超声清创术+外用重组人粒细胞巨细胞刺激因子凝胶剂对糖尿病足WagnerⅡ、Ⅲ级溃疡治疗效果及愈合情况分析

目的探究超声清创术+外用重组人粒细胞巨细胞刺激因子凝胶剂在糖尿病足WagnerⅡ、Ⅲ级溃疡治疗中的应用效果。方法选取2023年2月—2024年2月江苏省靖江市人民医院内分泌科及烧伤整形科收治的70例糖尿病足WagnerⅡ、Ⅲ级溃疡患者为研究对象,以随机数表法分为参照组(35例,予以常规清创+胰岛素治疗)和研究组(35例,予以超声清创术+外用重组人粒细胞巨细胞刺激因子凝胶剂治疗)。比较两组溃疡面愈合率、炎症因子水平及治疗总有效率。结果治疗后2周,研究组溃疡创面愈合率略高于参照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后1、2个月,研究组溃疡创面愈合率明显高于参照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。治疗前,两组降钙素原、超敏C反应蛋白水平比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。治疗后,两组降钙素原、超敏C反应蛋白水平均降低,且研究组显著低于参照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。研究组WagnerⅡ、Ⅲ级溃疡治疗总有效率高于参照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论超声清创术联合外用重组人粒细胞巨细胞刺激因子凝胶剂可促进糖尿病足WagnerⅡ、Ⅲ级溃疡面愈合,控制血清炎症因子水平,整体疗效显著。

重组荞麦胰蛋白酶抑制剂对HL-60细胞的促凋亡作用

为了研究基因重组荞麦胰蛋白酶抑制剂诱导HL-60细胞凋亡的作用并探讨其抗癌作用机理,用不同浓度的重组荞麦胰蛋白酶抑制剂体外作用于HL-60细胞,采用MTT比色法检测其对HL-60细胞的抑制率,应用光学显微镜观察细胞核的形态学变化,用DNA凝胶电泳法检测HL-60细胞的凋亡,用流式细胞术检测该抑制剂作用于HL-60细胞后引起的凋亡现象。结果表明:重组荞麦胰蛋白酶抑制剂对HL-60细胞的生长具有明显的抑制作用,且随着蛋白质浓度的增加对HL-60细胞生长抑制愈加明显,而对正常人外周血单个核细胞(PBMNC)无作用;荧光显微镜下观察发现经该蛋白作用后HL-60细胞核的形态呈现凋亡特征;流式细胞术分析表明,HL-60细胞经100μg/ml重组荞麦胰蛋白酶抑制剂作用后,凋亡率达到52%;琼脂糖凝胶电泳显示细胞DNA呈梯状降解。结论:重组荞麦胰蛋白酶抑制剂在体外能够明显抑制HL-60细胞的增长,并诱导细胞凋亡,这为重组荞麦胰蛋白酶抑制剂应用于急性髓细胞性白血病的治疗提供依据,也为重组基因工程植物蛋白药物的临床应用提供新思路。

重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a在大肠杆菌中的表达和纯化

为了大量制备重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a(rETIa) ,对构建的基因工程菌株E .coliBL2 1(DE3)pET2 2b mETIa进行了表达条件的优化 .用摇瓶培养 ,rETIa蛋白占菌体总蛋白 4 0 %以上 .经破碎菌体 洗涤包涵体 溶解包涵体 复性初步纯化后 ,再经二步柱层析纯化获得电泳纯的rETIa蛋白 .测定了rETIa对胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、组织型纤溶酶原激活因子缺失突变体 (NTA)的抑制活性 .

重组牛胰蛋白酶抑制剂对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的观察重组牛胰蛋白酶抑制剂(rBPTI)对小鼠急性肝损伤的保护作用。方法小鼠60只随机分成6组:正常对照组、模型组、rBPTI的3个剂量组(分别为3、6、12×104kIU·kg-1)、抑肽酶组(6×104kIU·kg-1)。每天腹腔注射给药,7d后体外注射CCl4建立小鼠急性肝损伤模型。末次给药后眼眶取血测定小鼠血清ALT、AST活性,观察肝脏组织病理改变。结果各剂量rBPTI可不同程度降低小鼠血清ALT、AST活性,降低肝组织MDA含量,与模型组比较差异有统计学意义(P<0·05、P<0·01),同时不同程度减轻肝组织病理损伤。结论rBPTI对体外CCl4诱导的小鼠急性肝损伤具有保护作用,作用效果同天然BPTI相当。

重组荞麦胰蛋白酶抑制剂对人肝癌细胞的凋亡及半胱氨酸天冬酶活性的影响

先前的研究表明,基因重组荞麦胰蛋白酶抑制剂(rBTI)具有诱导不同肿瘤细胞凋亡的作用.为了揭示其诱导肿瘤细胞凋亡的可能机理,从基因水平上探讨与凋亡有关的分子事件,本研究用不同浓度的rBTI体外作用于人肝癌细胞HepG2后,采用MTT比色法检测抑制剂对HepG2细胞的抑制率,用DNA凝胶电泳和细胞核的形态学观察检测HepG2细胞的凋亡.结果表明,rBTI在体外能够明显抑制HepG2细胞的增长,并诱导细胞凋亡.另外,细胞凋亡与Bcl-2/Bax mRNA水平有关.通过RT-PCR检测发现,细胞经过rBTI处理后,抗凋亡基因Bcl-2 mRNA水平下调,促凋亡基因Bax mRNA有所上调,而对照GAPDH无变化.对HepG2细胞中Fas/Fas配体及半胱氨酸天冬酶(caspase)的研究证明,细胞经过rBTI处理后,对死亡受体Fas mRNA没有影响;rBTI可明显激活caspase-3和caspase-9酶活性,对caspase-8活性几乎无影响.上述结果表明,rBTI对HepG2细胞具有明显的诱导凋亡作用,其诱导细胞凋亡的机制与caspase-3依赖性凋亡调节信号通路有关,未涉及Fas/Fas配体途径.

重组荞麦胰蛋白酶抑制剂延长C.elegans寿命的作用机制

重组荞麦胰蛋白酶抑制剂（recombinant buckwheat trypsin inhibitor,r BTI）是一种来源于荞麦PotatoⅠ抑制剂家族的丝氨酸蛋白酶抑制剂,具有很好的生物活性及功能。先前的研究表明,r BTI在秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）中具有很好的延长寿命的性质,但其具体的作用机制还不太清楚。本文的研究证明,r BTI能够调节转录因子DAF-16的转录活性,进而影响线虫的寿命,且该性质与其胰蛋白酶抑制活性密切相关。通过定点突变技术,分别对r BTI的45位、53位和44位氨基酸活性位点进行突变,获得了4种不同胰蛋白酶抑制活性的r BTI突变体,分别命名为r BTI-R45A,r BTI-R45F,r BTI-W53R和r BTI-P44T。经典模式生物秀丽隐杆线虫寿命检测实验显示,野生型r BTI可以明显延长C.elegans的寿命,且在0-10μmol/L范围内具有浓度依赖性。和未处理对照组相比,10μmol/L野生型r BTI延长寿命幅度可达到14.5%,但是突变体r BTI-R45 A,r BTI-R45 F和r BTI-W53 R均不同程度失去了延长寿命的功能。利用荧光显微观察及qRT-PCR等方法进一步研究发现,野生型r BTI可增强寿命调控转录因子DAF-16的转录活性。与寿命检测实验结果一致,4种r BTI突变体均不能使DAF-16转录活性增强。上述结果表明,在C.elegans中,r BTI可增强长寿因子DAF-16的转录活性,进而延长虫体寿命,且该功能的发挥依赖于其适当的胰蛋白酶抑制活性。本文的结果为进一步研究开发r BTI的功能提供了实验支持和理论基础。

重组丝氨酸蛋白酶抑制剂对链脲佐菌素诱导的2型糖尿病大鼠的影响

目的探讨重组丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)对链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病大鼠的影响。方法通过体外表达获得重组Vaspin蛋白。采用高脂饲料加小剂量注射STZ诱导2型糖尿病SD大鼠模型,对照组大鼠给予普通饲料喂养。将造模成功的大鼠随机分成两组,实验组腹腔注射100μl 0.5 mg/ml重组Vaspin蛋白,模型组以生理盐水代替,每天给药1次,连续给药2 w后,进行口服吐葡萄糖耐量(OGTT)试验;分离血清,测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)以及肿瘤坏死因子(TNF)-α,瘦素(Lep)的水平。结果 OGTT结果显示经过重组Vaspin蛋白腹腔注射治疗后的糖尿病大鼠血糖变化曲线接近于正常,且2 h后下降至对照组大鼠水平。经过Vaspin蛋白治疗2 w后,实验组大鼠的TC、TG、LDL和FBG、FINS、胰岛素抵抗(IR)均显著降低,脂肪因子Lep和TNF-α下降至正常水平。结论该研究获得的重组Vaspin具有活性,可以降低糖尿病大鼠的血糖,改善糖尿病大鼠的糖脂代谢和IR水平。

重组人源Kunitz型蛋白酶抑制剂治疗大鼠脑皮质缺血/再灌注损伤

目的旨在研究人源重组丝氨酸酶抑制剂rh KD/APP治疗大鼠脑皮质缺血/再灌注损伤的临床前景。方法构建大鼠大脑中动脉(MCAO)局灶性脑缺血/再灌注(I/R)的动物模型,分别用三个剂量rh KD/APP(4、8、16 mg/kg)的干预进行临床治疗,设神经保护药物尼莫地平治疗作为阳性对照,各干预治疗组分别进行临床评分、神经病理损伤、脑水肿程度的评估和比较,评价rh KD/APP在大鼠脑缺血/再灌注神经保护的临床疗效。同时,分组检测缺血/再灌注脑皮质的自由基氧化程度的三个指标(抗氧化酶SOD活性、Na+-K+-ATP酶活性、膜脂过氧化产物丙二醇MDA含量)、反映中性粒细胞呼吸爆发的髓过氧化物酶MPO活性、血管内皮表达粘附因子ICAM-1和E-selectin的表达水平以及损伤区神经元凋亡的状况。结果低、中、高剂量组rh KD/APP干预均能改善脑缺血/再灌注损伤大鼠的临床症状、脑水肿和神经病理损伤,且呈一定量效关系。与缺血/再灌注模型组大鼠比较,各个剂量的rh KD/APP干预均能提高损伤区脑组织抗氧化酶SOD和Na+-K+-ATP酶活性,降低丙二醇MDA含量,降低髓过氧化酶MPO活性,下调粘附因子ICAM-1和E-selectin的表达,拮抗受损神经元的凋亡。与尼莫地平治疗组比较,在降低MPO活性上,三个剂量rh KD/APP均显示出显著优势(P<0.05)。其余各个检测指标,rh KD/AP干预组与尼莫地平治疗组之间比较,差异无显著性。结论重组人源rh KD/APP丝氨酸酶抑制剂能够对大鼠脑缺血/再灌注神经损伤发挥保护作用,这些保护作用可能通过清除自由基、抑制中性粒细胞激活和炎性损伤,拮抗神经元凋亡等多层面综合完成。因此,人源Kunitz型丝氨酸蛋白酶抑制剂可成为一个潜在的神经保护药物。

重组肉粘合剂优选方案研究

重组肉是指利用剔骨肉或碎肉及加工过程中产生的边角料,通过肉制品加工原理,使肉重新粘结,以此来提高产品附加值。研究利用转谷氨酰胺酶、食盐、磷酸盐与非肉蛋白添加到肉制品中,通过正交试验得出了粘合剂的最佳配比及制备条件为:转谷氨酰胺酶∶食盐∶磷酸盐∶(酪蛋白或大豆蛋白或肉糜)=3∶3∶0.6∶(4或2或20)。

重组牛胰蛋白酶抑制剂对大鼠急性胰腺炎的治疗作用

目的:观察重组牛胰蛋白酶抑制剂(rBPTI)对大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)的治疗作用。方法:取大鼠60只,随机分成6组:假手术组、模型组、rBPTI的3个剂量组、抑肽酶组。注射牛磺胆酸钠建立大鼠ANP模型,股静脉注射给药48h后,测定大鼠血清和组织淀粉酶和脂肪酶含量,观察胰腺组织病理变化。结果:rBPTI治疗组可明显降低血清和组织淀粉酶、脂肪酶的浓度,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),且使胰腺的病理变化减轻。结论:rBPTI对牛磺胆酸钠诱导大鼠ANP具有治疗作用,作用效果同天然BPTI相当。

影响重组组织型纤溶酶原激活剂治疗卒中患者临床预后的相关因素

本文通过对大量文献的阅读,就可能影响重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)静脉溶栓治疗缺血性脑卒中患者临床预后的因素作一综述,rt-PA溶栓虽能改善患者临床预后,但受许多因素的影响,如年龄、性别、起病至溶栓治疗时间(OTT)、高血压病、溶栓时血压、糖尿病、溶栓时高血糖、房颤、卒中严重程度、抗血小板药物等,应在临床应用时充分考虑影响疗效的各种因素,进行全面评估。

重组蛋白酶抑制剂对大鼠胰腺缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨重组蛋白酶抑制剂(recombinant proteinase inhibitor,RPI)对大鼠胰腺缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用。方法 Wistar大鼠30只随机分为假手术组、I/R模型组和RPI组,分别测定各组大鼠血清淀粉酶、脂肪酶含量。检测各组血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)的变化。结果 RPI组的淀粉酶、脂肪酶含量较模型组显著降低(P<0.01);RPI组可明显降低模型组大鼠血清TNF-α、IL-1β(P<0.01)的水平。结论 RPI可以抑制大鼠胰腺I/R损伤所致的急性炎性反应,对大鼠胰腺I/R损伤有保护作用。

重组人干扰素α_(2a)涂剂的研制

研究了重组人干扰素α2 a涂剂的制备方法 ,进行了稳定性、皮肤过敏性、皮肤急性毒性等试验。结果表明 ,本品性质稳定 ,2～ 10°C保存 12个月后生物学活性无明显下降 ,使用安全 。

重组人血管内皮抑制剂联合化疗治疗晚期消化道肿瘤的疗效分析

目的探讨重组人血管内皮抑制剂联合化疗治疗晚期消化道肿瘤的临床疗效.方法：选取90例晚期消化道肿瘤患者为研究对象,分成2组,对照组44例,予常规化疗治疗,观察组46例,加用重组人血管内皮抑制剂治疗,观察治疗后疗效.结果：对照组缓解率36.36%、总有效率70.45%;观察组缓解率67.39%、总有效率89.13%,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;生活质量,对照组改善率15.91%、总有效率56.82%;观察组改善率41.30%、总有效率89.13%,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;生存时间,对照组0～6个月50.00%、〉6～12个月45.45%、〉12个月4.55%;观察组0～6个月17.39%、〉6～12个月65.22%、〉12个月17.39%,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;两组在白细胞下降、血小板下降、恶心呕吐、腹泻、周围神经毒性、心律失常、肝肾功能损害发生率上比较差异有统计学意义（P均〈0.05）.结论：重组人血管内皮抑制剂联合化疗治疗晚期消化道肿瘤临床效果显著.

地高辛标记核酸探针检测重组人白细胞介素1受体颉颃剂中DNA残余量的研究

试验旨在建立重组人白细胞介素1受体颉颃剂(interleukin-1receptor antagonist,IL-1ra)原液中宿主菌DNA残余量的检测方法。以重组白细胞介素1受体颉颃剂工程菌基因组DNA为模板,优化试验条件,借助超声波手段,制备地高辛标记的核酸探针,并以此探针进行狭缝杂交及显色反应。结果显示,在24批次重组人IL-1ra原液中,每人份使用剂量的宿主DNA残余量均小于10ng。结果表明,该方法灵敏度较高、特异性较强、重复性较好、操作步骤安全且较为方便,可用于重组人IL-1ra原液及半成品的DNA残余检测。

超高压与重组果胶甲酯酶抑制剂联合应用对鲜榨橙汁果胶甲酯酶活性及品质的影响

为了探究超高压与重组果胶甲酯酶抑制剂(recombinant pectin methylesterase inhibitor,rPMEI)联合处理对鲜榨橙汁中果胶甲酯酶(pectin methylesterase,PME)活性及品质的影响,研究了超高压(400、500和600 MPa,5 min,20℃)与重组果胶甲酯酶抑制剂对橙汁微生物、PME酶活、色泽和VC含量的影响。结果表明:超高压处理条件为500 MPa/5 min,rPMEI添加浓度为0.06 mg/mL时,橙汁中的菌落总数、霉菌与酵母菌数均能达到农业行业标准《NY/T434-2016绿色食品、果蔬汁饮料》所规定的要求,同时PME被完全钝化;橙汁色泽变化显著小于热处理组(ΔE^*=1.22<2.26);VC保留率为85.1%,显著高于热处理组(保留率=8.33%)。

2种家蚕蛋白酶抑制剂的重组表达及产物对胰岛素口服吸收的影响

口服胰岛素(INS)治疗糖尿病存在因胃肠道的蛋白酶而发生药物降解的问题。从家蚕蛹中分离了Bm Kazal、Bm CP82种蛋白酶抑制剂,设计其编码基因引物序列克隆2个目的基因,构建重组表达载体p ET28a-Bm Kazal和p ET32a-Bm CP8在大肠埃希菌(Escherichia coli)中表达并纯化了重组Bm Kazal和Bm CP8蛋白。将这2种蛋白酶抑制剂与INS混匀制成INS口服悬液给小鼠灌胃,研究其对INS口服吸收的影响。试验结果表明:按1.5 IU/kg剂量皮下注射INS的对照组小鼠,血药达峰浓度C_(max)为(7.56±1.40)m IU/L,达峰时间T_(max)为1 h;口服0.5μg/μL Bm CP8+15 IU/kg INS组、0.5μg/μL Bm Kazal+15 IU/kg INS组、0.5μg/μL Bm CP8+0.5μg/μL Bm Kazal+15 IU/kg INS组小鼠的血药达峰浓度C_(max)分别为(6.07±0.51)、(7.12±0.89)、(9.20±2.00)m IU/L,达峰时间T_(max)均为3 h;而按15 IU/kg剂量单纯口服INS对照组小鼠的血药浓度一直维持在4.32 m IU/L左右。以上结果说明Bm CP8、Bm Kazal能够协同INS经小鼠胃肠道口服吸收入血液,而且二者联合使用效果更好,使小鼠体内对INS的口服生物利用度由1.51%提高至4.17%,有促进小鼠对胰岛素口服吸收的作用。

重组人白介素-11注射剂致发疹性药疹一例

1病例资料 病人,女,52岁。缘于3个月前行右腹股沟淋巴结切除活检术,病理检查为转移性宫颈鳞状细胞癌（cTxN1M1,Ⅳ期）,病人已行4周期TP方案化疗,此次入院为第5次化疗。入院后给予GP方案同步化疗（具体：吉西他滨1g,VD,d 1、8、15＋顺铂30mg,VD,d 1、8、15,与放疗同步）,与前次化疗相同,给予配合昂丹司琼、甲氧氯普胺止吐,铝碳酸镁、兰索拉唑抑酸和护胃,以及参麦提高化疗疗效等处理。

重组人血管内皮抑制剂联合化疗治疗84例老年晚期消化道肿瘤的安全性评价

目的研究分析重组人血管内皮抑制剂联合化疗治疗老年晚期消化道肿瘤的疗效和安全性。方法回顾性分析我院于2015年3月至2017年3月收治的84例老年晚期消化道肿瘤患者的病历资料,随机分为对照组和观察组,对照组患者采取化疗方案治疗,观察组患者在化疗基础上采取重组人血管内皮抑制剂联合治疗,治疗后对比分析两组患者的临床总有效率、生活质量评分改善情况以及毒性反应发生率。结果 (1)观察组患者治疗后临床总有效率(90.5%)和对照组(76.2%)比较,明显较高,两组间比较,P <0.05,有统计学意义。(2)观察组患者治疗后生活质量改善率(45.2%)和对照组患者生活质量改善率(40.5%)比较,明显较高,P <0.05,有统计学意义。(3)观察组患者治疗后不良反应总发生率(11.9%)和对照组总不良反应发生率(40.5%)比较,明显较低,两组间比较,P <0.05,有统计学意义。结论重组人血管内皮抑制剂联合化疗治疗老年晚期消化道肿瘤疗效显著,可提高患者生活质量水平,安全性高,值得临床推广应用。