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马铃薯卷叶病毒与S病毒重组双CP多克隆抗体的制备
1
作者
吉祥
宋志成
+3 位作者
韦晓玲
杨煜
隋炯明
郭宝太
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2022年第4期212-219,共8页
为了制备出马铃薯卷叶病毒(PLRV)与S病毒(PVS)重组双CP多克隆抗体并用于PLRV与PVS这2种病毒的间接与DAS-ELISA检测,构建了PLRV与PVS融合双CP基因的原核表达载体pET22b-LRCP/SCP,用超声破碎法代替溶菌酶法裂解重组菌BL21(pET22b-LRCP/SCP...
为了制备出马铃薯卷叶病毒(PLRV)与S病毒(PVS)重组双CP多克隆抗体并用于PLRV与PVS这2种病毒的间接与DAS-ELISA检测,构建了PLRV与PVS融合双CP基因的原核表达载体pET22b-LRCP/SCP,用超声破碎法代替溶菌酶法裂解重组菌BL21(pET22b-LRCP/SCP)并提取菌体蛋白,用镍离子亲和层析纯化获得了分子质量为51.2 ku的高纯度的重组双CP。用该重组双CP作抗原免疫家兔获得了高效价(1∶128 k)抗血清。纯化的重组双CP多克隆抗体与PLRV或PVS阳性标准物特异性结合,与另外4种马铃薯主要病毒(PVX、PVY、PVA与PVM)无交叉反应。间接ELISA反应中,稀释度为1∶3200的重组双CP多克隆抗体与PLRV或PVS阳性物都呈现阳性反应;在DAS-ELISA反应中,稀释度均为1∶100的重组双CP多克隆抗体及其碱性磷酸酶标记物与PLRV或PVS的阳性标准物也分别呈现阳性反应。结果表明,制备的重组双CP抗体既可用于PLRV与PVS这2种病毒的间接ELISA检测,也可用于DAS-ELISA检测。
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关键词
马铃薯卷叶病毒
S病毒
重组双cp
多克隆抗体
间接ELISA
DAS-ELISA
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职称材料
甘薯羽状斑驳病毒和褪绿矮化病毒重组双CP融合基因的原核表达和抗血清的制备
2
作者
李恩广
郭宝太
+4 位作者
杨雪
朱虹
王晶珊
乔利仙
隋炯明
《青岛农业大学学报(自然科学版)》
2019年第4期275-279,共5页
由褪绿矮化病毒(SPCSV)和羽状斑驳病毒(SPFMV)协生共侵染引起病毒病(SPVD)是甘薯最严重的病害之一。为了建立一种高效的甘薯病毒病SPVD检测体系,本研究构建了SPCSV和SPFMV重组双CP基因的原核表达载体pET22b-SPVD-CP,该重组菌在20℃条件...
由褪绿矮化病毒(SPCSV)和羽状斑驳病毒(SPFMV)协生共侵染引起病毒病(SPVD)是甘薯最严重的病害之一。为了建立一种高效的甘薯病毒病SPVD检测体系,本研究构建了SPCSV和SPFMV重组双CP基因的原核表达载体pET22b-SPVD-CP,该重组菌在20℃条件下经IPTG诱导,获得了68 kDa的融合蛋白(重组双CP)。利用高纯度重组双CP为抗原免疫家兔,获得了SPVD的抗血清,间接ELISA检测显示抗体稀释度在1∶512 K的范围内,制备的抗体与抗原具有较强的结合活性。本研究结果为利用重组CP作抗原大量制备SPVD抗体奠定了基础。
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关键词
甘薯羽状斑驳病毒
甘薯褪绿矮化病毒
重组双cp
基因
原核表达
抗血清
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职称材料
题名
马铃薯卷叶病毒与S病毒重组双CP多克隆抗体的制备
1
作者
吉祥
宋志成
韦晓玲
杨煜
隋炯明
郭宝太
机构
青岛农业大学农学院
山东省农业科学院蔬菜花卉研究所
出处
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2022年第4期212-219,共8页
基金
山东省现代农业(薯类)产业技术体系项目(SDAIT-16-03)。
文摘
为了制备出马铃薯卷叶病毒(PLRV)与S病毒(PVS)重组双CP多克隆抗体并用于PLRV与PVS这2种病毒的间接与DAS-ELISA检测,构建了PLRV与PVS融合双CP基因的原核表达载体pET22b-LRCP/SCP,用超声破碎法代替溶菌酶法裂解重组菌BL21(pET22b-LRCP/SCP)并提取菌体蛋白,用镍离子亲和层析纯化获得了分子质量为51.2 ku的高纯度的重组双CP。用该重组双CP作抗原免疫家兔获得了高效价(1∶128 k)抗血清。纯化的重组双CP多克隆抗体与PLRV或PVS阳性标准物特异性结合,与另外4种马铃薯主要病毒(PVX、PVY、PVA与PVM)无交叉反应。间接ELISA反应中,稀释度为1∶3200的重组双CP多克隆抗体与PLRV或PVS阳性物都呈现阳性反应;在DAS-ELISA反应中,稀释度均为1∶100的重组双CP多克隆抗体及其碱性磷酸酶标记物与PLRV或PVS的阳性标准物也分别呈现阳性反应。结果表明,制备的重组双CP抗体既可用于PLRV与PVS这2种病毒的间接ELISA检测,也可用于DAS-ELISA检测。
关键词
马铃薯卷叶病毒
S病毒
重组双cp
多克隆抗体
间接ELISA
DAS-ELISA
Keywords
Potato leafroll virus
Potato virus S
Recombinant double
cp
Polyclonal antibody
Indirect ELISA
DAS-ELISA
分类号
S432.41 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
甘薯羽状斑驳病毒和褪绿矮化病毒重组双CP融合基因的原核表达和抗血清的制备
2
作者
李恩广
郭宝太
杨雪
朱虹
王晶珊
乔利仙
隋炯明
机构
青岛农业大学农学院/山东省旱作重点实验室
出处
《青岛农业大学学报(自然科学版)》
2019年第4期275-279,共5页
基金
山东省现代农业产业体系薯类创新团队遗传育种岗位(SDAIT-16-03)
山东省重点研发计划(2017GNC11114)
青岛农业大学大学生科技创新项目
文摘
由褪绿矮化病毒(SPCSV)和羽状斑驳病毒(SPFMV)协生共侵染引起病毒病(SPVD)是甘薯最严重的病害之一。为了建立一种高效的甘薯病毒病SPVD检测体系,本研究构建了SPCSV和SPFMV重组双CP基因的原核表达载体pET22b-SPVD-CP,该重组菌在20℃条件下经IPTG诱导,获得了68 kDa的融合蛋白(重组双CP)。利用高纯度重组双CP为抗原免疫家兔,获得了SPVD的抗血清,间接ELISA检测显示抗体稀释度在1∶512 K的范围内,制备的抗体与抗原具有较强的结合活性。本研究结果为利用重组CP作抗原大量制备SPVD抗体奠定了基础。
关键词
甘薯羽状斑驳病毒
甘薯褪绿矮化病毒
重组双cp
基因
原核表达
抗血清
Keywords
sweet potato feathery mottle virus(SPFMV)
sweet potato chlorotic stunt virus(SPCSV)
recombinant double
cp
gene
prokaryotic expression
antiserum
分类号
X767.5 [环境科学与工程—环境工程]
X172 [环境科学与工程—环境科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
马铃薯卷叶病毒与S病毒重组双CP多克隆抗体的制备
吉祥
宋志成
韦晓玲
杨煜
隋炯明
郭宝太
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2022
0
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职称材料
2
甘薯羽状斑驳病毒和褪绿矮化病毒重组双CP融合基因的原核表达和抗血清的制备
李恩广
郭宝太
杨雪
朱虹
王晶珊
乔利仙
隋炯明
《青岛农业大学学报(自然科学版)》
2019
0
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