACP)、果糖(Fru)和α-葡糖苷酶(α-Glu)含量。结果弓形虫感染组中精浆ACP和α-Glu含量明显低于对照组,两组之间存在显著性差异(P<0.05),而Fru两组之间无显著性差异(P>0.05)。结论弓形虫感染对前列腺和附睾功能具有干扰作用,测定精浆中ACP,Fru和α-Glu含量可帮助判断弓形虫感染所致男性不育者的状态,指导临床对其进行有效的治疗。

输精管结扎与吻合术后对附性腺功能的影响研究

目的探讨输精管吻合术后对附性腺功能的影响。方法我院与广州市番禺区人口和计划生育服务站协同,接收输精管结扎后的显微外科输精管吻合术25例患者,在术前、术后1-12个月随访时检查精液常规及精浆生化,并以23例正常男子作对照研究。结果输精管吻合术前后α-中性葡糖苷酶的含量分别是(13.95±9.68)U/L,(27.34±18.04)U/L,两组间有显著性差异(P<0.05),吻合术后α-中性葡糖苷酶与对照组比较无明显差异(P>0.05);精液量、果糖、酸性磷酸酶3组间无显著性差异(P>0.05)。结论输精管结扎术对精囊腺、前列腺无明显影响,但升高近睾端压力,使附睾上皮分泌功能降低;输精管复通后,近睾端压力得到缓解,附睾功能得以恢复。

婴儿型庞贝病1例护理

庞贝病(又称为糖原累积病Ⅱ型)是一种常染色体隐性遗传病,其特征是溶酶体酸性α-葡糖苷酶(acid alpha-glucosidase,GAA)基因突变导致GAA酶活性降低或缺乏,糖原不能分解而贮积在各种组织的溶酶体内,导致心肌、呼吸肌及骨骼肌等进行性损害,以及各种神经功能损害[1]。根据临床症状出现的时间,该病可分成婴儿型庞贝病(infantile-onset Pompe disease,IOPD)和晚发型庞贝病(late-onset Pompe disease,LOPD)。IOPD患儿病情进展迅速,绝大多数患儿表现为肥厚性心肌病、心脏肿大、肌肉无力及呼吸功能不全,若无有效治疗,常于1岁左右死于心力衰竭及呼吸衰竭[2]。

酶和发酵工程

892141 在小麦茎杆上用 reesei 木霉 QM9414生产β-葡糖苷酶:位置及其一些动态特性[英]/Acebal,C.…//Acta Biotechnol-.1988,8(4).-341～348[译自 DBA,1988,7(24),88-12163]采用磨碎、筛滤小麦茎杆进行批量生产研究了从里氏木霉(Trichoderma reesei)

婴儿型糖原累积症Ⅱ型六例临床分析

目的 分析6例婴儿型糖原累积症Ⅱ型（glycogen storage disease typeⅡ,GSDⅡ）的临床特点.方法 回顾性分析2012年1月-2014年6月北京大学第一医院儿科诊断的6例婴儿型GSDⅡ患儿的临床资料.对其临床特点、血生化检查、胸部X线片、超声心动图、心电图、酸性α-葡糖苷酶（GAA）活性检查、GAA基因突变分析结果进行分析.结果 6例婴儿型GSDⅡ患儿有5例诊断为经典婴儿型（男1例,女4例）,1例女性患儿为非经典婴儿型.起病年龄从生后到3个月不等,所有患儿均表现出不同程度的肌无力、肌张力低下,运动发育落后甚至倒退,还表现有呼吸困难（4例）、喂养困难（2例）,哭声弱（2例）、肝脏增大（2例）、巨舌（1例）.6例均有心界扩大,3例胸部X线发现心影增大,心胸比例增加,4例行超声心动图均有心肌肥厚表现,3例行心电图检查均有PR间期缩短及心室高电压表现.所有患儿的血清肌酸激酶水平较正常升高3～7倍（441 ～1 238 U/L）.4例进行GAA活性检查的患儿的酶活性水平均较参考值明显降低[1.3～2 nmol/（spot· d）].4例进行GAA基因检测,共有8种不同的点突变;其中错义突变6种,分别是c.998C＞ A（p.Thr333Lys）、c.1280T＞C（p.Met427Thr）、c.1760T＞C（p.Leu587Pro）、c.1924G＞ T（p.Val642Phe）、c.2012T＞A（p.Met671Lys）、c.2105G＞ A（p.Arg702His）;无义突变1种,c.2662G＞ T（p.Glu888X）;移码突变1种,c.2812_2813delTG（p.Cys938fs）.随访中5例经典婴儿型患儿已死亡,死亡年龄7个月～1岁10个月,平均生存时间14.5个月;1例非经典型患儿仍存活,现已2岁5个月.结论 婴儿型GSDⅡ临床主要表现有肌无力、肌张力低下,心肌受累;血清肌酸激酶水平升高、GAA活性明显降低.GAA基因检出致病突变.

晚发型蓬佩病的酶治疗随访及相关文献复习

目的总结分析酶治疗对晚发型蓬佩病患者的疗效及安全性,为晚发型蓬佩病患者的治疗及预后提供参考。方法总结济宁医学院附属医院于2019年5月13日收治的1例确诊的晚发型蓬佩病患者的临床特点,观察其对α-葡糖苷酶(GAA)治疗的疗效。同时检索有关酶治疗晚发型蓬佩病文献,最终纳入21篇文献910例晚发型蓬佩病患者进行分析。结果患者16岁后逐渐出现肌无力的表现,GAA活力为0,肌电图提示双下肢肌源性损害,二代测序发现GAA基因的复合杂合突变,肌肉活组织检查提示空泡样特征性改变。患者诊断蓬佩病8年后给予酶治疗18.5个月,共治疗20次,肌无力症状前期有改善,且未出现不良反应。对纳入的行GAA治疗的910例晚发型蓬佩病患者进行分析,大部分患者在使用GAA治疗后,行走能力和(或)呼吸功能改善或稳定。结论酶治疗可以延缓大部分晚发型蓬佩病患者的病情进展,提高生活质量,且耐受性良好;在晚期重症患者中,即使在发病多年后行酶治疗,依然有显著疗效。

AAV载体介导的蓬佩病模型小鼠体内基因治疗研究

目的:蓬佩病是一种由酸性α-葡糖苷酶(GAA)缺乏引起的溶酶体糖原贮积症,病理特征是糖原在心脏、骨骼肌和中枢神经系统中累积。基因治疗有望成为治疗蓬佩病的突破性手段。采用AAV9载体在蓬佩病模型小鼠体内介导GAA基因转移,评估转基因干预后小鼠体内GAA酶活力变化、组织糖原累积及病理改变。方法:采用AAV9载体携带密码子优化的GAA基因(coGAA),通过杆状病毒生产工艺包装AAV病毒载体rAAV9-coGAA,分别以1.1×10^(13)vg/kg、3.0×10^(13)vg/kg、1.2×10^(13)vg/kg的剂量静脉单次注射给予成年蓬佩病模型小鼠,以3.0×10^(14)vg/kg的剂量静脉单次注射给予老龄蓬佩病模型小鼠。到达试验终点后安乐死小鼠,使用荧光分光光度法测定GAA酶活力、PAS染色观察糖原累积、HE染色检查病理变化。结果:成年模型小鼠给药5周后,各个组织能够广泛表达具有活性的GAA,其中心脏、肝脏表达水平较高,脑和脊髓表达水平较低。转基因干预后心肌、骨骼肌与脑中的糖原含量下降,心肌、骨骼肌的空泡样变性显著减少。老龄小鼠治疗后,组织酶活力与模型小鼠相比显著提升,心肌的空泡样变性和炎细胞浸润减少,但骨骼肌的病理改善有限。结论:静脉单次注射rAAV9-coGAA在蓬佩病模型小鼠中能够提升GAA酶活力,减少糖原累积并改善病理,治疗效果呈剂量依赖,对老龄小鼠也有一定治疗效果。为AAV9静脉递送GAA基因治疗蓬佩病的临床应用奠定了基础。