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重组人VEGF165蛋白在毕赤酵母中高效表达与多克隆抗体的制备 被引量:1
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作者 王晓 黄晓平 +1 位作者 周宇 刁勇 《华侨大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2014年第6期695-700,共6页
构建pPIC9K-VEGF165分泌型载体,线性化后电击转化至GS115(his4)中,经最小葡萄糖培养基(MD平板)筛选出阳性表达菌株并进行聚合酶链式反应(PCR)验证.菌株发酵上清液经Sephadex G-25,Heparin Sepharose FF和Sephacryl S-100层析介质分离纯... 构建pPIC9K-VEGF165分泌型载体,线性化后电击转化至GS115(his4)中,经最小葡萄糖培养基(MD平板)筛选出阳性表达菌株并进行聚合酶链式反应(PCR)验证.菌株发酵上清液经Sephadex G-25,Heparin Sepharose FF和Sephacryl S-100层析介质分离纯化,目的蛋白纯度达到95%,相对分子质量约为24ku.结果表明:重组人VEGF165蛋白能诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖,提高HUVEC细胞的活性;重组人VEGF165蛋白免疫小鼠,制备多克隆抗体,间接酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测抗体效价达1:51 200. 展开更多
关键词 重组人vegf165蛋白 多克隆抗体 毕赤酵母 高效表达
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利用重组人VEGF165制备单克隆抗体的研究
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作者 孙大军 杨淑华 +2 位作者 李亚萍 杜建时 祁功才 《白求恩医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期475-477,共3页
目的 :制备抗重组人血管内皮生长因子 (VEGF) 16 5单克隆抗体。方法 :构建人 VEGF16 5原核表达载体 p ET- 3a/ VEGF16 5 ,并使其在大肠杆菌中高效表达 ,纯化表达产物。用初步纯化的rh VEGF16 5免疫小鼠制成杂交瘤细胞 ,小鼠腹腔接种 ,... 目的 :制备抗重组人血管内皮生长因子 (VEGF) 16 5单克隆抗体。方法 :构建人 VEGF16 5原核表达载体 p ET- 3a/ VEGF16 5 ,并使其在大肠杆菌中高效表达 ,纯化表达产物。用初步纯化的rh VEGF16 5免疫小鼠制成杂交瘤细胞 ,小鼠腹腔接种 ,收集腹水纯化后制成抗 rh VEGF16 5单克隆抗体。结果 :VEGF16 5诱导的内皮细胞增殖可被本研究制备的单克隆抗体中和 ,并表现出较好的剂量依赖关系。结论 :本研究利用 DNA重组技术制备人 VEGF16 5 ,并利用它进一步制备了抗重组人VEGF16 5单克隆抗体。 展开更多
关键词 载体 重组人vegf165 单克隆抗体 制备 DNA
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VEGF_(165)b重组蛋白与贝伐珠单抗对人胃癌裸鼠移植瘤CD34表达及细胞凋亡的影响 被引量:4
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作者 吴海荣 关云艳 +1 位作者 吴锡平 诸静芬 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2014年第8期1058-1063,共6页
目的:对比观察VEGF165b重组蛋白(recombinant human VEGF165b protein,rhVEGF165b)与贝伐珠单抗对人胃癌裸鼠移植瘤生长的影响及作用机制.方法:用人胃癌细胞BGC-823接种于裸鼠皮下,建立裸鼠移植瘤模型,随机分为3组,每组21只:rhVEGF165b... 目的:对比观察VEGF165b重组蛋白(recombinant human VEGF165b protein,rhVEGF165b)与贝伐珠单抗对人胃癌裸鼠移植瘤生长的影响及作用机制.方法:用人胃癌细胞BGC-823接种于裸鼠皮下,建立裸鼠移植瘤模型,随机分为3组,每组21只:rhVEGF165b组(腹腔注射rhVEGF165b 10?g/kg)、贝伐珠单抗组(腹腔注射贝伐珠单抗5 mg/kg)、对照组(腹腔注射生理盐水10 mL/kg),分别于1、2、3 wk测量裸鼠移植瘤体积及瘤质量,免疫组织化学方法检测肿瘤组织中CD34表达(以阳性细胞数计算肿瘤微血管密度),TUNEL方法检测肿瘤组织细胞凋亡.结果:贝伐珠单抗组移植瘤体积(cm3)及瘤质量(g)在第1、2、3周均小于对照组(1 wk:0.453±0.119 vs 0.637±0.084,0.32±0.097vs 0.46±0.093;2 wk:1.691±0.381 vs 2.238±0.29,1.168±0.524 vs 2.013±0.833;3 wk:1.709±0.474 vs 4.872±0.594,1.747±0.557 vs3.463±0.986,均P<0.05),而rhVEGF165b组仅在第1、2周较对照组小(1 wk:0.546±0.132 vs0.637±0.084,1.894±0.599 vs 0.46±0.093;2wk:1.894±0.599 vs 2.238±0.29,1.537±0.568vs 2.013±0.833,均P<0.05),第3周其体积及瘤质量大于贝伐珠单抗组(3 wk:3.843±1.339 vs1.709±0.474,3.066±1.281 vs 1.747±0.557,P<0.05),与对照组无明显差异.rhVEGF165b组、贝伐珠单抗组CD34的表达水平在第1、2、3周均低于对照组(P<0.05,P<0.01),凋亡指数高于对照组(P<0.05,P<0.01);与贝伐珠单抗组相比,第1周rhVEGF165b组CD34的表达水平更低(P<0.05),但第2、3周却高于贝伐珠单抗组(P<0.01);rhVEGF165b组的凋亡指数在第1周明显高于贝伐珠单抗组(P<0.01),而第2、3周却低于贝伐珠单抗组(P<0.05).结论:rhVEGF165b、贝伐珠单抗对人胃癌移植瘤的生长有明显抑制作用,rhVEGF165b早期抑制血管生成、促进细胞凋亡表现更为明显. 展开更多
关键词 vegf165b重组蛋白 贝伐珠单抗 胃癌 血管密度 凋亡
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体外重组表达血管生长因子VEGF165单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:2
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作者 孔桂美 张小荣 +3 位作者 刁亚利 吴克艳 刘秋云 卜平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1098-1102,共5页
目的:研制人VEGF165单克隆抗体(mAb),为研究VEGF165的生物学活性提供基础。方法:应用RT-PCR从脐静脉内皮细胞中克隆人VEGF165基因,克隆入原核表达载体pGEX-6P1中获得重组表达载体pGEX-6P1-VEGF165,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达获得... 目的:研制人VEGF165单克隆抗体(mAb),为研究VEGF165的生物学活性提供基础。方法:应用RT-PCR从脐静脉内皮细胞中克隆人VEGF165基因,克隆入原核表达载体pGEX-6P1中获得重组表达载体pGEX-6P1-VEGF165,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达获得重组人VEGF165蛋白,将重组蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术,制备人VEGF165高效价的mAb。通过鸡胚血管形成抑制实验、HUVEC迁移抑制实验以及HUVEC血管形成抑制实验,对获得的人VEGF165特异性mAb进行进一步鉴定。结果:成功地从脐静脉血管内皮细胞中克隆出人VEGF165基因,并在大肠杆菌表达系统中获得高效表达,以纯化重组蛋白作为免疫原免疫小鼠,筛选获得5株分泌人VEGF165特异性mAb的杂交瘤细胞株,分别命名为5A6、3F5、6H3、7D10、7A10,其中5A6、3F5、6H3、7D10分泌的mAb亚类为IgG2a,7A10分泌的mAb亚类为IgG2b,抗体轻链均为κ链。5株mAb均能抑制鸡胚血管形成、抑制HUVEC迁移和及血管形成。结论:所获得的mAb具有效价高,活性强的优点,为抗肿瘤血管研究中进一步研究VEGF165的生物学作用提供了重要的基础。 展开更多
关键词 人vegf165 单克隆抗体 HUVEC 血管形成 细胞迁移
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重组VEGF165在哺乳动物细胞中表达及其生物学活性 被引量:2
5
作者 贺立新 马彩虹 +1 位作者 曹玉珏 李冬海 《临床和实验医学杂志》 2011年第18期1411-1414,共4页
目的构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-血管内皮生长因子(VEGF)165并在哺乳动物细胞中实现目的基因的表达,对目的蛋白进行鉴定和生物学活性分析。方法分子生物学方法将扩增的VEGF165基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+),在脂质体介导下将重... 目的构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-血管内皮生长因子(VEGF)165并在哺乳动物细胞中实现目的基因的表达,对目的蛋白进行鉴定和生物学活性分析。方法分子生物学方法将扩增的VEGF165基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+),在脂质体介导下将重组质粒转染至哺乳动物细胞NIH 3T3并进行抗生素压力筛选,采用双抗夹心ELISA、SDS-PAGE和免疫印迹方法对目的蛋白在转染细胞中的特异表达进行鉴定,在血管内皮细胞ECV304上对表达产物的细胞结合活性和促增殖活性进行分析。结果构建的真核表达载体pcDNA3.1(+)-VEGF165成功转染NIH3T3,获得加压筛选的重组细胞,目的基因得到稳定表达,目的蛋白能与血管内皮细胞ECV304特异结合,并具有促内皮细胞增殖活性。结论应用pcDNA3.1(+)-VEGF165载体转染的NIH 3T3细胞可稳定表达具生物学活性的VEGF165重组蛋白。 展开更多
关键词 vegf165 转染 筛选 表达 鉴定 活性
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反义VEGF165腺病毒重组体的构建及鉴定 被引量:3
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作者 王家宁 黄永章 +3 位作者 王俊峰 王卫民 李瑞明 张群林 《郧阳医学院学报》 2001年第1期1-4,共4页
目的 :构建含人反义血管内皮生长因子 16 5 (VEGF16 5 )基因的重组腺病毒载体 ,为采用反义VEGF16 5RNA防治肿瘤的研究奠定基础。方法 :将人VEGF16 5cDNA反向插入到穿梭质粒pHCMVSP1A的CMV启动子之下 ,即pAd -ahVEGF16 5。后者与pJM17通... 目的 :构建含人反义血管内皮生长因子 16 5 (VEGF16 5 )基因的重组腺病毒载体 ,为采用反义VEGF16 5RNA防治肿瘤的研究奠定基础。方法 :将人VEGF16 5cDNA反向插入到穿梭质粒pHCMVSP1A的CMV启动子之下 ,即pAd -ahVEGF16 5。后者与pJM17通过脂质体共转染 2 93细胞 ,经同源重组获得含人反义VEGF16 5基因的重组腺病毒Ad -ahVEGF16 5。通过PCR共扩增法鉴别Ad -ahVEGF16 5的正确与否。根据 2 6 0nm的紫外光吸收值计算病毒滴度。结果 :VEGF16 5cDNA成功地反向插入了pHCMVSP1A载体 ,以重组病毒基因组DNA为模板 ,同时扩增出了5 76bp的反义VEGF16 5基因片段和 86 0bp的腺病毒骨架基因片段 ,证实了Ad -ahVEGF16 5的正确性。病毒滴度为5 .6× 10 11pfu/ml。结论 :成功构建了携带人反义VEGF16 5基因的腺病毒Ad -ahVEGF16 5 ,本研究为采用反义VEGFRNA途径治疗肿瘤的在体。 展开更多
关键词 反义vegf165 腺病毒 反义血管内皮生长因子165 基因重组 治疗 肿瘤
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重组VEGF_(165)基因表达与活性检测
7
作者 白育庭 闵清 +2 位作者 查文良 高卉 万敬枝 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第8期24-26,共3页
目的为血管内皮生长因子(VEGF165)生物学分子机制的研究奠定基础。方法用RT-PCR法从人胎肝总RNA中逆转录扩增VEGF165,将其插入表达载体pET-32a(+)Vector中,将测序鉴定正确的重组表达载体转化至E.Coli XL-Blue中表达,并用纯化蛋白刺激人... 目的为血管内皮生长因子(VEGF165)生物学分子机制的研究奠定基础。方法用RT-PCR法从人胎肝总RNA中逆转录扩增VEGF165,将其插入表达载体pET-32a(+)Vector中,将测序鉴定正确的重组表达载体转化至E.Coli XL-Blue中表达,并用纯化蛋白刺激人脐静脉内皮细胞,检测其促增殖活性。结果经异丙基硫代-βD-半乳糖苷(IPTG)诱导后,VEGF165(His)6得到有效表达,Western blot分析可以观察到相对分子质量为26kD的诱导表达条带,该表达蛋白可与VEGF多克隆抗体发生特异性反应。用His-bind亲和层析纯化得到纯度较高的目的蛋白,该蛋白可促进内皮细胞增殖。结论基因工程技术可使大肠杆菌有效表达人VEGF165,并得到纯度较高、有增殖活性的VEGF蛋白;此为进一步研究VEGF的生物学分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 vegf165 基因克隆 表达 纯化 增殖
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携hVEGF_(165)基因的重组腺病毒载体的构建及鉴定
8
作者 刘启功 陆再英 +1 位作者 张卫东 颜进 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期713-716,共4页
目的 构建携带人血管内皮生长因子 16 5 (hVEGF165)基因的重组腺病毒载体。方法 将hVEGF165cDNA亚克隆到腺病毒中间载体pACCMV·pLpA ,再与pJM17共转染人胚肾 2 93细胞 ,获得载hVEGF165基因的复制缺陷型重组腺病毒 ,感染体外培... 目的 构建携带人血管内皮生长因子 16 5 (hVEGF165)基因的重组腺病毒载体。方法 将hVEGF165cDNA亚克隆到腺病毒中间载体pACCMV·pLpA ,再与pJM17共转染人胚肾 2 93细胞 ,获得载hVEGF165基因的复制缺陷型重组腺病毒 ,感染体外培养的兔主动脉血管平滑肌细胞 (VSMC) ,通过RT PCR和Westernblot检测VEGF表达情况 ,并观察表达产物VEGF对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)增殖的影响。结果 重组腺病毒感染VSMC 4 8h后有VEGFmRNA转录及蛋白质的表达 ,并呈剂量依赖性地促进HUVEC增殖。结论 构建的重组腺病毒载体在VSMC中能够有效表达目的基因 ,且能有效促进HUVEC增殖 ,为hVEGF165基因的实际应用奠定了基础。 展开更多
关键词 vegf165 重组腺病毒载体 HUVEC VSMC 目的基因 增殖 血管内皮生长因子 中间载体 亚克隆 DNA
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VEGF165基因重组腺病毒载体的构建及其促血管形成作用
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作者 贾红亮 谢宇锋 +3 位作者 杨吉成 盛伟华 孙凌 吕海涛 《中国血液流变学杂志》 CAS 2010年第1期22-26,共5页
目的构建携带人血管内皮细胞生长因子165(VEGF165)基因的腺病毒表达载体(Ad—VEGF165),并观察其感染QBI.293A靶细胞后目的基因的表达及促进血管形成的作用。方法以含有VEGF165基因片段的pSV-K3-VEGF165质粒为模板,PCR扩增获得的V... 目的构建携带人血管内皮细胞生长因子165(VEGF165)基因的腺病毒表达载体(Ad—VEGF165),并观察其感染QBI.293A靶细胞后目的基因的表达及促进血管形成的作用。方法以含有VEGF165基因片段的pSV-K3-VEGF165质粒为模板,PCR扩增获得的VEGF165目的片段(XhoI、EcoRV)亚克隆至GFP标记的pAdTrack—CMV载体中构建重组转移质粒pAdTrack.CMV.VEGF165,行PCR、双酶切和DNA测序鉴定。将测序正确的pAdTrack—CMV.VEGFl65质粒经PmeI线性化后与腺病毒骨架质粒pAdEasy.1共转化BJ5183细菌,获得同源重组腺病毒质粒pAdEasy-1.pAdTrack-CMV.VEGF165(pAd.VEGF165),再经PacI线性化后用脂质体转染QBI.293A包装细胞,通过多轮扩增和氯化铯密度梯度离心纯化获得Ad.VEGFl65重组腺病毒。RT.PCR和ELISA检测腺病毒介导的外源性VEGFl65基因在QB|.293A细胞中的转录和表达。将孵育8d的生长状态良好的鸡胚随机分成Ad空载体腺病毒组、Ad—VEGFI65重组腺病毒组、NS组。采用鸡胚尿囊膜(CAM)法检测VEGF165重组腺病毒促进尿囊膜血管形成活性。结果PCR、双酶切和测序鉴定结果证实成功构建了pAdTrack.CMV—VEGF165重组转移质粒,并获得了高滴度的Ad.VEGF165重组腺病毒,其病毒效价可达2×10^10pfu/mL。Ad-VEGFl65感染后,QBI.293A细胞中的VEGF165含量较QBI.293A细胞对照组和Ad空病毒感染组均明显升高(P〈0.05)。Ad-VEGF165组与Ad.空载体组和NS组比较,CAM三级分支血管生长更旺盛,毛细血管更丰富(P〈0.05)。结论成功获得了携带人VEGF165基因的腺病毒表达载体,具有明显的促CAM血管形成活性,为进一步开展VEGF165基因修饰干细胞的应用研究奠定了实验基础。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子1 65 腺病毒载体 表达
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Expression of VEGF165 and VEGF165b during ovarian follicular development
10
作者 Chinnarat Changsangfa Bongkoch Turathum +1 位作者 Morakot Sroyraya Khwanthana Grataitong 《Asian pacific Journal of Reproduction》 2023年第6期281-287,共7页
Objective:To investigate the role of vascular endothelial growth factor(VEGF)165a,VEGF165b,and VEGF receptor(VEGFR)in the development of bovine follicles.Methods:We cultured follicular cells that were collected from s... Objective:To investigate the role of vascular endothelial growth factor(VEGF)165a,VEGF165b,and VEGF receptor(VEGFR)in the development of bovine follicles.Methods:We cultured follicular cells that were collected from small,medium,and large sized bovine follicles with estrogen and measured the expression of VEGF,VEGFR2 and VEGF165b by Western blot analysis and immunofluorescence.Results:The expression of VEGF165 increased in all follicle sizes and the expression of VEGF165b was increased in the small and large follicles after culturing in an estrogen containing medium.The expression of VEGFR2 was increased in the medium and large follicles after culturing with estrogen for 96 h.VEGF165 was activated at 100 ng/mL estrogen in the large follicles for 96 h.In addition,VEGFR2 was upregulated in the medium and large follicles after treated with 100 ng/mL estrogen for 96 h.Conclusions:This evidence suggests that the expression of VEGF165 and VEGFR is associated with estrogen stimulation during the development of bovine follicles and in an autocrine or paracrine manner.This reveals an advantage during oocyte maturation in vitro. 展开更多
关键词 Ovarian follicles Vascular endothelial growth factor vegf vegfR2 vegf165B Estrogen stimulation
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食管鳞癌中VEGF_(165b)、HIF-1α的表达及临床意义 被引量:6
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作者 胡建莉 陈萍 +3 位作者 刘伟 李振宇 陈叶珊 伍钢 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期9-11,共3页
目的检测食管鳞癌组织中VEGF165b和HIF-1α的表达及与临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测143例食管鳞状细胞癌组织中VEGF165b和HIF-1α的表达。结果VEGF165b和HIF-1α在食管鳞癌组织中的阳性表达率分别为13.3%和43.4%;VE... 目的检测食管鳞癌组织中VEGF165b和HIF-1α的表达及与临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测143例食管鳞状细胞癌组织中VEGF165b和HIF-1α的表达。结果VEGF165b和HIF-1α在食管鳞癌组织中的阳性表达率分别为13.3%和43.4%;VEGF165b阳性表达率与HIF-1α阳性表达率呈负相关关系(P=0.035)。HIF-1α阳性表达率与饮酒程度、分期、纵隔淋巴结转移及肿瘤的分化程度呈正相关(P<0.05)。结论VEGF165b和HIF-1α在食管癌的发生发展和淋巴转移中起重要的作用,VEGF165b的表达与HIF-1α存在相关性,饮酒是食管癌的重要危险因素。VEGF165b可能成为治疗的靶点。 展开更多
关键词 食管肿瘤 vegf165B HIF-1Α 饮酒
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抗人VEGF165单链抗体的构建与表达 被引量:7
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作者 赵泽国 杨治华 +3 位作者 冉宇靓 刘军 孙立新 董志伟 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期92-95,共4页
目的为降低鼠源抗体对人体的免疫原性 ,构建表达了 Vm D11的单链抗体。方法用 overlap PCR构建出单链抗体的基因 ,克隆入表达载体 p Kp L- 3a,在大肠杆菌 pop2 136中表达 ,采用抗原结合 EL ISA和竞争抑制 EL ISA测定活性。结果经SDS- P... 目的为降低鼠源抗体对人体的免疫原性 ,构建表达了 Vm D11的单链抗体。方法用 overlap PCR构建出单链抗体的基因 ,克隆入表达载体 p Kp L- 3a,在大肠杆菌 pop2 136中表达 ,采用抗原结合 EL ISA和竞争抑制 EL ISA测定活性。结果经SDS- PAGE检测 ,诱导后的细菌表达了 2 6 k D的蛋白 ;Western Blot证实该蛋白为表达的单链抗体。经变性、复性后 ,该单链抗体可特异结合人 VEGF16 5抗原 ,并与 Vm D11具有相同的抗原结合位点。结论成功构建和表达了抗人 VEGF16 5单链抗体 ,可望进一步应用于肿瘤复发转移的诊治研究。 展开更多
关键词 人vegf165 单链抗体 原核表达 肿瘤
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人VEGF_(165)基因在狗骨髓基质细胞中的表达 被引量:2
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作者 刘日光 尹培荣 +4 位作者 杨述华 向阳 杨操 易诚青 刘建湘 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2004年第19期1476-1478,共3页
目的 :检测转染 pcDNA3 hVEGF165狗骨髓基质细胞的VEGF165mRNA表达。方法 :用脂质体介导转染狗骨髓基质细胞 ,用免疫组化及RT PCR检测VEGFmRNA的表达。结果 :重组质粒 pcDNA3 hVEGF165转染骨髓基质细胞后 ,免疫组化及RT PCR检测有VEGF... 目的 :检测转染 pcDNA3 hVEGF165狗骨髓基质细胞的VEGF165mRNA表达。方法 :用脂质体介导转染狗骨髓基质细胞 ,用免疫组化及RT PCR检测VEGFmRNA的表达。结果 :重组质粒 pcDNA3 hVEGF165转染骨髓基质细胞后 ,免疫组化及RT PCR检测有VEGFmRNA的表达。结论 展开更多
关键词 vegf165基因 骨髓基质细胞 基因表达
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转染VEGF_(165)基因的自体成肌细胞治疗心肌梗死的实验研究 被引量:2
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作者 庄炜 李莉 +2 位作者 章庆春 林国强 邓震宇 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期682-688,共7页
目的:将体外培养、纯化并转染VEGF165基因的新西兰兔自体骨骼肌成肌细胞植入心肌梗死区,观测转染VEGF165基因的成肌细胞移植对改善梗死区心肌血运重建和心功能的影响。方法:采用pcDNA3.1-VEGF165和pcDNA3.1质粒转染经体外培养及纯化的... 目的:将体外培养、纯化并转染VEGF165基因的新西兰兔自体骨骼肌成肌细胞植入心肌梗死区,观测转染VEGF165基因的成肌细胞移植对改善梗死区心肌血运重建和心功能的影响。方法:采用pcDNA3.1-VEGF165和pcDNA3.1质粒转染经体外培养及纯化的新西兰兔自体骨骼肌成肌细胞。结扎兔冠状动脉致局部心肌梗死后2周,分别于心肌梗死区移植转染VEGF165基因成肌细胞(实验组,n=8)和空载体成肌细胞(对照组,n=8),4周后观察心肌梗死边缘区毛细血管密度、植入细胞的形态鉴定和心功能改善情况。结果:成功将pcDNA3.1-VEGF165和pcDNA3.1质粒转染体外培养的兔自体骨骼肌成肌细胞,成肌细胞移植后能在梗死区种植成活、分化。实验组细胞移植区域的毛细血管密度较对照组高(P<0.05)。经Buxco系统有创心功能测定显示:实验组较对照组的左心室等容收缩期室内压最大上升速率[+dp/dtmax,(1607.23±102.67)mmHg/s vs(1217.77±89.91)mmHg/s]和左心室等容舒张期室内压最大下降速率[-dp/dtmax,(1535.09±81.34)mmHg/s vs(1174.58±91.50)mmHg/s]均有所改善。结论:转染VEGF165的成肌细胞能改善心肌梗死区域的血液供应,增加心肌收缩力,改善心功能。 展开更多
关键词 vegf165 成肌细胞 细胞移植 心肌梗死
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VEGF165b和VEGF165在胃癌组织中的表达及与预后的关系 被引量:1
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作者 关云艳 诸静芬 +3 位作者 欧希龙 吴海荣 吴锡平 王倩 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第27期41-44,共4页
目的研究VEGF165b和VEGF165在胃癌及癌旁正常组织中的表达及胃癌组织中VEGF165b m RNA/VEGF165 m RNA与预后的关系。方法分别应用实时RT-PCR和免疫组织化学法检测胃癌及癌旁正常组织中VEGF165b和VEGF165的基因及蛋白表达,并对患者进行2... 目的研究VEGF165b和VEGF165在胃癌及癌旁正常组织中的表达及胃癌组织中VEGF165b m RNA/VEGF165 m RNA与预后的关系。方法分别应用实时RT-PCR和免疫组织化学法检测胃癌及癌旁正常组织中VEGF165b和VEGF165的基因及蛋白表达,并对患者进行2年的随访,比较VEGF165b m RNA/VEGF165 m RNA比值及这两种蛋白表达水平在胃癌及癌旁组织中的变化;同时分析VEGF165b与VEGF165蛋白表达的相关性以及胃癌组织中VEGF165b m RNA/VEGF165 m RNA与预后的关系。结果在胃癌组织中VEGF165b m RNA/VEGF165 m RNA低于癌旁正常组织中的水平;在癌旁正常组织中VEGF165b基因及蛋白表达强于VEGF165,在胃癌组织中VEGF165b基因及蛋白的表达则低于VEGF165,而且两者表达呈负相关关系;此外,在两年内死亡的患者中VEGF165b m RNA/VEGF165 m RNA明显低于生存患者中的比值水平。结论与正常组织相比,胃癌组织中存在VEGF165b向VEGF165基因及蛋白水平上的优势转换,这种变化有望成为治疗胃癌的新靶点。 展开更多
关键词 vegf165B vegf165 实时RT-PCR 免疫组织化学 胃癌
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康复新液联合重组人干扰素α-2b治疗宫颈炎疗效及对IL-6、TNF-α和VEGF水平影响 被引量:24
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作者 王丽娜 张莹 +1 位作者 刘荣霞 梁珊 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2020年第6期186-189,共4页
目的探讨康复新液联合重组人干扰素α-2b治疗宫颈炎的疗效及对IL-6、TNF-α和VEGF水平影响。方法选取医院就诊的宫颈炎患者112例,采用随机数字表法分为两组各56例。对照组给予重组人干扰素α-2b治疗,治疗组给予康复新液。观察两组患者... 目的探讨康复新液联合重组人干扰素α-2b治疗宫颈炎的疗效及对IL-6、TNF-α和VEGF水平影响。方法选取医院就诊的宫颈炎患者112例,采用随机数字表法分为两组各56例。对照组给予重组人干扰素α-2b治疗,治疗组给予康复新液。观察两组患者临床疗效、临床症状缓解时间和宫颈修复时间、免疫功能指标水平、SF-36评分、VAS评分、血清炎性因子水平和不良反应发生情况。结果经过治疗后,治疗组治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05);治疗组患者临床症状缓解时间和宫颈修复时间显著低于对照组(P<0.05);治疗组CD^+3、CD^+4、NK、CD^+4/CD^+8水平高于对照组(P<0.05);两组患者治疗后CRP、TNF-α、IL-6和VEGF水平显著降低,VEGF水平显著升高(P<0.05);并且治疗组CRP、TNF-α、IL-6和VEGF水平改善程度较明显(P<0.05);两组患者VAS评分显著降低,SF-36评分显著升高(P<0.05);并且治疗组VAS评分和SF-36评分改善程度显著高于对照组(P<0.05)。结论采用康复新液联合重组人干扰素α-2b用于治疗宫颈炎,具有较好的临床疗效,能够明显改善患者免疫功能,值得在临床上推广应用。 展开更多
关键词 康复新液 重组人干扰素Α-2B 宫颈炎 IL-6、TNF-α和vegf水平
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VEGF_(165)在HepG2体外形成血管生成拟态中的作用 被引量:1
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作者 伍钢 朱芳 +3 位作者 李振宇 薛军 彭纲 任精华 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1245-1248,共4页
目的探讨VEGF165在人肝癌细胞株HepG2体外形成血管生成拟态(Vasculogenic mimicry,VM)中的作用。方法三维细胞培养HepG2,观察其形成血管样通道的能力;构建pcDNA3.0-VEGF165和pcDNA3.0-VEGF165b真核表达质粒,以Lipofectamine2000转染HepG... 目的探讨VEGF165在人肝癌细胞株HepG2体外形成血管生成拟态(Vasculogenic mimicry,VM)中的作用。方法三维细胞培养HepG2,观察其形成血管样通道的能力;构建pcDNA3.0-VEGF165和pcDNA3.0-VEGF165b真核表达质粒,以Lipofectamine2000转染HepG2细胞,RT-PCR及Westernblot检测转染后各组细胞VEGF165和VEGF165b的表达;三维培养转染后HepG2细胞,观察各组细胞形成血管生成拟态的能力。结果 HepG2细胞在三维细胞培养系统中可形成血管样通道;VEGF165及VEGF165b真核表达质粒转染HepG2细胞后,RT-PCR及Western blot均示VEGF165和VEGF165b表达分别上调,而转染VEGF165b质粒组VEGF165表达下调;三维细胞培养转染后的HepG2细胞,各组形成血管生成拟态的能力无明显区别。结论 HepG2细胞可于三维培养系统中形成管道结构,但VEGF165对HepG2细胞体外形成血管生成拟态的能力无明显影响。 展开更多
关键词 vegf165 肝癌 血管生成拟态
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MMP-2与VEGF_(165)基因mRNA在卵巢癌中表达及相关性研究 被引量:2
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作者 陈颖 赵巍 +1 位作者 张岩 蒋宏颉 《现代肿瘤医学》 CAS 2009年第6期1151-1153,共3页
目的:探讨MMP-2和VEGF165基因mRNA表达在卵巢癌发生和演进中的作用。方法:利用RT-PCR方法检测正常卵巢(n=5)、卵巢囊肿(n=5)、卵巢交界性肿瘤(n=9)和上皮性卵巢癌(n=60)中MMP-2和VEGF165基因mRNA表达。结果:MMP-2和VEGF165基因mRNA在卵... 目的:探讨MMP-2和VEGF165基因mRNA表达在卵巢癌发生和演进中的作用。方法:利用RT-PCR方法检测正常卵巢(n=5)、卵巢囊肿(n=5)、卵巢交界性肿瘤(n=9)和上皮性卵巢癌(n=60)中MMP-2和VEGF165基因mRNA表达。结果:MMP-2和VEGF165基因mRNA在卵巢交界性肿瘤和卵巢癌中的表达水平高于正常卵巢和卵巢囊肿(P<0.05),与卵巢癌的临床病理分期呈正相关(P<0.05),而与组织分化程度呈负相关(P<0.05);浆液性卵巢癌中MMP-2和VEGF165基因mRNA表达水平显著高于其他上皮性卵巢癌(P<0.05)。结论:在卵巢癌中MMP-2和VEGF165基因mRNA表达上调,与卵巢癌的发生和病理生物学行为关系密切;MMP-2和VEGF165基因mRNA表达上调参与了卵巢癌的发生,提高了卵巢癌的侵袭转移能力,因此,构成了卵巢癌发生和侵袭的分子基础。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 MMP-2基因 vegf165基因 MRNA表达
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pSV-VEGF165肌内原位注射促进兔缺血后肢侧支血管形成 被引量:2
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作者 赵意平 施娅雪 +3 位作者 张皓 张柏根 何天源 陈诗书 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期210-212,共3页
目的 为临床探索一种更简便安全的下肢动脉缺血性疾病的基因治疗途径。方法 建立兔后肢缺血动物模型 ,将体外构建的重组质粒 pSV VEGF16 5注射于缺血肌群 ,30d后行动脉造影并切取标本 ,测定毛细血管密度和毛细血管 /肌肉数比值。结果... 目的 为临床探索一种更简便安全的下肢动脉缺血性疾病的基因治疗途径。方法 建立兔后肢缺血动物模型 ,将体外构建的重组质粒 pSV VEGF16 5注射于缺血肌群 ,30d后行动脉造影并切取标本 ,测定毛细血管密度和毛细血管 /肌肉数比值。结果 经 pSV VEGF16 5治疗后 ,缺血肢体毛细血管密度和毛细血管 /肌肉数比值显著增加 ,小腿部位比大腿部位增加明显 ;动脉造影显示部分缺血肢体侧支动脉明显增多。结论 肌肉内原位注射 pSV VEGF16 5是一种简单有效的治疗基因转染途径 ,能显著增加缺血肢体侧支血管形成。 展开更多
关键词 重组重粒 pSV-vegf165 基因治疗 动脉闭塞性疾病
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VEGF_(165)单克隆抗体对视网膜新生血管的抑制作用 被引量:2
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作者 李亚萍 刘早霞 +2 位作者 孙大军 苏冠方 张晓光 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期621-622,共2页
目的 :探讨有效阻断视网膜新生血管发生的方法。方法 :对体外培养新生儿脐静脉血管内皮细胞进行血管内皮细胞生长因子 1 65 ( VEGF165)单克隆抗体、1 3-顺式维甲酸、INF- α、INF- γ4种药物筛选实验。用倒置显微镜观察细胞生长状态 ;用... 目的 :探讨有效阻断视网膜新生血管发生的方法。方法 :对体外培养新生儿脐静脉血管内皮细胞进行血管内皮细胞生长因子 1 65 ( VEGF165)单克隆抗体、1 3-顺式维甲酸、INF- α、INF- γ4种药物筛选实验。用倒置显微镜观察细胞生长状态 ;用 MTT法测 A560 nm值 ,计算细胞增殖抑制率。结果 :VEGF165单克隆抗体组浓度在 2 0 0 0 mg· L-1时 ,对血管内皮细胞的增殖抑制率达 91 %。1 3-顺式维甲酸对细胞最高增殖抑制率是 61 % ;IFN- γ浓度在 2 0 0 0 mg·L-1时 ,对细胞增殖抑制率为 5 6%。IFN- α浓度在 2 0 0 0 mg·L-1时 ,细胞增殖抑制率均低于 40 %。结论 展开更多
关键词 vegf165单克隆抗体 视网膜新生血管 抑制作用 视网膜新生血管性疾病 血管内皮细胞
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