重组子宫内膜抗原制备及其在蛋白芯片检测中的应用

目的探索一种纯度高、简便、低成本制备抗子宫内膜抗原的系统和便捷的检测方法。方法通过YK537大肠杆菌表达系统制备人重组子宫内膜抗原蛋白。获得蛋白制备蛋白芯片,利用蛋白芯片方法和酶联免疫吸附法(ELISA)方法检测71例不孕患者抗子宫内膜抗体。结果重组子宫内膜蛋白基因序列克隆入表达载体phoA下游并在大肠杆菌中成功表达。SDS-PAGE和HPLC的结果显示重组子宫内膜抗原蛋白纯度大于95%。通过蛋白芯片和ELISA检测显示蛋白芯片和传统ELISA方法的受试者工作特征曲线(ROC曲线)显示结果一致,曲线下面积为0.89。结论新设计的重组子宫内膜抗原蛋白能在大肠杆菌分泌表达系统简便、高效地表达,将获得的新抗原用于蛋白芯片,操作简便,结果可信,有望成为临床检测抗子宫内膜抗体的手段。