重组溶瘤腺病毒rAd-E1A-CDglyTK的构建和体内、外抑杀瘤作用的实验研究

目的构建重组溶瘤腺病毒r Ad-E 1A-CDgly TK,并研究其在体内、体外杀瘤作用的应用。方法选取2011年2月~2013年12月北华大学附属医院收治的卵巢癌患者100例,随机均分为治疗组与对照组（n=50）,治疗组采取患者的癌症细胞SKOV 3细胞,将病毒质粒经介质传染给癌症细胞并进行PCR体外扩增,经紫外线分光光度法检测病毒颗粒浓度,以TCID 50法检测感染性滴度,并计算病毒比活性,保证植入的病毒含有E 1A基因片段;对照组患者进行体内植入重组溶瘤腺病毒r Ad-E 1A-CDgly TK,观察抑制杀瘤疗效。结果经PCR体外扩增,得到DNA片段,进行凝胶电泳,可知植入的重组溶瘤腺病毒含有E 1A基因片段。通过紫外线分光光度法测得治疗组病毒颗粒浓度比上测得的感染性滴度得到病毒比活性为3.56%,显著高于对照组2.01%（P〈0.05）。进行体外抑瘤实验中,治疗组注入病毒成分为r Ad-E 1A-CDgly TK,其对SKOV 3细胞的生长抑制率为（16.59±1.57）,显著高于含有r AdCDgly TK的对照组生长抑制率（10.80±1.47）（P〈0.05）。体内抑瘤实验中,治疗组生长抑制率为（26.12±8.11）,显著高于对照组（1.69±4.12）,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论重组溶瘤腺病毒r Ad-E 1A-CDgly TK具有较好的抑制杀瘤作用,其中体内杀瘤强于体外杀瘤,疗效显著,值得推广使用。

重组溶瘤腺病毒联合纳米粒子对HepG2细胞毒性的作用

目的:研究利用纳米粒子载体,提高溶瘤腺病毒进入HepG2细胞的靶向,以及在HepG2细胞中的表达,从而提高治疗肝癌的效果。方法:使用MTS法测定重组溶瘤腺病毒联合纳米粒子对体外培养的肝癌细胞HepG2的毒性。结果:重组溶瘤腺病毒联合纳米粒子对肝癌细胞HepG2具有明显的毒性作用。结论:重组溶瘤腺病毒联合纳米粒子对肝癌细胞HepG2有抑制作用,可以为以后的肝癌治疗提供新的研究思路和理论依据。

重组溶瘤腺病毒对肺癌干细胞的抑制作用

本研究利用重组溶瘤腺病毒作用于肺癌干细胞,探讨其对肺癌干细胞的抑制作用。试验将表达Apoptin蛋白的重组溶瘤腺病毒Ad-VT作用于肺癌干细胞后,采用CCK-8法检测肺癌干细胞的存活率,AnnexinⅤ-FITC/PI和JC-1染色检测重组溶瘤腺病毒诱导肺癌干细胞凋亡的作用,Transwell迁移试验及Biocoat侵袭试验检测肺癌干细胞迁移侵袭情况。结果表明,Ad-VT能降低肺癌干细胞的存活率和细胞线粒体膜电位,诱导肺癌干细胞发生凋亡,并且能够抑制肺癌干细胞的迁移侵袭能力,提示Ad-VT对肺癌干细胞具有抑制作用。